摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-10页 |
1 文献综述 | 第10-16页 |
·胁迫 | 第10页 |
·转录因子 | 第10-11页 |
·转录因子的结构 | 第10-11页 |
·转录因子的分类 | 第11页 |
·转录因子的研究方法 | 第11页 |
·NAC转录因子 | 第11-14页 |
·NAC转录因子的结构 | 第12页 |
·NAC转录因子的功能 | 第12-14页 |
·NAC转录因子的研究现状及展望 | 第14页 |
·辽宁碱蓬 | 第14-15页 |
·研究目的及意义 | 第15页 |
·本研究的技术路线 | 第15-16页 |
2 SlNAC4、SlNAC10基因克隆及生物信息学分析 | 第16-36页 |
·实验材料 | 第16-17页 |
·植物材料 | 第16页 |
·菌株和质粒 | 第16页 |
·试剂 | 第16页 |
·培养基 | 第16页 |
·引物 | 第16-17页 |
·主要仪器设备 | 第17页 |
·实验方法 | 第17-25页 |
·SlNAC4、SlNAC10基因cDNA全长的获得 | 第17-25页 |
·SlNAC4、SlNAC10基因生物信息学分析 | 第25页 |
·实验结果与分析 | 第25-35页 |
·SlNAC4、SlNAC10基因全长的获得 | 第25-28页 |
·SlNAC4、SlNAC10基因生物信息学分析 | 第28-35页 |
·讨论 | 第35-36页 |
3 SlNAC4、SlNAC10基因表达特性分析 | 第36-41页 |
·实验材料 | 第36-37页 |
·植物材料 | 第36页 |
·实验试剂 | 第36页 |
·仪器设备 | 第36页 |
·引物 | 第36-37页 |
·实验方法 | 第37-38页 |
·辽宁碱蓬幼苗培养及非生物胁迫处理 | 第37页 |
·总RNA的提取及检测 | 第37页 |
·反转录成cDNA | 第37页 |
·实时荧光定量PCR | 第37-38页 |
·实验结果 | 第38-40页 |
·辽宁碱蓬总RNA的提取 | 第38页 |
·SlNAC4、SlNAC10基因在辽宁碱蓬中的表达特异性 | 第38-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
4 SlNAC4、SlNAC10亚细胞定位分析 | 第41-48页 |
·实验材料 | 第41-42页 |
·植物材料 | 第41页 |
·实验试剂 | 第41页 |
·仪器设备 | 第41页 |
·引物 | 第41-42页 |
·实验方法 | 第42-44页 |
·亚细胞定位载体的构建 | 第42-43页 |
·洋葱表皮细胞转化 | 第43-44页 |
·洋葱表皮细胞镜检 | 第44页 |
·实验结果 | 第44-47页 |
·亚细胞定位载体的构建 | 第44-46页 |
·亚细胞定位 | 第46-47页 |
·讨论 | 第47-48页 |
5 SlNAC4、SlNAC10转录激活作用分析 | 第48-54页 |
·实验材料 | 第48-49页 |
·菌株 | 第48页 |
·实验试剂 | 第48页 |
·相关溶液的配制 | 第48页 |
·设备仪器 | 第48-49页 |
·引物 | 第49页 |
·实验方法 | 第49-50页 |
·酵母表达载体构建 | 第49页 |
·制备酵母菌感受态细胞 | 第49-50页 |
·阳性质粒转化酵母菌 | 第50页 |
·β-半乳糖苷酶活性检测 | 第50页 |
·实验结果 | 第50-53页 |
·酵母表达载体的构建 | 第50-52页 |
·转录激活作用分析 | 第52-53页 |
·讨论 | 第53-54页 |
6 SlNAC4、SlNAC10基因转化拟南芥及转基因拟南芥抗逆性分析 | 第54-64页 |
·实验材料 | 第54-55页 |
·植物材料 | 第54页 |
·实验试剂 | 第54页 |
·仪器设备 | 第54页 |
·引物 | 第54-55页 |
·实验方法 | 第55-57页 |
·植物表达载体的构建 | 第55页 |
·农杆菌转化拟南芥 | 第55-56页 |
·阳性拟南芥的筛选 | 第56页 |
·转基因拟南芥半定量RT-PCR分析 | 第56-57页 |
·转基因拟南芥的抗性分析 | 第57页 |
·实验结果 | 第57-63页 |
·植物表达载体的构建 | 第57-59页 |
·转基因拟南芥的筛选 | 第59-60页 |
·外源基因在转基因拟南芥半中的表达 | 第60-61页 |
·转基因拟南芥的胁迫分析 | 第61-63页 |
·讨论 | 第63-64页 |
结论 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
附录A 培养基 | 第72-75页 |
附录B 载体 | 第75-77页 |
附录C Marker | 第77-78页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第78-79页 |
致谢 | 第79页 |