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对虾白斑综合征病毒LAMP-LFD检测方法的建立

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-12页
第一章 文献综述第12-30页
   ·病毒的命名及分类第12-13页
   ·WSSV传播方式及寄主范围第13-14页
   ·WSSV形态和超微结构第14-16页
     ·主要的囊膜蛋白第14-15页
     ·主要的核糖体蛋白第15-16页
   ·WSSV的基因组构成第16-20页
     ·病毒基因表达的时序性基因第18页
     ·潜伏期相关基因第18-19页
     ·抗凋亡基因第19页
     ·WSSV最高表达量的基因第19-20页
   ·WSSV的控制和诊断方法第20-25页
     ·WSSV的控制措施第20-23页
     ·WSSV的检测方法第23-25页
   ·环介导等温扩增技术(LAMP)及其水生物病原体诊断中的应用第25-29页
     ·简介第25-26页
     ·LAMP的原理第26-27页
     ·LAMP产物的可视化判定第27页
     ·LAMP在病毒中的应用第27-28页
     ·基于LAMP的检测方法的优势和存在的问题第28页
     ·LAMP在对虾疾病中的应用第28-29页
   ·本章小结第29-30页
第二章 对虾白斑综合征病毒LAMP检测方法的建立第30-44页
   ·材料与方法第30-38页
     ·质粒、菌种和试剂第30-31页
     ·主要设备仪器第31页
     ·主要液体试剂第31-32页
     ·WSSV-VP28基因的扩增第32-33页
     ·pDMT-VP28重组质粒的构建第33-35页
     ·pDMT-VP28重组质粒的扩增及提取第35-36页
     ·LAMP及nested-PCR引物的设计第36-37页
     ·LAMP反应的体系建立及条件的优化第37页
     ·Nested-PCR反应的体系第37-38页
     ·WSSV-DNA的LAMP与nested-PCR检测限的测定及对比第38页
   ·结果与分析第38-42页
     ·pDMT-VP28重组质粒的鉴定结果第38页
     ·LAMP检测WSSV的条件优化第38-39页
     ·LAMP检测WSSV的可视化结果第39-40页
     ·LAMP和nest-PCR的检测限的测定与对比第40-42页
   ·讨论第42-44页
第三章 抗FITC单克隆抗体的制备第44-57页
   ·材料与方法第44-51页
     ·试剂与溶液第44-46页
     ·主要仪器设备第46页
     ·实验所需动物和细胞第46-47页
     ·FITC人工抗原的合成第47页
     ·FITC人工抗原鉴定第47页
     ·抗FITC-pAb制备及鉴定第47-48页
     ·抗FITC杂交瘤细胞系的建立第48-50页
     ·抗FITC-mAb的生产第50-51页
     ·抗FITC-mAb的免疫学特性鉴定第51页
   ·结果与分析第51-55页
     ·FITC人工抗原鉴定结果第51页
     ·抗FITC-pAb的效价及敏感性鉴定结果第51-53页
     ·抗FITC杂交瘤细胞株的建立和筛选结果第53页
     ·细胞培养上清、腹水和纯化抗FITC-mAb效价测定结果第53页
     ·抗FITC-mAb敏感性的鉴定结果第53-55页
   ·讨论第55-57页
第四章 FITC核酸检测侧向层析试纸的研制第57-65页
   ·材料与方法第57-61页
     ·试剂、溶液及耗材第57页
     ·主要仪器设备第57-58页
     ·FITC-LFD的研制第58-59页
     ·LAMP-LFD法检测WSSV方法的建立和检测限的测定第59-61页
   ·结果与分析第61-64页
     ·WSSV-LAMP-LFD检测方法的建立及其条件的优化第61-63页
     ·WSSV-LAMP-LFD法检测WSSV检测限测定第63-64页
   ·讨论第64-65页
第五章 研究总结第65-66页
参考文献第66-73页
附录A: 英文缩略词表(Abbreviations)第73-75页
作者简历第75-76页
致谢第76页

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