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玉米抗逆相关基因Zm-Remorin的克隆和功能分析

致谢第1-8页
摘要第8-10页
第一章 文献综述第10-22页
 1 玉米的生产现状第10-11页
 2 植物抗病信号传导途径第11-13页
 3 植物抗非生物胁迫的信号传导途径第13-14页
 4 Remorin蛋白的研究进展第14-15页
   ·Remorin的来源第14页
   ·Remorin蛋白的物种分布和结构特点第14-15页
   ·Remorin蛋白在植物抗性中的研究第15页
 5 实时荧光定量技术第15-18页
   ·荧光定量PCR的概念及发展史第15-16页
   ·荧光定量PCR的实验方法第16-17页
   ·荧光定量PCR的数据分析方法第17-18页
 6 植物转基因技术第18-19页
   ·植物转基因的概念及方法第18-19页
   ·植物转基因技术的应用第19页
 7 研究的目的与意义第19-22页
第二章 Zm-Remorin的克隆和表达分析第22-38页
 1 材料与方法第22-29页
   ·实验材料第22页
   ·材料处理与取样第22-23页
   ·实验方法第23-29页
     ·植物总RNA的提取及检测第23页
     ·植物DNA提取第23-24页
     ·cDNA第一链的合成和检测第24-25页
     ·Zm-Remorin的克隆第25-26页
     ·Zm-Remorin PCR扩增产物的回收、连接与转化第26-27页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第27-28页
     ·Zm-Remorin的表达分析第28页
     ·数据处理第28-29页
 2 结果分析第29-36页
   ·RNA的提取与cDNA第一链的合成、检测第29页
   ·Zm-Remorin基因的克隆第29-32页
   ·Zm-Remorin的序列分析及同源性比较第32-33页
   ·Zm-Remorin在不同组织问及不同胁迫条件下的表达分析第33-36页
 3 结论与讨论第36-38页
   ·非生物胁迫下Zm-Remorin的表达分析第36页
   ·激素处理后Zm-Remorin的表达分析第36-37页
   ·接种SCMV后Zm-Remorin的表达分析第37-38页
第三章 Zm-Remorin的亚细胞定位第38-50页
 1 材料与方法第38-44页
   ·实验材料第38页
   ·实验方法第38-44页
     ·Zm-Remorin亚细胞定位预测第39页
     ·农杆菌感受态细胞的制备第39页
     ·质粒提取方法第39-40页
     ·GFP融合表达载体的构建第40-42页
     ·拟南芥转化第42-43页
       ·拟南芥种植第42页
       ·重组质粒和空载体的转化第42-43页
     ·转基因拟南芥阳性植株的筛选第43-44页
       ·转基因拟南芥的抗性筛选第43页
       ·转基因拟南芥的PCR检测第43-44页
     ·Zm-Remorin在拟南芥中的亚细胞定位第44页
 2 结果分析第44-48页
   ·Zm-Remorin的亚细胞定位预测第44页
   ·荧光表达载体的构建及农杆菌转化第44-46页
     ·目的片段的扩增及酶切第44-45页
     ·重组质粒的连接及农杆菌转化第45-46页
   ·转基因拟南芥的筛选及亚细胞定位第46-48页
     ·转基因拟南芥的抗性及PCR筛选第46-47页
     ·Zm-Remorin在拟南芥中的亚细胞定位第47-48页
 3 结论与讨论第48-50页
第四章 Zm-Remorin的功能分析第50-60页
 1 材料与方法第50-52页
   ·实验材料第50页
   ·Zm-Remorin过表达载体的构建第50页
   ·转基因拟南芥阳性植株的筛选第50页
   ·转基因T_3代拟南芥处理第50-52页
     ·拟南芥种植第50-51页
     ·盐胁迫条件下,转基因T_3代拟南芥处理第51页
     ·干旱条件下转基因T_3代拟南芥处理第51页
     ·转基因拟南芥的生物胁迫(禾谷镰刀菌侵染)第51-52页
       ·拟南芥的种植第51页
       ·分生孢子悬浮液的制备第51页
       ·接种、取样与表型鉴定第51-52页
     ·相关基因real-time PCR的引物设计第52页
 2 结果分析第52-57页
   ·转基因拟南芥的抗病性鉴定和病程相关基因的表达第52-54页
     ·禾谷镰刀菌侵染后拟南芥的表型分析第52-53页
     ·转基因拟南芥病程相关基因的表达分析第53-54页
   ·转基因拟南芥的抗旱性鉴定和干旱相关基因的表达第54-55页
     ·干旱处理后拟南芥的表型分析第54-55页
     ·干转基因拟南芥干旱相关基因的表达分析第55页
   ·转基因拟南芥的耐盐性鉴定和耐盐相关基因的表达第55-57页
     ·盐处理后拟南芥的表型分析第55-56页
     ·转基因拟南芥耐盐相关基因的表达分析第56-57页
 3 结论与讨论第57-58页
   ·Zm-Remorin在抵抗非生物胁迫中的作用第57-58页
   ·Zm-Remorin在抗生物胁迫中的作用第58页
 4 Zm-Remorin下一步的研究展望第58-60页
参考文献第60-68页
Abstract第68-69页

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