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华南美丽葡萄与陆地棉中原花青素生物合成及其ANR途径鉴定

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-11页
第1章 文献综述第11-17页
   ·原花青素的生物功能与结构特征第11-12页
   ·原花青素生物合成的 LAR 途径和 ANR 途径第12-14页
   ·葡萄和棉花原花青素生物合成概述第14-16页
   ·本研究的目的与意义第16-17页
第2章 华南美丽葡萄叶片原花青素鉴定以及相关基因表达分析第17-25页
   ·材料与方法第17-20页
     ·植物材料第17页
     ·原花青素提取第17页
     ·原花青素提取物 TLC 分析第17-18页
     ·原花青素提取物 HPLC 分析第18页
     ·原花青素水解与分光光度计检测第18页
     ·原花青素水解物 TLC 分析第18-19页
     ·原花青素水解物 HPLC 分析第19页
     ·总 RNA 提取以及原花青素生物合成相关基因的 semi-RT-PCR 分析第19-20页
   ·结果与分析第20-24页
     ·华南美丽葡萄叶片不同发育阶段原花青素的鉴定第20-23页
     ·原花青素生物合成相关基因在华南美丽葡萄叶片发育过程中的表达模式第23-24页
   ·小结第24-25页
第3章 VbANR 的克隆与功能表征第25-43页
   ·材料与方法第25-32页
     ·材料第25页
     ·VbANR 基因的 T 克隆第25-26页
     ·VbANR 原核表达载体构建第26-27页
     ·VbANR 重组蛋白表达与纯化第27-28页
     ·VbANR 重组蛋白酶活性以及酶促动力学检测第28页
     ·VbANR 的亚细胞定位载体构建第28-29页
     ·VbANR 的亚细胞定位第29-30页
     ·构建植物表达载体 PZP-VbANR第30-31页
     ·异位表达 VbANR 于拟南芥 BAN 突变体第31页
     ·原花青素组织染色第31-32页
   ·结果与分析第32-41页
     ·VbANR 的克隆以及序列分析第32-34页
     ·VbANR 的原核表达与活性检测第34-36页
     ·VbANR 的酶促动力学分析第36-40页
     ·VbANR 的亚细胞定位以及拟南芥 ban 突变体的功能互补第40-41页
   ·小结第41-43页
第4章 陆地棉中原花青素与黄烷-3-醇的鉴定第43-48页
   ·材料与方法第43-44页
     ·材料第43页
     ·原花青素提取第43页
     ·原花青素组织染色第43页
     ·原花青素 TLC 分析第43页
     ·原花青素 HPLC 分析第43页
     ·原花青素水解与分光光度计分析第43-44页
     ·原花青素水解产物 TLC 分析第44页
     ·原花青素水解产物 HPLC 分析第44页
   ·结果与分析第44-47页
   ·小结第47-48页
第5章 GhANR 的克隆与功能表征第48-60页
   ·材料与方法第48-50页
     ·材料第48页
     ·GhANR 的 T 克隆第48页
     ·GhANR 原核表达载体构建第48页
     ·GhANR 重组蛋白表达与纯化第48页
     ·GhANR 重组蛋白活性检测第48-49页
     ·构建植物表达载体 PZP-GhANR 以及转化拟南芥 ban 突变体第49页
     ·原花青素组织染色第49页
     ·病毒介导的基因沉默 (VIGS) pYL-156-GhANR 重组载体构建第49-50页
     ·VIGS 介导的 GhANR 基因沉默第50页
     ·花青素提取与分析第50页
   ·结果与分析第50-59页
     ·GhANR 的克隆与原核表达第50-54页
     ·GhANR 的酶促活性分析第54页
     ·GhANR 对拟南芥 ban 突变体的功能互补第54-55页
     ·通过 VIGS 法沉默陆地棉中 GhANR第55-59页
   ·小结第59-60页
第6章 讨论与结论第60-63页
   ·华南美丽葡萄叶片中原花青素合成以及相关基因的表达第60-61页
   ·陆地棉原花青素合成第61页
   ·VbANR 与 GhANR 的克隆鉴定以及功能表征第61-63页
致谢第63-64页
参考文献第64-69页
作者在学期间取得的学术成果第69-70页
附录A VbANR 与 GhANR 核苷酸序列第70-71页
附录B 棉花原花青素 HPLC 分析第71-73页
附录C Trx-VbANR 动力学分析补充图第73-75页

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