| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略词 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-23页 |
| 1. 能源植物研究进展 | 第11-15页 |
| 2. 甜高粱研究进展 | 第15-16页 |
| 3. 木质素合成研究进展 | 第16-20页 |
| 4. 4-香豆酸辅酶A连接酶(4CL)研究进展 | 第20-21页 |
| 5. 研究目的及意义 | 第21-23页 |
| 第一章 甜高粱4CL基因的克隆、鉴定、时空表达分析 | 第23-49页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·所用菌株 | 第23页 |
| ·所用载体 | 第23页 |
| ·酶及生化试剂 | 第23-24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-32页 |
| ·甜高粱种子的消毒及种植 | 第24页 |
| ·RNA提取 | 第24-25页 |
| ·PCR反应 | 第25-27页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
| ·TAE琼脂糖凝胶DNA回收(E.Z.N.A.TM Gel Extraction Kit) | 第27页 |
| ·DNA片段连接 | 第27-28页 |
| ·质粒转化 | 第28页 |
| ·质粒提取 | 第28-29页 |
| ·原核蛋白表达及鉴定 | 第29页 |
| ·重组蛋白纯化 | 第29-30页 |
| ·丙烯酰胺(PAGE)凝胶电泳 | 第30页 |
| ·酶活测定 | 第30页 |
| ·4CL基因的遗传进化分析 | 第30-31页 |
| ·4CL基因引物设计 | 第31-32页 |
| ·结果分析 | 第32-49页 |
| ·高粱4CL蛋白序列的遗传进化分析 | 第32-36页 |
| ·甜高粱4CL基因克隆 | 第36-37页 |
| ·甜高粱4CL蛋白活性分析 | 第37-41页 |
| ·甜高粱4CL Class Ⅰ与4CL Class Ⅱ基因时空表达分析 | 第41-44页 |
| ·甜高粱4CL ClassⅠ各基因时空表达分析 | 第44-49页 |
| 第二章 甜高粱4CL基因的遗传转化 | 第49-63页 |
| ·材料 | 第49-51页 |
| ·植物材料及其培养 | 第49页 |
| ·所用菌株 | 第49页 |
| ·所用载体 | 第49页 |
| ·酶及生化试剂 | 第49-50页 |
| ·培养基 | 第50-51页 |
| ·方法 | 第51-56页 |
| ·甜高粱的愈伤诱导及培养 | 第51页 |
| ·4CL RNAi载体的构建 | 第51-53页 |
| ·农杆菌感受态细胞制备及转化 | 第53-54页 |
| ·根癌农杆菌法转化甜高粱愈伤 | 第54页 |
| ·基因枪法转化甜高粱愈伤 | 第54-55页 |
| ·甜高粱DNA提取——十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法 | 第55页 |
| ·转基因阳性甜高粱苗的鉴定PCR法 | 第55-56页 |
| ·结果分析 | 第56-63页 |
| ·4CL RNAi干扰载体pFGC5941-4CL-RNAi的构建与转化 | 第56-57页 |
| ·外植体诱导体系的优化 | 第57-60页 |
| ·愈伤组织继代及分化体系的优化 | 第60页 |
| ·基因转化及转基因阳性鉴定 | 第60-63页 |
| 结论与讨论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第75页 |
