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短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevs)HAB-5活性成分的提取及其突变体的筛选

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
上篇 文献综述第12-22页
 1 短短芽孢杆菌的形态特征及其功能第12页
 2 短短芽孢杆菌的分类第12页
 3 短短芽孢杆菌的抑菌机制第12-13页
 4 短短芽孢杆菌产生的抗菌物质第13-14页
   ·短杆菌酪肽第13页
   ·短杆菌肽第13-14页
   ·其它抗菌物质第14页
 5 活性物质的提取、分离纯化技术第14-17页
   ·活性物质的提取第14-15页
   ·抑菌蛋白的分离纯化技术第15-17页
 6 短短芽孢杆菌对植物的促生作用第17-18页
 7 短短芽孢杆菌的防病作用第18-19页
 8 短短芽孢杆菌的遗传基因的改良第19页
 9 Harpin蛋白的分子生物学特性和功能第19-21页
 10 本研究意义第21-22页
下篇 研究内容第22-61页
 1 材料与方法第22-32页
   ·材料第22-24页
     ·供试细菌和真菌第22-23页
     ·供试植物材料第23页
     ·培养基第23页
     ·主要试剂第23-24页
   ·方法第24-32页
     ·HAB-5对多种病原菌的拮抗作用测定第24页
     ·菌悬液的配置第24页
     ·短短芽孢杆菌HAB-5对番茄种子的促生作用测定第24页
     ·短短芽孢杆菌HAB-5对芒炭疽菌的拮抗效果第24-25页
     ·HAB-5最适培养基及其最佳条件的筛选第25页
       ·最适培养基的选择第25页
       ·培养时间对HAB-5活性成分生成的影响第25页
       ·培养温度对HAB-5活性成分生成的影响第25页
       ·装液量对HAB-5活性成分生成的影响第25页
     ·HAB-5菌体破碎液及其总蛋白的提取第25-26页
       ·菌体破碎液的提取第25页
       ·从Trizol裂解液中分离总蛋白第25-26页
       ·细菌蛋白质微量提取试剂盒法第26页
     ·HAB-5活性物质的泌出方式第26页
     ·HAB-5活性物质的提取第26-28页
       ·HAB-5上清液的有机溶剂萃取及其抑菌活性第26页
       ·采用硫酸铵沉淀法对HAB-5上清液的提取第26页
       ·采用低温乙醇沉淀法对HAB-5上清液、MB培养基的提取第26-27页
       ·SDS-PAGE分析第27-28页
     ·Sephadex G-50凝胶柱分离HAB-5上清液粗提物第28页
     ·乙醇粗提物的稳定性测定第28-29页
       ·乙醇粗提物热稳定性测定第28页
       ·乙醇粗提物酸碱性测定第28页
       ·蛋白酶K和胰蛋白酶作用的稳定性第28页
       ·光稳定性测定第28-29页
       ·抗紫外线测定第29页
     ·质粒提取第29-30页
     ·短短芽孢杆菌HAB-5的转化方法第30页
     ·引物设计与合成第30页
     ·目的基因的PCR验证第30-31页
     ·切胶回收第31页
     ·克隆转化及测序第31-32页
     ·烟草过敏性反应第32页
 2 结果与分析第32-58页
   ·HAB-5具有广谱的抑菌效果第32-33页
   ·HAB-5菌悬液对番茄种子的促生作用及其对C7-2的拮抗效果第33-36页
   ·确定最适培养基及最佳条件第36页
   ·HAB-5主要抑菌活性物质易泌出至培养基第36-38页
   ·HAB-5上清液对番茄种子的促生作用及其对C7-2的拮抗效果第38-41页
   ·HAB-5拮抗活性成分主要是肽类第41-45页
   ·HAB-5乙醇粗提物对番茄种子的促生作用及其对C7-2的拮抗效果第45-48页
   ·HAB-5抑菌粗提物的稳定性第48-49页
   ·HAB-5转化子检测证及其功能的验证第49-58页
     ·突变菌株的筛选第49页
     ·PCR检测后连接、转化以及测序第49-50页
     ·突变体的菌落形态第50页
     ·突变体的拮抗作用第50页
     ·突变体过敏性反应的检测第50-53页
     ·突变体对番茄种子的促生作用及其对C7-2的拮抗效果第53-58页
       ·Blxoo对番茄种子的促生作用及其对C7-2的拮抗效果第53-55页
       ·Blxm对番茄种子的促生作用及其对C7-2的拮抗效果第55-58页
 3 讨论第58-61页
结论第61页
创新点第61-62页
参考文献第62-67页
已发表和待发表的论文第67页
课题来源第67-68页
致谢第68页

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