| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-30页 |
| ·苏云金芽胞杆菌 | 第13-20页 |
| ·苏云金芽胞杆菌简介 | 第13-14页 |
| ·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白研究 | 第14-19页 |
| ·杀虫晶体蛋白的结构和功能 | 第14-15页 |
| ·基因的分类定位 | 第15-16页 |
| ·杀虫晶体蛋白的表达与调控 | 第16-19页 |
| ·杀虫机制 | 第19页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的应用 | 第19-20页 |
| ·全局性调控因子CodY | 第20-26页 |
| ·芽胞杆菌中的全局性调控因子 | 第20-21页 |
| ·CcpA | 第20页 |
| ·TnrA | 第20-21页 |
| ·CodY的研究进展 | 第21-26页 |
| ·CodY的结构 | 第21-22页 |
| ·CodY的效应分子 | 第22-23页 |
| ·CodY的结合热点及作用机制 | 第23-24页 |
| ·CodY的功能研究 | 第24-26页 |
| ·转录调控因子寻找靶基因的研究方法 | 第26-28页 |
| ·转录调控因子靶基因的研究 | 第26-27页 |
| ·转录调控因子靶基因的验证 | 第27-28页 |
| ·DnaseI足迹 | 第27页 |
| ·EMSA | 第27页 |
| ·SPR | 第27-28页 |
| ·酵母单杂交 | 第28页 |
| ·细菌单杂交 | 第28页 |
| ·本研究背景及研究目的 | 第28-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-43页 |
| ·实验材料 | 第30-32页 |
| ·菌株、质粒及引物 | 第30-32页 |
| ·培养基的配制方法及成分 | 第32页 |
| ·抗生素及其使用浓度 | 第32页 |
| ·常用试剂和仪器 | 第32-35页 |
| ·常用试剂 | 第32-33页 |
| ·常用缓冲液和溶液 | 第33-35页 |
| ·质粒总DNA抽提及感受态制备所需试剂 | 第33页 |
| ·蛋白表达纯化及蛋白含量的测定相关试剂 | 第33-34页 |
| ·SDS-PAGE所需试剂 | 第34页 |
| ·细菌单杂交筛选培养基所需试剂 | 第34-35页 |
| ·常用仪器 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-43页 |
| ·核酸的抽提 | 第35-37页 |
| ·大肠杆菌质粒的抽提 | 第35-36页 |
| ·苏云金芽胞杆菌总DNA的抽提 | 第36-37页 |
| ·苏云金芽胞杆菌总RNA的抽提 | 第37页 |
| ·体外分子克隆实验操作 | 第37-39页 |
| ·PCR扩增 | 第37-38页 |
| ·连接体系 | 第38页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第38-39页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第39-40页 |
| ·RNA样品中DNA的消化 | 第39页 |
| ·RNA反转录 | 第39页 |
| ·Real Time PCR反应 | 第39-40页 |
| ·蛋白表达纯化及浓度测定 | 第40-41页 |
| ·蛋白表达纯化 | 第40页 |
| ·SDS-PAGE | 第40页 |
| ·蛋白透析 | 第40页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第40-41页 |
| ·PHB含量的测定 | 第41-42页 |
| ·EMSA实验 | 第42-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-69页 |
| ·比较蛋白质组学研究CodY的结果分析 | 第43-63页 |
| ·codY突变株表型分析 | 第43-46页 |
| ·BMB171cry1Ac和BMB171codY-cry1Ac的生长表型差异 | 第43-45页 |
| ·BMB171cry1Ac和BMB171codY-cry1Ac的SDS-PAGE分析 | 第45页 |
| ·BMB171cry1Ac和BMB171codY-cry1Ac的PHB含量分析 | 第45-46页 |
| ·MALDI-TOF-MS/MS结果分析及验证 | 第46-50页 |
| ·MALDI-TOF-MS/MS鉴定结果分类及差异表达分析 | 第46-48页 |
| ·部分基因转录水平的荧光定量PCR的验证 | 第48-50页 |
| ·CodY直接调控基因的分析验证及差异蛋白基因功能分析 | 第50-63页 |
| ·CodY直接调控基因的分析验证 | 第50-58页 |
| ·差异蛋白的功能分析 | 第58-63页 |
| ·小结 | 第63页 |
| ·CodY体外靶基因的筛选结果分析 | 第63-69页 |
| ·CodY靶基因共同序列保守性分析 | 第64页 |
| ·靶基因的功能分析 | 第64-68页 |
| ·寡肽转运蛋白OppA | 第65-66页 |
| ·双组份信号转导LytSR和VanSR | 第66-67页 |
| ·重组酶RecA | 第67页 |
| ·其他功能蛋白分析 | 第67-68页 |
| ·小结 | 第68-69页 |
| 4. 总结与展望 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
