| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 1 前言 | 第8-21页 |
| ·抗菌肽的概述 | 第8-15页 |
| ·抗菌肽的分类 | 第8-11页 |
| ·抗菌肽的作用机制 | 第11-14页 |
| ·抗菌肽的主要生物活性 | 第14-15页 |
| ·家蝇抗菌肽的研究现状 | 第15-16页 |
| ·家蝇抗菌肽的天然纯化和活性检验 | 第15-16页 |
| ·家蝇抗菌肽分子生物学研究发展 | 第16页 |
| ·抗菌肽的表达和纯化技术的发展 | 第16-18页 |
| ·大肠杆菌表达体系 | 第16-17页 |
| ·酵母菌表达体系 | 第17-18页 |
| ·动植物表达系统 | 第18页 |
| ·抗菌肽的应用前景 | 第18-19页 |
| ·抗菌肽在植物领域的研究与应用 | 第18页 |
| ·抗菌肽在食品工业中的研究与应用 | 第18页 |
| ·抗菌肽在药用领域的研究与应用 | 第18页 |
| ·抗菌肽在水产养殖领域的研究与应用 | 第18-19页 |
| ·抗菌肽在畜牧业领域的研究与应用 | 第19页 |
| ·抗菌肽在动植物转基因工程中的应用 | 第19页 |
| ·本论文研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| ·论文研究的主要内容 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-35页 |
| ·材料 | 第21-24页 |
| ·蝇种及菌株 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·仪器及设备 | 第22-23页 |
| ·主要溶液及培养基 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-35页 |
| ·家蝇的饲养及蛹的获得 | 第25页 |
| ·Trizol法提取家蝇蛹的总RNA | 第25-26页 |
| ·RT-PCR扩增目的基因 | 第26-27页 |
| ·Md-Cec基因克隆及序列分析 | 第27-30页 |
| ·Md-Cec基因表达 | 第30-32页 |
| ·pMAL-Cec重组蛋白的表达纯化 | 第32-33页 |
| ·考马斯亮蓝法测定蛋白含量 | 第33页 |
| ·重组蛋白pMAL-cec抗菌活性测定 | 第33-35页 |
| 3 结果与讨论 | 第35-52页 |
| ·Md-Cec基因的克隆、重组、表达 | 第35-44页 |
| ·家蝇中总mRNA的提取 | 第35页 |
| ·pMAL-c2x质粒的提取 | 第35-37页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第37-39页 |
| ·PCR纯化产物与质粒pMAL-c2x的双酶切 | 第39页 |
| ·连接产物转化至大肠杆菌E.coli DH5α | 第39-40页 |
| ·重组质粒pMAL-Cec的鉴定 | 第40-41页 |
| ·测序结果及序列 | 第41-43页 |
| ·Md-Cec蛋白特性及结构分析 | 第43-44页 |
| ·重组菌的表达与纯化 | 第44-48页 |
| ·pMAL-Cec重组质粒在DH5α中的尝试性表达 | 第44-45页 |
| ·表达菌株的筛选 | 第45-46页 |
| ·表达蛋白的分离纯化 | 第46-48页 |
| ·马斯亮蓝法测定蛋白浓度 | 第48页 |
| ·纯化产物的生物学活性的测定 | 第48-52页 |
| ·菌内抑菌生长曲线测定 | 第48-49页 |
| ·体外抑菌实验 | 第49-52页 |
| 4 结论 | 第52-53页 |
| 5 展望 | 第53-54页 |
| 6 参考文献 | 第54-60页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第60-61页 |
| 8 致谢 | 第61页 |