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水稻泛素连接酶OsPUB57介导的抗病机制研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 绪论第10-17页
 1 植物免疫系统第10页
 2 泛素-蛋白酶体系统第10-11页
   ·植物泛素激活酶(E1)的防御功能第10-11页
   ·植物泛素结合酶(E2)的防御功能第11页
   ·植物泛素连接酶(E3)概述第11页
 3 水稻泛素连接酶功能研究第11-15页
   ·参与激素信号传导第11-12页
   ·调控生长发育第12-14页
   ·参与生物胁迫调控第14页
   ·参与非生物胁迫调控第14-15页
 4 水稻抗稻瘟病分子研究进展第15-16页
 5 水稻抗白叶枯病分子研究进展第16页
 6 研究目的意义第16-17页
第二章 OsPUB57转基因株系的基因型和表型鉴定以及酵母双杂交筛选第17-34页
 1 试验材料和方法第17-25页
   ·试验材料第17-20页
     ·水稻转基因株系的种子消毒与育苗第17页
     ·燕麦培养基配制及稻瘟病菌培养第17页
     ·白叶枯病菌培养第17-18页
     ·制备大肠杆菌的感受态细胞第18页
     ·酵母菌株第18页
     ·质粒转化第18-19页
     ·质粒提取第19-20页
     ·PCR引物第20页
   ·试验方法第20-25页
     ·水稻DNA的提取第20-21页
     ·水稻RNA的提取第21-22页
     ·转基因水稻植株的检测第22-23页
       ·OsPUB57的转基因载体构建及转基因植株获得第22页
       ·PCR法检测转基因植株第22-23页
     ·酵母双杂交体系第23-25页
       ·pDBleu-OsPUB57载体构建第23-24页
       ·酵母双杂交第24-25页
     ·稻瘟病的调查标准第25页
 2 结果分析第25-33页
   ·OsPUB57基因表达及其蛋白结构分析第25-26页
   ·OsPUB57转基因植株的基因型鉴定第26-28页
   ·OsPUB57转基因植株的抗稻瘟病鉴定第28-29页
   ·OsPUB57转基因植株的抗白叶枯病鉴定第29-30页
   ·OsPUB57泛素连接酶互作蛋白的筛选与分析第30-33页
 3 讨论第33-34页
第三章 OsPUB57互作蛋白基因的载体构建与功能分析第34-50页
 1 试验材料和方法第34-38页
   ·试验材料第34-35页
     ·菌株、载体质粒与基因模板第34页
     ·主要试剂第34页
     ·常用试验仪器第34-35页
     ·培养基配方第35页
   ·方法第35-38页
     ·引物设计第35页
     ·目的基因的扩增第35-36页
     ·PCR产物的胶回收第36页
     ·大肠杆菌载体质粒pCX-DG、pCX-DR、pCXUN-Myc的提取第36-37页
     ·载体的酶切第37页
     ·酶切后载体的胶回收第37页
     ·连接反应第37页
     ·大肠杆菌的热击转化第37页
     ·转化子的菌落PCR初步鉴定第37-38页
     ·正向表达载体的筛选及测序鉴定第38页
 2 结果第38-48页
   ·目的基因扩增预试验第38-39页
   ·目的基因获取第39-40页
   ·表达载体的构建策略第40-41页
   ·重组克隆的筛选和鉴定第41-46页
   ·重组表达克隆的序列分析第46-47页
   ·重组表达克隆转化水稻日本晴第47-48页
 3 讨论第48-50页
第四章 结论、创新性与下一阶段工作第50-51页
 1 结论第50页
 2 创新性第50页
 3 下一阶段工作第50-51页
参考文献第51-59页
致谢第59-61页
作者简历第61页

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