| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩写词(Abbreviation) | 第8-10页 |
| 目录 | 第10-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-20页 |
| 1 生物与非生物胁迫对植物的损伤 | 第15页 |
| 2 转录因子研究进展 | 第15-18页 |
| ·bZIP转录因子 | 第16页 |
| ·bZIP类转录因子的结构 | 第16页 |
| ·植物bZIP转录因子调控机制 | 第16-17页 |
| ·bZIP转录因子在抗逆调控方面的功能 | 第17-18页 |
| 3 本研究目的和意义 | 第18-20页 |
| 第二章 苎麻BZIP转录因子家族部分基因的克隆和序列分析 | 第20-37页 |
| 1 材料与试剂 | 第20页 |
| 2 方法 | 第20-26页 |
| ·苎麻各组织Total RNA的提取及第一链cDNA的合成 | 第20-23页 |
| ·苎麻组织总RNA的提取 | 第20-21页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第21-23页 |
| ·RACE引物设计 | 第23-24页 |
| ·PCR扩增及目的片段回收 | 第24-25页 |
| ·Unigene480473’RACE PCR扩增 | 第24页 |
| ·Unigene65825’RACE PCR扩增 | 第24页 |
| ·Unigene21903全长ORF的PCR扩增 | 第24页 |
| ·目的片段回收 | 第24-25页 |
| ·PCR产物的TA克隆 | 第25页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌Trans1-T1和PCR筛选阳性克隆 | 第25页 |
| ·生物信息学分析 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-35页 |
| ·苎麻总RNA的提取结果 | 第26页 |
| ·BnbZIP1基因3’端和BnbZIP3基因5’端的克隆 | 第26-27页 |
| ·BnbZIP1基因3’端的PCR扩增 | 第26-27页 |
| ·BnbZIP3基因的5’端的PCR扩增 | 第27页 |
| ·BnbZIP2基因全长ORF的PCR扩增 | 第27-28页 |
| ·BnbZIP1、BnbZIP2和BnbZIP3基因的生物信息学分析 | 第28-35页 |
| ·BnbZIP1基因的生物信息学分析 | 第28-30页 |
| ·BnbZIP2基因的生物信息学分析 | 第30-32页 |
| ·BnbZIP3基因的生物信息学分析 | 第32-34页 |
| ·3 个bZIP转录因子基因进化关系分析 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 芒麻bZIP转录因子基因表达特征和亚细胞定位分析 | 第37-48页 |
| 1 材料与试剂 | 第37页 |
| 2 方法 | 第37-41页 |
| ·苎麻各组织总RNA的提取及第一链cDNA的合成 | 第37页 |
| ·实时荧光定量PCR引物设计 | 第37-38页 |
| ·实时荧光定量PCR和数据分析 | 第38页 |
| ·亚细胞定位载体的构建 | 第38-39页 |
| ·亚细胞定位载体构建引物设计 | 第38-39页 |
| ·瞬时转化洋葱表皮细胞和亚细胞定位分析 | 第39-41页 |
| ·目的片段的PCR扩增及回收纯化 | 第39页 |
| ·目的片段和载体的双酶切、连接和转化 | 第39页 |
| ·菌落PCR筛选阳性重组子 | 第39-40页 |
| ·双酶切鉴定重组子与测序 | 第40页 |
| ·重组质粒转化农杆菌和瞬时转化洋葱表皮细胞 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-46页 |
| ·苎麻3个bZIP基因组织表达特异性分析 | 第41页 |
| ·苎麻3个bZIP基因胁迫诱导表达分析 | 第41-44页 |
| ·BnbZIP1胁迫诱导表达分析 | 第41-42页 |
| ·BnbZIP2胁迫诱导表达分析 | 第42-43页 |
| ·BnbZIP3胁迫诱导表达分析 | 第43-44页 |
| ·苎麻3个bZIP基因亚细胞定位分析 | 第44-46页 |
| ·亚细胞定位表达载体的构建 | 第44-45页 |
| ·瞬时转化洋葱表皮细胞亚细胞定位观察 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 第四章 苎麻BZIP基因启动子克隆和序列分析 | 第48-54页 |
| 1 材料与试剂 | 第48页 |
| 2 方法 | 第48-50页 |
| ·苎麻基因组DNA的提取 | 第48页 |
| ·Tail-PCR槽式引物设计 | 第48-49页 |
| ·苎麻bZIP基因启动子片段的克隆 | 第49-50页 |
| ·Tail-PCR扩增 | 第49-50页 |
| ·目的片段回收 | 第50页 |
| ·PCR产物的TA克隆 | 第50页 |
| ·转化大肠杆菌和PCR筛选阳性单克隆 | 第50页 |
| ·苎麻bZIP基因启动子片段生物信息学分析 | 第50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-53页 |
| ·苎麻bZIP基因启动子片段的克隆 | 第50-51页 |
| ·苎麻bZIP基因启动子片段的序列分析 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-54页 |
| 第五章 苎麻BZIP基因过表达载体构建和转化拟南芥 | 第54-62页 |
| 1 材料与试剂 | 第54页 |
| 2 方法 | 第54-58页 |
| ·植物转基因过表达载体的构建 | 第54-56页 |
| ·过表达载体构建引物设计 | 第54-55页 |
| ·目的片段的PCR扩增及回收纯化 | 第55页 |
| ·目的片段和载体的双酶切、连接和转化 | 第55-56页 |
| ·菌落PCR筛选阳性重组子 | 第56页 |
| ·双酶切鉴定重组子与测序 | 第56页 |
| ·重组质粒转化农杆菌 | 第56页 |
| ·转化拟南芥 | 第56-57页 |
| ·转基因拟南芥的筛选和PCR鉴定 | 第57-58页 |
| ·卡那霉素抗性筛选 | 第57页 |
| ·转基因植株PCR鉴定 | 第57-58页 |
| 3 结果与分析 | 第58-60页 |
| ·过表达载体的构建 | 第58-59页 |
| ·转基因植株的筛选和鉴定 | 第59-60页 |
| ·转化子的卡那霉素筛选 | 第59页 |
| ·抗性苗的PCR检测 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 第六章 苎麻BNBZIP3基因功能的初步分析 | 第62-65页 |
| 1 材料与试剂 | 第62页 |
| 2 方法 | 第62页 |
| ·材料处理与种植 | 第62页 |
| ·转基因种子的消毒 | 第62页 |
| ·逆境胁迫处理 | 第62页 |
| 3 结果与分析 | 第62-64页 |
| ·转基因拟南芥在逆境条件下种子的萌发情况 | 第62-64页 |
| 4 讨论 | 第64-65页 |
| 第七章 结论与展望 | 第65-66页 |
| 1 论文结论 | 第65页 |
| 2 后续的设想 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简历 | 第73页 |
