摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
1 前言 | 第11-22页 |
·启动子的概念及分类 | 第11-13页 |
·启动子顺式作用元件的研究方法 | 第13-14页 |
·与非生物胁迫相关的重要植物激素SA、ET | 第14-17页 |
·水杨酸是植物体内具有重要调节作用的内源激素之一 | 第14-16页 |
·ET的生理功能与生物学功能 | 第16页 |
·烯在水稻中的生理效应与信号传导途径 | 第16-17页 |
·农杆菌瞬时表达技术及GUS基因的应用 | 第17-19页 |
·水稻NPR1研究情况 | 第19-20页 |
·研究目标与主要研究内容 | 第20-22页 |
·研究目的与意义 | 第20-21页 |
·技术路线 | 第21-22页 |
2 材料和方法 | 第22-35页 |
·实验材料 | 第22-26页 |
·植物材料 | 第22页 |
·供试菌株及供试质粒 | 第22页 |
·主要试剂 | 第22页 |
·试剂配制 | 第22-26页 |
·基本实验方法 | 第26-31页 |
·水稻基因组DNA提取 | 第26页 |
·质粒DNA的提取 | 第26-27页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
·大肠杆菌热激转化 | 第28页 |
·PCR扩增OsNPR1启动子 | 第28-29页 |
·OsNPR1与pMD18-T载体的连接 | 第29页 |
·大肠杆菌DH5a感受态细胞转化及转化子的筛选与鉴定 | 第29-30页 |
·构建载体 | 第30-31页 |
·农杆菌EHA105介导的烟草瞬时表达 | 第31页 |
·烟草NC89的培养 | 第31-32页 |
·农杆菌感受态细胞制备 | 第32页 |
·农杆菌的冻融法转化、检测、菌种保存 | 第32-33页 |
·农杆菌悬浮菌液的制备 | 第33页 |
·接种及激素处理 | 第33-34页 |
·GUS定性组织分析 | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-48页 |
·日本晴水稻总DNA的提取 | 第35页 |
·OsNPR1启动子的扩增与鉴定 | 第35-37页 |
·OsNPR1启动子的PCR扩增 | 第35-36页 |
·PCR产物的克隆 | 第36-37页 |
·OsNPR1启动子片段测序比对结果 | 第37页 |
·表达载体构建以及鉴定 | 第37-40页 |
·设计带酶切位点的引物 | 第37页 |
·PCR扩增OsNPR1带酶切位点的全长启动子 | 第37-38页 |
·PCR产物的克隆 | 第38-39页 |
·全长启动子表达载体的构建 | 第39-40页 |
·烟草中瞬时表达实验 | 第40-42页 |
·OsNPR1启动子应答SA、ET诱导的必需区域的鉴定 | 第42-48页 |
·OsNPR1启动子的缺失突变分析 | 第42-43页 |
·构建序列删除载体 | 第43-45页 |
·不同的表达载体在烟草中GUS报告基因的瞬时表达分析 | 第45-48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
5 结论、创新点及下一步工作计划 | 第50-52页 |
·结论 | 第50页 |
·创新点 | 第50页 |
·下一步工作计划 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
附录1:Marker条带图谱 | 第57-58页 |
附录2:引物序列 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60页 |