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水稻OsNPR1启动子中响应SA、ET的关键DNA区域分析

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
1 前言第11-22页
   ·启动子的概念及分类第11-13页
   ·启动子顺式作用元件的研究方法第13-14页
   ·与非生物胁迫相关的重要植物激素SA、ET第14-17页
     ·水杨酸是植物体内具有重要调节作用的内源激素之一第14-16页
     ·ET的生理功能与生物学功能第16页
     ·烯在水稻中的生理效应与信号传导途径第16-17页
   ·农杆菌瞬时表达技术及GUS基因的应用第17-19页
   ·水稻NPR1研究情况第19-20页
   ·研究目标与主要研究内容第20-22页
     ·研究目的与意义第20-21页
     ·技术路线第21-22页
2 材料和方法第22-35页
   ·实验材料第22-26页
     ·植物材料第22页
     ·供试菌株及供试质粒第22页
     ·主要试剂第22页
     ·试剂配制第22-26页
   ·基本实验方法第26-31页
     ·水稻基因组DNA提取第26页
     ·质粒DNA的提取第26-27页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第27-28页
     ·大肠杆菌热激转化第28页
     ·PCR扩增OsNPR1启动子第28-29页
     ·OsNPR1与pMD18-T载体的连接第29页
     ·大肠杆菌DH5a感受态细胞转化及转化子的筛选与鉴定第29-30页
     ·构建载体第30-31页
   ·农杆菌EHA105介导的烟草瞬时表达第31页
   ·烟草NC89的培养第31-32页
   ·农杆菌感受态细胞制备第32页
   ·农杆菌的冻融法转化、检测、菌种保存第32-33页
   ·农杆菌悬浮菌液的制备第33页
   ·接种及激素处理第33-34页
   ·GUS定性组织分析第34-35页
3 结果与分析第35-48页
   ·日本晴水稻总DNA的提取第35页
   ·OsNPR1启动子的扩增与鉴定第35-37页
     ·OsNPR1启动子的PCR扩增第35-36页
     ·PCR产物的克隆第36-37页
     ·OsNPR1启动子片段测序比对结果第37页
   ·表达载体构建以及鉴定第37-40页
     ·设计带酶切位点的引物第37页
     ·PCR扩增OsNPR1带酶切位点的全长启动子第37-38页
     ·PCR产物的克隆第38-39页
     ·全长启动子表达载体的构建第39-40页
   ·烟草中瞬时表达实验第40-42页
   ·OsNPR1启动子应答SA、ET诱导的必需区域的鉴定第42-48页
     ·OsNPR1启动子的缺失突变分析第42-43页
     ·构建序列删除载体第43-45页
     ·不同的表达载体在烟草中GUS报告基因的瞬时表达分析第45-48页
4 讨论第48-50页
5 结论、创新点及下一步工作计划第50-52页
   ·结论第50页
   ·创新点第50页
   ·下一步工作计划第50-52页
参考文献第52-57页
附录1:Marker条带图谱第57-58页
附录2:引物序列第58-59页
致谢第59-60页
作者简介第60页

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