| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-19页 |
| ·聚羟基脂肪酸酯简介 | 第10-15页 |
| ·PHA 的生物合成途径 | 第11-12页 |
| ·PHA 合成酶的分类 | 第12-13页 |
| ·PHA 的检测方法 | 第13-14页 |
| ·PHA 的应用 | 第14-15页 |
| ·2P24 的简介及其调控因子的介绍 | 第15-18页 |
| ·2P24 的简介 | 第15页 |
| ·群体感应调控系统 | 第15-17页 |
| ·GacA/GacS 双因子调控系统 | 第17页 |
| ·RpoS 转录调节因子 | 第17-18页 |
| ·课题的研究意义 | 第18-19页 |
| 第二章 利用荧光假单胞菌 2P24 合成 PHA 及种类的鉴定 | 第19-27页 |
| ·材料 | 第19-21页 |
| ·供试菌株及载体 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-23页 |
| ·培养方法 | 第21-22页 |
| ·PHA 标准曲线的绘制 | 第22页 |
| ·气相色谱(GC)对 PHA 的定量分析 | 第22页 |
| ·检测 2P24 的生长曲线及 PHA 的积累曲线 | 第22-23页 |
| ·结果 | 第23-25页 |
| ·PHA 的标准曲线 | 第23页 |
| ·2P24 在两种碳源下积累的 PHA | 第23-25页 |
| ·2P24 的生长曲线及 PHA 的积累情况 | 第25页 |
| ·讨论 | 第25-26页 |
| ·小结 | 第26-27页 |
| 第三章 构建 2P24 中各调控基因的突变恢复、过表达和双突变菌株 | 第27-37页 |
| ·材料 | 第27-29页 |
| ·供试菌株和载体 | 第27页 |
| ·试剂 | 第27-28页 |
| ·仪器设备 | 第28-29页 |
| ·培养基 | 第29页 |
| ·引物 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-32页 |
| ·大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌 DH5α的热激转化 | 第30页 |
| ·菌液中质粒 DNA 的提取 | 第30页 |
| ·荧光假单胞菌的电击转化 | 第30-31页 |
| ·三亲杂交构建双突变体 | 第31页 |
| ·PCR 体系及程序 | 第31-32页 |
| ·结果 | 第32-36页 |
| ·pcoI、gacA、gacS、rpoS 基因恢复补偿菌株的构建 | 第32-34页 |
| ·pcoI、gacA、gacS、rpoS 基因过表达菌株的构建 | 第34-35页 |
| ·ΔpcoIΔrpoS、ΔgacAΔrpoS、ΔgacSΔrpoS 双突变体的构建 | 第35-36页 |
| ·小结 | 第36-37页 |
| 第四章 在 2P24 中各调控基因对 PHA 积累的影响 | 第37-44页 |
| ·材料 | 第37-39页 |
| ·供试菌株 | 第37-38页 |
| ·试剂 | 第38页 |
| ·主要仪器 | 第38-39页 |
| ·培养基 | 第39页 |
| ·方法 | 第39页 |
| ·培养方法 | 第39页 |
| ·应用气相色谱(GC)对 PHA 的定量分析 | 第39页 |
| ·结果 | 第39-42页 |
| ·荧光假单胞菌 2P24 中各调控基因缺失对 PHA 积累情况的影响 | 第39-40页 |
| ·调控基因 gacA 对 PHA 积累的影响 | 第40-41页 |
| ·调控基因 gacS 对 PHA 积累的影响 | 第41-42页 |
| ·调控基因 rpoS 对 PHA 积累的影响 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第五章 PHA 合成酶基因转录报告载体的构建 | 第44-51页 |
| ·材料 | 第44-46页 |
| ·供试菌株和载体 | 第44页 |
| ·引物 | 第44-45页 |
| ·培养基 | 第45页 |
| ·试剂 | 第45页 |
| ·仪器 | 第45-46页 |
| ·方法 | 第46-47页 |
| ·大肠杆菌 DH5α感受态细胞制备 | 第46页 |
| ·大肠杆菌的热激转化 | 第46页 |
| ·菌液中质粒 DNA 的提取 | 第46页 |
| ·荧光假单胞菌的电击转化 | 第46-47页 |
| ·从琼脂糖凝胶中回收 DNA 片段 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-50页 |
| ·PHA 合成酶基因 phaC1 启动子的克隆 | 第47页 |
| ·phaC1 基因转录报告载体的构建 | 第47-49页 |
| ·报告载体 p970Km-pphaC1 的电击转化 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 第六章 结论 | 第51-52页 |
| 第七章 展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58-60页 |
| 攻读学位期间所取得的相关科研成果 | 第60页 |
