| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-23页 |
| ·荔枝及荔枝产业概况 | 第12页 |
| ·荔枝采后生物学研究进展 | 第12-15页 |
| ·荔枝结构特性 | 第12-13页 |
| ·荔枝采后果皮褐变的可能机理 | 第13-14页 |
| ·失水对荔枝果皮褐变的影响 | 第13页 |
| ·酶对果皮褐变的影响 | 第13页 |
| ·花色素苷对果皮褐变的影响 | 第13-14页 |
| ·病菌侵染对果皮褐变的影响 | 第14页 |
| ·荔枝采后保鲜技术 | 第14-15页 |
| ·植物体内吸收与散失水分的主要途径 | 第15页 |
| ·植物水孔蛋白的研究进展 | 第15-22页 |
| ·植物水孔蛋白的分类 | 第16页 |
| ·植物水孔蛋白的结构 | 第16页 |
| ·植物水孔蛋白的运输途径及转运机制 | 第16-18页 |
| ·植物水孔蛋白的生理学功能 | 第18-19页 |
| ·参与植物体内的水分吸收和运输 | 第18页 |
| ·参与植物果实发育、种子萌发及开花生理等功能 | 第18-19页 |
| ·参与气孔的运动 | 第19页 |
| ·植物水孔蛋白的表达调控 | 第19-20页 |
| ·组织特异性表达及发育阶段调控 | 第19页 |
| ·环境因子诱导的表达调控 | 第19-20页 |
| ·激素诱导的表达调控 | 第20页 |
| ·植物水孔蛋白的活性调控 | 第20-22页 |
| ·磷酸化调控 | 第20-21页 |
| ·异聚化调控 | 第21页 |
| ·重金属 | 第21页 |
| ·质子化 | 第21-22页 |
| ·糖基化和甲基化 | 第22页 |
| ·渗透压 | 第22页 |
| ·本研究的目的意义 | 第22页 |
| ·本研究的技术路线 | 第22-23页 |
| 2 采后荔枝果皮水分变化与褐变关系的生理学研究 | 第23-32页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·方法和处理 | 第23-25页 |
| ·HgCl_2处理浓度的确定 | 第23-24页 |
| ·HgCl_2处理时间的确定 | 第24页 |
| ·不同处理对果皮圆片失水的影响 | 第24页 |
| ·不同荔枝品种在不同温度贮藏下对果皮失水的影响 | 第24-25页 |
| ·测定指标与方法 | 第25页 |
| ·果皮褐变指数的测定 | 第25页 |
| ·果实失水率的测定 | 第25页 |
| ·果皮含水量的测定 | 第25页 |
| ·结果与分析 | 第25-31页 |
| ·妃子笑果皮圆片在不同处理下的水分变化 | 第25-27页 |
| ·不同浓度HgCl_2对荔枝果皮的水分变化的影响 | 第25-26页 |
| ·不同的HgCl_2处理时间对荔枝果皮水分变化的影响 | 第26页 |
| ·五种处理对荔枝果皮水分变化的影响 | 第26-27页 |
| ·妃子笑果实在不同处理贮藏下的生理变化 | 第27-28页 |
| ·不同处理贮藏下的妃子笑果皮褐变指数的比较 | 第27页 |
| ·不同处理贮藏下的妃子笑果实失水率的比较 | 第27-28页 |
| ·不同处理贮藏下的妃子笑果皮含水量的比较 | 第28页 |
| ·不同温度贮藏下的耐贮性差异品种生理变化 | 第28-31页 |
| ·果皮褐变指数的变化 | 第28-29页 |
| ·果实失水率的变化 | 第29-30页 |
| ·果皮含水量的变化 | 第30-31页 |
| ·结论与讨论 | 第31-32页 |
| 3 荔枝水孔蛋白基因的克隆序列特征 | 第32-51页 |
| ·实验材料、试剂和仪器 | 第32-33页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·实验试剂 | 第32页 |
| ·实验仪器 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-44页 |
| ·荔枝基因组DNA提取 | 第33-34页 |
| ·荔枝总RNA的提取 | 第34页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第34-35页 |
| ·对合成的cDNA第一条链进行PCR检测 | 第35页 |
| ·荔枝PIPs类水孔蛋白基因cDNA片段的克隆 | 第35-38页 |
| ·引物设计 | 第35-36页 |
| ·目的片段的琼脂糖凝胶纯化 | 第36-37页 |
| ·将目的片段与pMD18-Tvector连接 | 第37页 |
| ·E.coli DH5α感受态细胞的制备 | 第37页 |
| ·转化 | 第37页 |
| ·阳性克隆的筛选鉴定 | 第37-38页 |
| ·菌液保存及cDNA片段测序 | 第38页 |
| ·用RACE技术扩增LcPIP基因cDNA 5’端和3’端 | 第38-43页 |
| ·5’race和3’race引物设计 | 第38-39页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第39-42页 |
| ·反应体系 | 第42-43页 |
| ·目的片段的回收、连接、转化、质粒提取、鉴定 | 第43页 |
| ·序列拼接及生物信息学分析 | 第43页 |
| ·荔枝PIPs类水孔蛋白基因组DNA全长的克隆 | 第43-44页 |
| ·全长引物设计 | 第43-44页 |
| ·PCR扩增目的基因全长的反应体系 | 第44页 |
| ·目的片段回收、载体连接、转化、质粒提取及鉴定 | 第44页 |
| ·实验结果与分析 | 第44-49页 |
| ·荔枝总RNA的提取 | 第44-45页 |
| ·荔枝基因组DNA的提取 | 第45页 |
| ·LcPIP基因cDNA全长序列克隆 | 第45-46页 |
| ·LcPIP基因组DNA全长序列克隆 | 第46页 |
| ·LcPIP基因序列生物信息学分析 | 第46-47页 |
| ·LcPIP蛋白进化分析 | 第47-48页 |
| ·LcPIP蛋白序列比对以及结构分析 | 第48-49页 |
| ·结论与讨论 | 第49-51页 |
| 4 LcPIP基因在荔枝组织中的表达分析 | 第51-67页 |
| ·实验材料 | 第51页 |
| ·实验仪器和试剂 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-53页 |
| ·RT-PCR引物设计 | 第51-52页 |
| ·反转录反应 | 第52页 |
| ·反转录PCR检测反应 | 第52-53页 |
| ·标准质粒的构建方法 | 第53页 |
| ·拷贝数计算 | 第53页 |
| ·标准品与待测样品的准备 | 第53页 |
| ·实时突光定量RT-PCR反应体系 | 第53页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-64页 |
| ·荧光定量引物的溶解曲线分析 | 第53-54页 |
| ·标准曲线绘制 | 第54-55页 |
| ·LcPIP基因在荔枝不同组织中的表达 | 第55-56页 |
| ·LcPIP基因在荔枝采后衰老过程中的表达 | 第56-64页 |
| ·LcPIP基因在不同荔枝品种采后果皮中表达 | 第56-57页 |
| ·温度对LcPIP基因的表达量影响 | 第57-60页 |
| ·HgCl_2处理对LcPIP基因的表达量影响 | 第60-62页 |
| ·套袋处理对LcPIP基因的表达量影响 | 第62-64页 |
| ·结论与讨论 | 第64-67页 |
| 5 荔枝水孔蛋白的蛋白表达分析 | 第67-72页 |
| ·实验材料 | 第67页 |
| ·实验仪器与试剂 | 第67页 |
| ·蛋白质提取实验方法 | 第67页 |
| ·SDS-PAGE蛋白垂直电泳 | 第67-68页 |
| ·考马斯亮蓝法测定蛋白浓度 | 第68-69页 |
| ·蛋白标准曲线绘制 | 第68页 |
| ·蛋白样品的测定 | 第68-69页 |
| ·western印迹方法 | 第69页 |
| ·结果与分析 | 第69-71页 |
| ·荔枝果皮总蛋白提取 | 第69-70页 |
| ·荔枝果皮总蛋白浓度测定 | 第70页 |
| ·三个品种室温贮藏下LcPIP2蛋白含量变化 | 第70页 |
| ·套袋与低温处理下LcPIP1和LcPIP2的蛋白含量变化 | 第70-71页 |
| ·HgCl_2处理后LcPIP1的蛋白含量变化 | 第71页 |
| ·结论与讨论 | 第71-72页 |
| 6 总的结论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-82页 |
| 缩略词 | 第82-83页 |
| 附录 | 第83-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
