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日本血吸虫精氨酸酶克隆表达及功能分析

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 文献综述第13-20页
   ·引言第13-14页
   ·血吸虫疫苗第14-17页
     ·血吸虫疫苗研究进展第14-15页
     ·虫源性疫苗第15页
     ·核酸疫苗第15-16页
     ·重组抗原疫苗第16页
     ·表位疫苗第16页
     ·血吸虫病疫苗研究展望第16-17页
   ·精氨酸酶的研究背景第17-20页
第二章 日本血吸虫精氨酸酶的克隆表达及免疫评估第20-47页
   ·引言第20页
   ·实验材料第20-21页
     ·实验动物和虫体第20-21页
     ·主要酶和试剂第21页
     ·菌种、质粒和模板第21页
     ·主要实验仪器第21页
   ·实验方法第21-30页
     ·SjARG 基因的克隆及生物信息学分析第21-22页
     ·重组质粒 pET28a(+)-SjARG 的构建及鉴定第22-24页
     ·重组质粒 pET-28a(+)-SjARG 的表达与纯化第24-25页
     ·Western Blotting 分析第25页
     ·实时定量 PCR 分析 SjARG 在不同时期虫体内和性别差异表达分析第25-27页
     ·SjARG 在虫体中的组织定位分析第27-28页
     ·重组蛋白 rSjARG 动物免疫保护效果评估第28-30页
   ·实验结果第30-45页
     ·SjARG 基因克隆及生物信息学分析第30-35页
     ·重组质粒 pET-28a(+)-SjARG 的构建及鉴定第35页
     ·pET-28a(+)-SjARG 在大肠杆菌中的表达与其重组蛋白的纯化第35-36页
     ·Western blotting 分析第36-38页
     ·Real-time PCR 分析 SjARG 在不同时期的表达状况第38页
     ·日本血吸虫精氨酸酶蛋白的表达分布第38-42页
     ·重组蛋白 SjARG 诱导的免疫保护效果及评估第42-45页
   ·讨论第45-47页
第三章 日本血吸虫精氨酸酶的酶活性及抑制剂分析第47-61页
   ·引言第47页
   ·生物材料第47页
   ·实验方法第47-51页
     ·精氨酸酶活性反应体系的建立第47-48页
     ·rSjARG 的 Km 值测定第48页
     ·pH、金属离子以及温度、热激对 rSjARG 的影响第48-49页
     ·氨基酸、还原剂以及其他试剂对 rSjARG 酶活性的影响第49页
     ·NOHA 和 nor-NOHA 对 rSjARG 酶活性的影响第49-50页
     ·日本血吸虫虫体蛋白精氨酸酶比活力测定第50页
     ·抑制剂 NOHA 对血吸虫作用的初步研究第50-51页
   ·实验结果第51-59页
     ·日本血吸虫精氨酸酶活性及 Km 值测定第51页
     ·pH、离子、温度及热激对 SjARG 的影响第51-54页
     ·氨基酸、抑制剂对 SjARG 活性的影响第54-57页
     ·日本血吸虫虫体蛋白精氨酸酶比活力测定第57-58页
     ·抑制剂 NOHA 动物实验结果第58-59页
   ·讨论第59-61页
第四章 全文结论第61-62页
参考文献第62-67页
致谢第67-68页
作者简介第68-69页

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