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寄生疫霉菌PnGR1基因功能的初步研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
目录第10-13页
第一章 文献综述第13-26页
   ·卵菌概述第13页
   ·疫霉菌的侵染过程第13-16页
     ·疫霉菌侵染循环第13-14页
     ·接触寄主植物第14页
     ·休止孢的形成与粘附第14-15页
     ·休止孢的萌发与侵染第15页
     ·菌丝的定殖与营养的获取第15-16页
     ·产孢第16页
   ·疫霉菌萌发的休止孢阶段的分子机理研究进展第16-19页
     ·疫霉菌萌发的休止孢阶段的转录组学研究第16-18页
     ·疫霉菌萌发的休止孢阶段的蛋白质组学研究第18页
     ·疫霉菌萌发的休止孢阶段关键基因的功能解析第18-19页
   ·疫霉菌的分子遗传操作第19-22页
     ·疫霉菌的遗传转化第19-21页
     ·疫霉菌的基因沉默第21-22页
   ·生物信息学在基因解析中的应用途径第22-24页
     ·分子进化分析第22-23页
     ·蛋白质结构与功能预测第23-24页
   ·研究目的与意义第24-26页
第二章 寄生疫霉菌 PnGR1 蛋白的序列分析第26-37页
   ·材料与方法第26-27页
     ·生物信息学数据库和软件第26页
     ·方法第26-27页
   ·结果与分析第27-35页
     ·与 PnGR1 序列相似的功能已知蛋白第27页
     ·PnGR1 蛋白二级结构、疏水性、分泌性等特征的分析第27-29页
     ·PnGR1 蛋白中的特征模体序列和特殊位点第29-32页
     ·PnGR1 同源基因的分布第32-35页
   ·讨论第35-37页
第三章 PnGR1-GFP 转化子的制备、筛选和表型分析第37-49页
   ·实验材料第37页
     ·菌株、质粒第37页
     ·植物材料第37页
   ·实验方法第37-40页
     ·寄生疫霉菌的培养和不同发育阶段材料的制备第37-38页
     ·寄生疫霉菌的遗传转化第38页
     ·转化子遗传稳定性的分析第38页
     ·PnGR1-GFP 在转化子中的亚细胞定位第38-39页
     ·休止孢萌发率的测定第39页
     ·粘附性的测定第39页
     ·菌落疏水性的测定第39页
     ·致病性测试第39-40页
   ·结果与分析第40-46页
     ·PnGR1-GFP 转化子的制备及遗传稳定性的分析第40-42页
     ·PnGR1-GFP 的亚细胞定位第42-44页
     ·PnGR1-GFP 转化子休止孢的萌发率测试第44-45页
     ·PnGR1-GFP 转化子萌发的休止孢的粘附性测试第45页
     ·PnGR1-GFP 转化子的菌落疏水性测试第45-46页
     ·PnGR1-GFP 转化子的接菌测试第46页
   ·讨论第46-49页
第四章 PnGR1 基因沉默转化子的制备和筛选第49-55页
   ·实验材料第49页
     ·菌株、质粒第49页
     ·植物材料第49页
   ·实验方法第49-52页
     ·寄生疫霉菌的培养第49页
     ·寄生疫霉菌的转化第49页
     ·Northern blot 检测寄生疫霉菌转化子中 siRNA 的积累第49-51页
     ·休止孢萌发率的测定第51页
     ·粘附性的测定第51-52页
     ·利用致病性筛选沉默转化子第52页
   ·结果与分析第52-54页
     ·Northern blot 检测寄生疫霉菌转化子中 siRNA 的积累第52-53页
     ·利用休止孢的萌发率筛选沉默转化子第53页
     ·利用萌发的休止孢的粘附性筛选沉默转化子第53-54页
     ·利用致病性筛选沉默转化子第54页
   ·讨论第54-55页
第五章 结论第55-56页
   ·结论第55页
   ·创新点第55页
   ·研究展望第55-56页
参考文献第56-59页
致谢第59-60页
作者简介第60页

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