| 英文缩略词表 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-15页 |
| Abstract | 第15-21页 |
| 1 前言 | 第21-22页 |
| 2 实验材料 | 第22-26页 |
| ·细胞株、菌株及质粒 | 第22页 |
| ·抗体 | 第22-23页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第23-24页 |
| ·引物和 siRNA | 第24页 |
| ·主要仪器与设备 | 第24-25页 |
| ·部分试剂溶液的配制 | 第25-26页 |
| 3 试验方法 | 第26-37页 |
| ·重组质粒的构建以及质粒提取 | 第26-31页 |
| ·引物设计与合成 | 第26-27页 |
| ·PCR 扩增目的基因 | 第27页 |
| ·凝胶回收 | 第27-28页 |
| ·酶切 | 第28页 |
| ·连接 | 第28-29页 |
| ·TOP10 感受态细胞的制备及质粒转化 | 第29页 |
| ·质粒的小量提取 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第30页 |
| ·质粒的中量提取 | 第30-31页 |
| ·细胞培养与转染 | 第31-32页 |
| ·细胞培养 | 第31页 |
| ·转染 | 第31-32页 |
| ·免疫印迹（Immunoblotting，IB） | 第32-33页 |
| ·蛋白样品制备 | 第32页 |
| ·上样电泳 | 第32页 |
| ·转膜 | 第32页 |
| ·IB 检测 | 第32-33页 |
| ·酵母双杂交实验 | 第33页 |
| ·酵母细胞共转染实验 | 第33页 |
| ·免疫共沉淀 | 第33-34页 |
| ·细胞免疫荧光染色 | 第34页 |
| ·GST-pull down 实验 | 第34-37页 |
| ·原核表达 GST 融合蛋白 | 第34-35页 |
| ·原核表达 HIS 融合蛋白 | 第35页 |
| ·纯化 GST 融合蛋白 | 第35-36页 |
| ·纯化 HIS 融合蛋白 | 第36页 |
| ·GST-pull down | 第36-37页 |
| 4 结果 | 第37-54页 |
| ·14-3-3 蛋白各个异构体的亚细胞定位 | 第37-40页 |
| ·14-3-3 蛋白各个异构体在 Hela 细胞分裂间期的定位 | 第37-38页 |
| ·14-3-3 蛋白各个异构体在 Hela 细胞有丝分裂期的定位 | 第38-40页 |
| ·酵母双杂交反应及人 HeLa 细胞 cDNA 文库的筛选 | 第40-41页 |
| ·诱饵蛋白表达载体的构建 | 第40页 |
| ·人 HeLa 细胞 cDNA 文库的筛选 | 第40-41页 |
| ·14-3-3ζ与 Plk1 蛋白之间的相互作用 | 第41-46页 |
| ·酵母细胞共转实验 | 第41-42页 |
| ·免疫荧光双标 | 第42-43页 |
| ·外源性免疫共沉淀 | 第43-44页 |
| ·内源性免疫共沉淀 | 第44-45页 |
| ·GST-pull down 实验 | 第45-46页 |
| ·Plk1330/597 位丝氨酸磷酸化对其与 14-3-3ζ蛋白的相互作用的影响 | 第46-50页 |
| ·Plk1 与 14-3-3ζ的相互作用具有磷酸化依耐性 | 第46-47页 |
| ·Plk1330/597 位丝氨酸磷酸化增强其与 14-3-3ζ蛋白的相互作用 | 第47-49页 |
| ·Plk1330/597 位丝氨酸磷酸化增强其与 14-3-3ζ蛋白相互作用发生在有丝分裂期 | 第49-50页 |
| ·14-3-3ζ与 Plk1 协同影响正常的胞质分裂 | 第50-54页 |
| ·基因敲除 14-3-3ζ或 Plk1 对两者亚细胞定位的影响 | 第50-51页 |
| ·基因敲除 14-3-3ζ影响正常的胞质分裂进程 | 第51-52页 |
| ·异常表达 Plk1 影响正常的胞质分裂进程 | 第52-54页 |
| 5 讨论 | 第54-56页 |
| ·胞质分裂与肿瘤的发生 | 第54页 |
| ·14-3-3ζ与 Plk1 之间存在相互作用 | 第54页 |
| ·14-3-3ζ与 Plk1 蛋白协同促进胞质分裂的顺利完成 | 第54-56页 |
| 6 结论 | 第56页 |
| 7 本研究的创新点 | 第56页 |
| 8 参考文献 | 第56-60页 |
| 附录 | 第60-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 综述 | 第63-80页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
