| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 引言 | 第9-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-25页 |
| ·植物耐盐机制研究进展 | 第11-15页 |
| ·盐对植物的影响 | 第11页 |
| ·植物抗盐机理 | 第11-15页 |
| ·渗透调节物质 | 第11-12页 |
| ·离子调控 | 第12-13页 |
| ·光合作用 | 第13页 |
| ·信号类物质 | 第13-14页 |
| ·活性氧调控 | 第14页 |
| ·胞外ATP | 第14-15页 |
| ·胞外ATP研究进展 | 第15-22页 |
| ·胞外ATP信号作用的发现与确证 | 第15-16页 |
| ·eATP的来源 | 第16页 |
| ·eATP受体的分类及其介导的反应 | 第16-18页 |
| ·eATP受体的分类 | 第16-17页 |
| ·eATP受体介导的反应 | 第17-18页 |
| ·植物eATP信号转导途径 | 第18-20页 |
| ·eATP与植物抗性 | 第20-22页 |
| ·eATP与渗透胁迫 | 第20-21页 |
| ·eATP与盐离子胁迫 | 第21页 |
| ·eATP的调节因子作用 | 第21-22页 |
| ·腺苷三磷酸双磷酸水解酶(Apyrase)研究进展 | 第22-25页 |
| ·Apyrase的提出和确证 | 第22-23页 |
| ·Apyrase的功能研究 | 第23-25页 |
| ·Apyrase与根瘤 | 第23页 |
| ·Apyrase与外界刺激 | 第23-24页 |
| ·Apyrase与信号转导 | 第24页 |
| ·Apyrase的其他功能 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-33页 |
| ·实验材料及器材 | 第25-26页 |
| ·实验材料与培养 | 第25页 |
| ·实验使用仪器 | 第25页 |
| ·分子生物实验使用试剂 | 第25页 |
| ·主要溶液与培养基的配置 | 第25-26页 |
| ·PeAPY2基因的克隆及序列分析 | 第26-28页 |
| ·PeAP-2基因的克隆 | 第26-27页 |
| ·引物设计与合成 | 第26页 |
| ·RNA提取 | 第26页 |
| ·逆转录反应 | 第26-27页 |
| ·基因ORF区扩增 | 第27页 |
| ·基因片段回收 | 第27页 |
| ·PeAPY2基因的生物信息学分析 | 第27-28页 |
| ·植物表达载体构建 | 第28-30页 |
| ·酶切反应体系 | 第28页 |
| ·酶切产物回收 | 第28-29页 |
| ·载体和目的片段去磷酸化、磷酸化 | 第29页 |
| ·载体去磷酸化 | 第29页 |
| ·PeAPY2磷酸化 | 第29页 |
| ·连接反应体系 | 第29页 |
| ·转化大肠杆菌 | 第29-30页 |
| ·烟草细胞BY-2转化 | 第30-31页 |
| ·提质粒 | 第30页 |
| ·转化农杆菌GV3101 | 第30-31页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌感受态细胞 | 第31页 |
| ·转基因烟草细胞的筛选鉴定 | 第31-32页 |
| ·转基因烟草细胞的荧光筛选 | 第31页 |
| ·转基因烟草细胞RT-PCR鉴定 | 第31-32页 |
| ·耐盐性测试 | 第32页 |
| ·离子含量测定 | 第32页 |
| ·细胞膜透性测定 | 第32页 |
| ·细胞活力 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-44页 |
| ·PeApy2基因的克隆及Apyrase的生物信息学分析 | 第33-36页 |
| ·PeAPY2基因的克隆 | 第33-34页 |
| ·Apyrase的序列分析 | 第34-36页 |
| ·同源性分析 | 第34-35页 |
| ·进化关系分析 | 第35页 |
| ·理化性质分析 | 第35页 |
| ·亲水性分析 | 第35-36页 |
| ·跨膜分析 | 第36页 |
| ·PeAPY2基因转化烟草细胞 | 第36-37页 |
| ·转基因烟草细胞的筛选鉴定 | 第37-38页 |
| ·转化烟草细胞的荧光鉴定 | 第37页 |
| ·转化烟草细胞RT-PCR鉴定 | 第37-38页 |
| ·转基因BY-2细胞的抗盐性 | 第38-40页 |
| ·离子含量 | 第40-42页 |
| ·膜透性 | 第42页 |
| ·细胞活力 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 6 进一步的工作 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| 个人简介 | 第55-56页 |
| 导师简介 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58页 |