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养殖水体环境微生物宏基因组文库构建和亚硝酸盐降解克隆子的筛选

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 绪论第11-26页
   ·我国水产养殖业的现状与面临的问题第11-12页
     ·我国水产养殖业的现状第11页
     ·我国水产养殖面临的问题第11-12页
   ·养殖水体中的亚硝酸盐污染第12-17页
     ·养殖水体中的 N 循环第12-14页
     ·亚硝酸盐对水产养殖的危害第14页
     ·亚硝酸盐的降解第14-15页
     ·好氧反硝化功能酶第15-16页
     ·亚硝酸盐还原酶第16-17页
   ·宏基因组文库技术第17-24页
     ·环境宏基因组第17-18页
     ·环境 DNA 的提取第18-19页
     ·环境宏基因组文库筛选技术第19-21页
     ·宏基因组文库的载体和宿主第21-22页
     ·插入基因的序列分析第22-23页
     ·环境宏基因组学技术的主要瓶颈第23-24页
   ·本研究的目的及内容第24-26页
     ·本研究的目的第24页
     ·本研究的内容第24-26页
第二章 宏基因组文库的构建第26-44页
   ·引言第26-28页
   ·材料与方法第28-32页
     ·样品采集与处理第28页
     ·主要试剂和仪器第28-30页
     ·基本溶液的配制第30页
     ·载体与宿主菌的保存第30-32页
   ·方法与步骤第32-38页
     ·基因组 DNA 的提取第32-33页
     ·基因组 DNA 的切割第33-34页
     ·基因组 DNA 的回收与浓缩第34-35页
     ·插入 DNA 片段的末端修复第35页
     ·基因组 DNA 的连接第35-36页
     ·Copycontrol Fosmid 重组质粒的包装第36-37页
     ·包装成功的 Copycontrol Fosmid 克隆的滴度测定第37页
     ·Copycontrol Fosmid 文库的涂布第37页
     ·Copycontrol Fosmid 文库的保存第37-38页
   ·结果第38-42页
     ·宏基因组 DNA 的提取结果第38-39页
     ·基因组大片段目的 DNA 的分离筛选第39页
     ·基因组大片段目的 DNA 的回收第39-40页
     ·大片段目的插入 DNA 末端修复第40页
     ·Fosmid 宏基因组文库滴度第40-41页
     ·fosmid 文库总量第41-42页
   ·讨论第42-43页
   ·本章小结第43-44页
第三章 养殖水体宏基因组文库质量鉴定第44-62页
   ·引言第44-45页
   ·材料和方法第45-50页
     ·插入基因大小鉴定第45-46页
     ·文库稳定性鉴定第46页
     ·文库覆盖范围鉴定第46-50页
   ·结果第50-56页
     ·Fosmid 宏基因组插入基因大小鉴定第50页
     ·Fosmid 宏基因组文库稳定性检验第50-52页
     ·Fosmid 宏基因组文库覆盖率检测第52-56页
   ·讨论第56-60页
   ·本章小结第60-62页
第四章 亚硝酸盐降解克隆子的筛选和插入基因的鉴定第62-85页
   ·引言第62-63页
   ·材料与方法第63-70页
     ·亚硝酸盐降解功能克隆子的筛选第63-64页
     ·亚硝酸盐降解功能克隆子的检验第64-65页
     ·克隆子插入基因的初步鉴定第65-70页
   ·结果第70-75页
     ·亚硝酸盐降解功能克隆子的筛选第70页
     ·亚硝酸盐降解功能克隆子的检验第70-72页
     ·克隆子插入基因的初步鉴定第72-75页
   ·讨论第75-82页
     ·亚硝酸盐降解功能克隆子筛选第75-77页
     ·阳性克隆子的初步鉴定第77-81页
     ·醋酸钙不动杆菌的反硝化功能第81-82页
   ·本章小结第82-85页
结论第85-89页
参考文献第89-95页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第95-96页
致谢第96-97页
附件第97页

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