| 目录 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-25页 |
| ·低密度脂蛋白受体(LDLR)基因家族的概述 | 第15-19页 |
| ·LDLR基因家族的成员 | 第15-16页 |
| ·LDLR基因家族的结构特征 | 第16-17页 |
| ·LDLR基因家族的功能 | 第17-19页 |
| ·脊椎动物中的卵生动物的卵黄原蛋白受体(VgR)研究进展 | 第19-20页 |
| ·昆虫卵黄原蛋白受体(VgR)的研究进展 | 第20-22页 |
| ·家蚕VgR的研究进展 | 第22-25页 |
| 第二章 引言 | 第25-27页 |
| ·研究背景及目的意义 | 第25页 |
| ·主要研究内容 | 第25-26页 |
| ·技术路线 | 第26-27页 |
| 第三章 家蚕卵黄原蛋白受体的结构分析与克隆 | 第27-39页 |
| ·实验材料与试剂 | 第27-28页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器 | 第27-28页 |
| ·主要溶液配制 | 第28页 |
| ·实验方法与步骤 | 第28-33页 |
| ·昆虫VgRs的信息分析 | 第28-29页 |
| ·目的基因片段的T克隆 | 第29-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-38页 |
| ·昆虫VgRs的结构分析 | 第33-34页 |
| ·昆虫VgRs的进化分析 | 第34页 |
| ·BmVgR的第一个配体结合结构域(LBD1)的克隆 | 第34-36页 |
| ·BmVgR的第二个配体结合结构域(LBD2)的克隆 | 第36-37页 |
| ·BmVgR的第一个配体结合结构域(LBD1)和第二个配体结合结构域(LBD2)的翻译后修饰位点预测 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| 第四章 家蚕卵黄原蛋白和卵黄原蛋白受体抗体的制备 | 第39-53页 |
| ·实验材料与试剂 | 第39-41页 |
| ·实验材料 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·主要溶液配制 | 第39-41页 |
| ·实验方法与步骤 | 第41-46页 |
| ·目的基因片段的T克隆 | 第41-42页 |
| ·表达载体构建 | 第42-43页 |
| ·原核表达 | 第43-44页 |
| ·纯化表达蛋白 | 第44-45页 |
| ·亲和层析纯化蛋白 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-50页 |
| ·BmVg及BmVgR短肽的克隆 | 第46-47页 |
| ·原核表达载体构建 | 第47-48页 |
| ·原核表达 | 第48页 |
| ·蛋白纯化 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-53页 |
| 第五章 家蚕初期蛹血液中卵黄原蛋白的纯化 | 第53-61页 |
| ·实验材料与试剂 | 第53-55页 |
| ·实验材料 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53-54页 |
| ·主要仪器 | 第54页 |
| ·主要溶液配制 | 第54-55页 |
| ·实验方法与步骤 | 第55-58页 |
| ·材料预处理 | 第55页 |
| ·硫酸铵沉淀分级处理 | 第55-56页 |
| ·阴离子交换层析 | 第56-57页 |
| ·Western blot检测 | 第57-58页 |
| ·结果与分析 | 第58-60页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第58页 |
| ·阴离子交换层析 | 第58-59页 |
| ·BmVg的分子检测 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| 第六章 家蚕卵黄原蛋白受体与卵黄原蛋白的结合与解离 | 第61-75页 |
| ·实验材料与试剂 | 第61-62页 |
| ·实验材料 | 第61页 |
| ·主要试剂 | 第61页 |
| ·主要仪器 | 第61页 |
| ·主要溶液配制 | 第61-62页 |
| ·实验方法与步骤 | 第62-68页 |
| ·目的基因片段的T克隆 | 第62-63页 |
| ·细胞表达载体构建 | 第63-64页 |
| ·细胞系的选择 | 第64-65页 |
| ·细胞免疫组化 | 第65-66页 |
| ·蛾期蚕卵pH的测定 | 第66页 |
| ·免疫共沉淀 | 第66-68页 |
| ·结果与分析 | 第68-72页 |
| ·BmVgR第一个配体结合结构域+第一个表皮生长因子(LBD1+EGF1)片段的克隆 | 第68-69页 |
| ·细胞表达载体的构建 | 第69-70页 |
| ·昆虫细胞系的选择 | 第70页 |
| ·大造及vit突变体的卵黄原蛋白受体在细胞水平上的表达差异 | 第70-71页 |
| ·蛾期蚕卵的pH测定 | 第71页 |
| ·免疫共沉淀 | 第71-72页 |
| ·讨论 | 第72-75页 |
| 第七章 家蚕卵黄原蛋白受体与不同配体的相互作用 | 第75-83页 |
| ·实验材料与试剂 | 第75-76页 |
| ·实验材料 | 第75页 |
| ·主要试剂 | 第75页 |
| ·主要仪器 | 第75页 |
| ·主要溶液配制 | 第75-76页 |
| ·实验方法与步骤 | 第76-78页 |
| ·细胞表达载体构建 | 第76页 |
| ·Far-Western blotting | 第76-78页 |
| ·结果与分析 | 第78-82页 |
| ·LBD1的细胞表达载体构建 | 第78页 |
| ·LBD2多种形式的细胞表达载体构建 | 第78-79页 |
| ·LBD1和LBD2多种形式的细胞表达 | 第79-81页 |
| ·LBD2与BmVg的相互作用 | 第81页 |
| ·LBD2与30K的相互作用 | 第81-82页 |
| ·讨论 | 第82-83页 |
| 第八章 结论与讨论 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-91页 |
| 附录 | 第91-93页 |
| 硕士在读期间发表论文及参加课题 | 第93-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
