摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-14页 |
第一章 绪论 | 第14-27页 |
·耐辐射奇球菌 | 第14-20页 |
·耐辐射奇球菌概况 | 第14页 |
·耐辐射奇球菌的基本特性 | 第14-15页 |
·耐辐射奇球菌的抗氧化保护机制 | 第15-20页 |
·超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶 | 第16-17页 |
·类胡萝卜素 | 第17-18页 |
·Mn~(2+)复合物 | 第18-19页 |
·蛋白调控 | 第19-20页 |
·黄素单核苷酸核糖开关(FMN riboswitch) | 第20-26页 |
·黄素单核苷酸核糖开关的结构特征 | 第20-21页 |
·黄素单核苷酸核糖开关的作用机制 | 第21-22页 |
·黄素单核苷酸核糖开关的研究进展 | 第22-26页 |
·FMN riboswitch 的三维结构 | 第22-23页 |
·基因表达调控研究 | 第23-24页 |
·调节过程中的热力学和动力学研究 | 第24-25页 |
·药物筛选和疾病治疗 | 第25-26页 |
·小结 | 第26-27页 |
第二章 实验方案设计 | 第27-29页 |
1 实验目的和意义 | 第27-28页 |
2 研究内容 | 第28页 |
3 实验流程图 | 第28-29页 |
第三章 耐辐射奇球菌FMN riboswitch的生物信息学分析 | 第29-35页 |
·材料与方法 | 第29-30页 |
·数据来源 | 第29页 |
·研究方法 | 第29-30页 |
·结果和分析 | 第30-33页 |
·FMN riboswitch 在 DR 基因组中的位置和基本特性 | 第30页 |
·FMN riboswitch 同源性保守序列分析 | 第30-31页 |
·FMN riboswitch 序列同源性的建树分析 | 第31-32页 |
·耐辐射奇球菌中 FMN riboswitch 的二级结构 | 第32-33页 |
·耐辐射奇球菌中 FMN riboswitch 的靶基因预测与初步筛选 | 第33页 |
·讨论 | 第33-35页 |
第四章 氧化胁迫下D. radiodurans中FMN riboswitch的表达 | 第35-43页 |
·材料与方法 | 第35-39页 |
·实验菌株与培养条件 | 第35页 |
·主要试剂和仪器 | 第35页 |
·引物 | 第35页 |
·耐辐射奇球菌培养与氧化处理 | 第35-36页 |
·从 DR 菌中提取总 RNA | 第36-37页 |
·DNaseI 处理总 RNA | 第37页 |
·逆转录反应 | 第37-38页 |
·PCR 反应 | 第38页 |
·荧光定量 PCR 反应检测 FMN riboswitch 表达差异 | 第38-39页 |
·结果与分析 | 第39-42页 |
·Total RNA 提取结果 | 第39-40页 |
·各基因 RT-PCR 结果 | 第40-41页 |
·荧光定量QPCR检测 FMN riboswitch 表达差异分析 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-43页 |
第五章 耐辐射奇球菌FMN riboswitch缺失突变株的构建 | 第43-55页 |
·材料与方法 | 第43-49页 |
·实验菌株、重组质粒和培养条件 | 第43页 |
·主要试剂和仪器 | 第43-44页 |
·耐辐射奇球菌 FMN riboswitch 缺失突变株的构建 | 第44页 |
·引物信息 | 第44-45页 |
·DR 菌基因组 DNA 的提取 | 第45页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第45-46页 |
·质粒的提取 | 第46页 |
·PCR 法获取目的片段 | 第46-47页 |
·DNA 片段的纯化回收 | 第47-48页 |
·重叠延伸 PCR 获取连接片段 | 第48页 |
·耐辐射球菌的感受态细胞制备与转化 | 第48-49页 |
·DR 的转化与突变株的筛选 | 第49页 |
·耐辐射奇球菌 FMN riboswitch 突变株的鉴定 | 第49页 |
·结果与分析 | 第49-54页 |
·耐辐射奇球菌的基因组 DNA | 第49-50页 |
·质粒 DNA | 第50页 |
·PCR 目的片段 | 第50-52页 |
·重叠延伸 PCR 连接片段 | 第52-53页 |
·突变子的筛选 | 第53页 |
·耐辐射奇球菌 FMN riboswitch 突变株的鉴定和构建 | 第53-54页 |
·讨论 | 第54-55页 |
第六章 耐辐射奇球菌FMN riboswitch突变株的特性分析 | 第55-59页 |
·材料与方法 | 第55-56页 |
·菌株、材料和试剂 | 第55页 |
·仪器和设备 | 第55页 |
·生长曲线测定 | 第55页 |
·菌株 H2O2抗性生存曲线测定 | 第55-56页 |
·结果与分析 | 第56-57页 |
·耐辐射奇球菌 FMN riboswitch 缺失突变株比较野生菌株 R1 的生长出现了延滞 | 第56页 |
·耐辐射奇球菌 FMN riboswitch 缺失突变株对 H2O2表现更为敏感 | 第56-57页 |
·讨论 | 第57-59页 |
结论 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
致谢 | 第67页 |