| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-27页 |
| ·海水养殖病害及防治 | 第13页 |
| ·迟钝爱德华氏菌及其感染 | 第13-17页 |
| ·分类、鉴定以及分布 | 第13页 |
| ·E.tarda引起的感染 | 第13-15页 |
| ·E.tarda的致病机制 | 第15-17页 |
| ·双组分系统 | 第17-23页 |
| ·细菌的信号转导系统 | 第17-20页 |
| ·双组分系统的进化及演变 | 第20-21页 |
| ·双组分系统介导细菌毒力 | 第21-22页 |
| ·E.tarda的双组分系统 | 第22-23页 |
| ·双组分系统的系统性研究 | 第23页 |
| ·尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶 | 第23-24页 |
| ·F_1F_0-型ATP合成酶 | 第24-25页 |
| ·本研究的主要内容及意义 | 第25-27页 |
| 第2章 迟钝爱德华氏菌双组分系统的预测及缺失突变 | 第27-50页 |
| ·前言 | 第27-29页 |
| ·实验材料 | 第29-36页 |
| ·菌株、质粒及引物 | 第29-36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·分析软件及技术服务 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-38页 |
| ·双组分系统元件的预测 | 第36页 |
| ·基因缺失突变株的构建 | 第36-37页 |
| ·回补菌株构建 | 第37-38页 |
| ·实验结果 | 第38-47页 |
| ·E.tarda EIB202编码63个双组分系统元件 | 第38-40页 |
| ·双组分系统元件的基因定位及功能分类 | 第40-43页 |
| ·反应调节蛋白突变株的构建 | 第43-46页 |
| ·回补菌株phop~+和esrB~+的构建 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| ·本章小结 | 第48-50页 |
| 第3章 迟钝爱德华氏菌的双组分系统的评价 | 第50-66页 |
| ·前言 | 第50页 |
| ·实验材料 | 第50-53页 |
| ·菌株、质粒及引物 | 第50-51页 |
| ·主要试剂和材料 | 第51-52页 |
| ·分析软件及技术服务 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-56页 |
| ·生物聚集检测 | 第53页 |
| ·生长曲线测定 | 第53页 |
| ·生物被膜检测 | 第53页 |
| ·抗生素敏感性分析 | 第53页 |
| ·压力应激检测 | 第53-54页 |
| ·蛋白样品制备与分离 | 第54页 |
| ·Western blot蛋白印迹分析 | 第54页 |
| ·斑马鱼半致死剂量测定 | 第54-55页 |
| ·启动子转录融合表达分析 | 第55-56页 |
| ·抗茵肽敏感性测试 | 第56页 |
| ·实验结果 | 第56-62页 |
| ·生长特性 | 第56-57页 |
| ·生物被膜 | 第57-58页 |
| ·抗生素敏感性 | 第58页 |
| ·压力应激 | 第58-59页 |
| ·EseB和EvpP的表达及分泌 | 第59页 |
| ·斑马鱼半致死剂量 | 第59-60页 |
| ·PhoP通过EsrB调控Ⅲ型及Ⅵ型分泌系统的表达 | 第60-62页 |
| ·PhoP介导E.tarda抵抗抗菌肽的杀伤 | 第62页 |
| ·讨论 | 第62-65页 |
| ·本章小结 | 第65-66页 |
| 第4章 Ugd受到PhoP调控并介导抗菌肽抗性及毒力 | 第66-81页 |
| ·前言 | 第66页 |
| ·实验材料 | 第66-67页 |
| ·菌株、质粒及引物 | 第66页 |
| ·主要仪器设备及试剂 | 第66页 |
| ·分析软件及技术服务 | 第66-67页 |
| ·实验方法 | 第67-70页 |
| ·脂多糖的抽提及检测 | 第68-69页 |
| ·生物聚集检测 | 第69页 |
| ·溶血活性检测 | 第69页 |
| ·硫酸软骨素酶活性检测 | 第69页 |
| ·胞内存活能力检测 | 第69页 |
| ·斑马鱼体内竞争实验 | 第69页 |
| ·大菱鲆体内增殖能力分析 | 第69-70页 |
| ·斑马鱼幼鱼侵染分析 | 第70页 |
| ·大菱鲆免疫保护力分析 | 第70页 |
| ·转录融合表达分析 | 第70页 |
| ·实验结果 | 第70-79页 |
| ·不同来源ugd基因的染色体定位 | 第70-71页 |
| ·△ugd和ugd~+菌株的构建 | 第71-73页 |
| ·Ugd介导E.tarda抵抗CAMP的杀伤 | 第73-74页 |
| ·Ugd影响E.tarda的表面结构 | 第74页 |
| ·Ugd影响溶血活性及胞内存活能力 | 第74-75页 |
| ·Ugd影响E.tarda在宿主中的毒力及定殖 | 第75-76页 |
| ·抗菌肽通过PhoP激活ugd的转录表达 | 第76-78页 |
| ·△ugd对大菱鲆具有免疫保护效果 | 第78-79页 |
| ·讨论 | 第79-80页 |
| ·本章小结 | 第80-81页 |
| 第5章 PhoP的比较蛋白组学分析 | 第81-96页 |
| ·前言 | 第81页 |
| ·实验材料 | 第81-84页 |
| ·菌株、质粒及引物 | 第81页 |
| ·主要仪器设备及试剂 | 第81-84页 |
| ·分析软件及技术服务 | 第84页 |
| ·实验方法 | 第84-86页 |
| ·双向电泳 | 第84-85页 |
| ·差异蛋白点鉴定 | 第85页 |
| ·实时定量PCR | 第85页 |
| ·逆转录PCR | 第85页 |
| ·凝胶迁移率实验 | 第85-86页 |
| ·实验结果 | 第86-92页 |
| ·野生株和△phoP的比较蛋白组学分析 | 第86-88页 |
| ·实时定量PCR验证分析 | 第88页 |
| ·△atpD和△aur菌株的构建 | 第88页 |
| ·△atoD和△aur的表型分析 | 第88-90页 |
| ·PhoP调控F_1F_0-型ATP合成酶基因的表达 | 第90-92页 |
| ·讨论 | 第92-95页 |
| ·本章小结 | 第95-96页 |
| 第6章 结论和创新点 | 第96-98页 |
| ·主要结论 | 第96页 |
| ·论文创新点 | 第96-97页 |
| ·展望 | 第97-98页 |
| 缩略语 | 第98-100页 |
| 参考文献 | 第100-112页 |
| 攻读博士学位期间研究成果 | 第112-114页 |
| 致谢 | 第114页 |
