摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
引言 | 第10-11页 |
1 文献综述 | 第11-25页 |
·AIB1概述 | 第11-16页 |
·AIB1简介 | 第11页 |
·AIB1蛋白的结构 | 第11-13页 |
·AIB1活性的调控 | 第13-15页 |
·AIB1的生理功能 | 第15-16页 |
·GPS2概述 | 第16-22页 |
·GPS2的发现 | 第16页 |
·GPS2蛋白的基本结构 | 第16-17页 |
·GPS2蛋白的作用机理 | 第17-20页 |
·GPS2蛋白的生物学功能 | 第20-22页 |
·本论文的选题依据和研究内容 | 第22-25页 |
·选题依据 | 第22-23页 |
·研究内容 | 第23-25页 |
2 AIB1和GPS2全长及缺失体的真核表达载体的构建 | 第25-42页 |
·引言 | 第25页 |
·仪器与试剂 | 第25-27页 |
·仪器 | 第25-26页 |
·试剂 | 第26-27页 |
·菌种、细胞和质粒 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-37页 |
·质粒的提取 | 第27页 |
·细胞培养 | 第27-28页 |
·质粒转染 | 第28页 |
·细胞裂解 | 第28页 |
·免疫印迹(Western blotting) | 第28-29页 |
·感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
·pACT-AIB1全长及缺失体的构建 | 第30-32页 |
·pBIND-GPS2全长及其缺失体的构建 | 第32-34页 |
·Flag-AIB1缺失体的构建 | 第34-35页 |
·Flag-GPS2缺失体的构建 | 第35-37页 |
·实验结果 | 第37-41页 |
·pACT-AIB1全长及缺失体的构建 | 第37-38页 |
·pBIND-GPS2全长及缺失体的构建 | 第38-39页 |
·Flag-AIB1缺失体的构建及其在细胞中的表达 | 第39-40页 |
·Flag-GPS2缺失体的构建及其在细胞中的表达 | 第40-41页 |
·小结 | 第41-42页 |
3 GPS2与AIB1相互作用的确定 | 第42-49页 |
·引言 | 第42页 |
·仪器与试剂 | 第42-43页 |
·仪器 | 第42页 |
·试剂 | 第42-43页 |
·菌种、细胞和质粒 | 第43页 |
·实验方法 | 第43-45页 |
·质粒提取 | 第43页 |
·细胞培养 | 第43页 |
·质粒转染 | 第43页 |
·细胞裂解 | 第43页 |
·免疫印迹 | 第43页 |
·免疫共沉淀(Co-IP) | 第43-44页 |
·甫乳动物双杂交 | 第44页 |
·免疫荧光 | 第44-45页 |
·实验结果 | 第45-48页 |
·GPS2与AIB之间相互作用的确定 | 第45-47页 |
·GPS2与AIB1之间共定位的确定 | 第47-48页 |
·小结 | 第48-49页 |
4 GPS2与AIB1相互作用区域的鉴定 | 第49-55页 |
·引言 | 第49页 |
·仪器与试剂 | 第49-50页 |
·仪器 | 第49页 |
·试剂 | 第49页 |
·菌种、细胞和质粒 | 第49-50页 |
·实验方法 | 第50页 |
·质粒提取 | 第50页 |
·细胞培养 | 第50页 |
·质粒转染 | 第50页 |
·细胞裂解 | 第50页 |
·免疫印迹 | 第50页 |
·免疫共沉淀 | 第50页 |
·哺乳动物双杂交 | 第50页 |
·实验结果 | 第50-54页 |
·GPS2与AIB1的612-1004氨基酸区域相互作用的确定 | 第50-52页 |
·AIB1与GPS2的110-234氨基酸区域相互作用的确定 | 第52-54页 |
·小结 | 第54-55页 |
5 GPS2对AIB1转录活性的影响 | 第55-60页 |
·引言 | 第55页 |
·仪器与试剂 | 第55页 |
·仪器 | 第55页 |
·试剂 | 第55页 |
·菌种、细胞和质粒 | 第55页 |
·实验方法 | 第55-56页 |
·质粒提取 | 第55页 |
·细胞培养 | 第55页 |
·质粒转染 | 第55页 |
·荧光素酶报告基因实验 | 第55-56页 |
·实验结果 | 第56-58页 |
·GPS2对AIB1转录活性的影响 | 第56-57页 |
·GPS2的二聚化对AIB1转录活性的影响 | 第57-58页 |
·小结 | 第58-60页 |
结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |