| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-22页 |
| ·人巨细胞病毒(HCMV) | 第11-14页 |
| ·HCMV生物学特征 | 第11-12页 |
| ·HCMV流行病学 | 第12-13页 |
| ·HCMV致病机制 | 第13页 |
| ·HCMV所致疾病 | 第13-14页 |
| ·人体抗HCMV感染机制 | 第14-17页 |
| ·机体针对HCMV的体液免疫 | 第14-16页 |
| ·机体针对HCMV的细胞免疫 | 第16-17页 |
| ·HCMV的防治 | 第17-20页 |
| ·抗HCMV药物 | 第17页 |
| ·HCMV疫苗 | 第17-18页 |
| ·gB在HCMV疫苗中的研究 | 第18-20页 |
| ·pp65在HCMV疫苗中的研究 | 第20页 |
| ·本课题的研究思路及主要研究内容 | 第20-22页 |
| 2 重组HCMV外被蛋白基因在大肠杆菌中的表达 | 第22-35页 |
| ·引言 | 第22页 |
| ·实验材料、试剂和仪器 | 第22-24页 |
| ·实验仪器 | 第22-23页 |
| ·实验试剂 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-31页 |
| ·HCMVpp65_(362-504)-gB_(607-621)基因的获得 | 第24-26页 |
| ·pFLAG-ATS-pp65_(362-504)-gB_(607-621)载体的构建 | 第26-29页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第29-30页 |
| ·SDS-PAGE检测HCMV外被融合蛋白表达 | 第30-31页 |
| ·实验结果与讨论 | 第31-33页 |
| ·PCR扩增HCMV目的基因片段 | 第31-32页 |
| ·pFLAG-ATS-pp65_(362-504)-gB_(607-621)重组质粒的构建与鉴定 | 第32页 |
| ·重组HCMV外被蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 3 重组HCMV外被蛋白基因在昆虫细胞中的表达 | 第35-54页 |
| ·引言 | 第35页 |
| ·实验材料 | 第35-37页 |
| ·实验仪器 | 第35-36页 |
| ·实验试剂 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-45页 |
| ·HCMVpp65_(362-504)-gB_(607-621)基因的获得 | 第37-38页 |
| ·pFastBac~(TM)Dual-EGFP-pp65_(362-504)-gB_(607-621)载体的构建 | 第38-41页 |
| ·重组杆粒bacmid-EGFP-pp65_(362-504)-gB_(607-621)的构建 | 第41-42页 |
| ·重组杆粒bacmid-EGFP-pp65_(362-504)-gB_(607-621)的转染 | 第42-43页 |
| ·重组HCMV外被蛋白基因在昆虫细胞中的表达 | 第43页 |
| ·SDS-PAGE检测表达蛋白质 | 第43页 |
| ·Western Blot检测昆虫细胞表达目的蛋白质 | 第43-44页 |
| ·昆虫细胞表达目的蛋白质的纯化 | 第44-45页 |
| ·昆虫细胞表达目的蛋白质加入病毒量的优化 | 第45页 |
| ·实验结果 | 第45-51页 |
| ·HCMV pp65_(362-504)-gB_(607-621)融合基因PCR扩增 | 第45-47页 |
| ·pFastBacTMDual-EGFP-pp65_(362-504)-gB_(607-621)载体的构建与鉴定 | 第47页 |
| ·重组杆粒bacmid-EGFP-pp65_(362-504)-gB_(607-621)的构建 | 第47-48页 |
| ·重组杆粒bacmid-EGFP-pp65_(362-504)-gB_(607-621)的转染 | 第48页 |
| ·重组HCMV外被蛋白基因在昆虫细胞中的表达 | 第48-49页 |
| ·Western Blot检测目的蛋白质 | 第49-50页 |
| ·昆虫细胞表达目的蛋白质的纯化 | 第50-51页 |
| ·昆虫细胞表达目的蛋白质加入病毒量的优化 | 第51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-54页 |
| 结论与展望 | 第54-55页 |
| 结论 | 第54页 |
| 展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 附录A 缩略语表及名称说明 | 第62-64页 |
| 附录B-Ⅰ pFLAG-ATS载体质粒 | 第64-65页 |
| 附录B-Ⅱ pFastBac~(TM)Dual载体质粒 | 第65-67页 |
| 附录C-Ⅰ pFLAG-ATS-pp65_(362.504)-gB_(607-621)测序结果 | 第67-69页 |
| 附录C-Ⅱ pFastBac~(TM)Dual-EGFP-pp65_(362-504)-gB_(607-621)测序结果 | 第69-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |