| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-7页 |
| 引言 | 第7-9页 |
| 第1章 减蛋综合症病毒纤维蛋白C-末端基因的克隆表达 | 第9-15页 |
| ·材料与方法 | 第9-11页 |
| ·实验材料及主要仪器 | 第9页 |
| ·实验方法 | 第9-11页 |
| ·表达载体和工程菌的构建 | 第9-10页 |
| ·纤维蛋白在工程菌中表达 | 第10页 |
| ·包涵体的洗涤与溶解 | 第10页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第10页 |
| ·目的蛋白的透析、干燥与溶解 | 第10页 |
| ·重组蛋白的抗原性鉴定 | 第10-11页 |
| ·结果 | 第11-14页 |
| ·纤维蛋白C-末端编码序列基因的PCR扩增 | 第11-12页 |
| ·含纤维蛋白C-末端编码序列基因原核表达载体的构建 | 第12页 |
| ·纤维蛋白工程菌的构建及表达 | 第12页 |
| ·重组基因工程菌表达情况鉴定 | 第12-13页 |
| ·包涵体洗涤与尿素溶解 | 第13页 |
| ·重组蛋白的纯化和抗原性分析 | 第13-14页 |
| ·讨论 | 第14-15页 |
| 第2章 减蛋综合症病毒纤维蛋白C-末端基因在大肠杆菌中的分泌表达 | 第15-20页 |
| ·材料与方法 | 第15-16页 |
| ·实验菌株、质粒及主要仪器 | 第15页 |
| ·实验方法 | 第15-16页 |
| ·重组质粒pUC18ompAcat-EDSC的构建 | 第15页 |
| ·重组质粒工程菌的构建及蛋白表达 | 第15-16页 |
| ·重组蛋白在周质空间腔中表达的检测 | 第16页 |
| ·重组蛋白在培养物上清中的检测 | 第16页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第16页 |
| ·重组蛋白的抗原性鉴定 | 第16页 |
| ·结果 | 第16-19页 |
| ·重组表达质粒pUC18ompA-EDSC的构建 | 第16-17页 |
| ·pA-EDSC 工程菌的全蛋白表达及检测 | 第17页 |
| ·重组蛋白的纯化及分泌情况分析 | 第17-18页 |
| ·重组蛋白的抗原性分析 | 第18-19页 |
| ·讨论 | 第19-20页 |
| 第3章 纤维蛋白的C-末端基因在枯草芽孢杆菌中表达 | 第20-25页 |
| ·材料与方法 | 第20-21页 |
| ·菌株、质粒及主要仪器 | 第20页 |
| ·枯草转化相关试剂的配制 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-21页 |
| ·EDSC表达质粒的构建 | 第20页 |
| ·ESDC表达质粒转化枯草芽孢杆菌 | 第20-21页 |
| ·阳性克隆筛选及鉴定 | 第21页 |
| ·EDSC在枯草芽孢杆菌中的表达及纯化 | 第21页 |
| ·减蛋综合症纤维蛋白的SDS-PAGE和Western-blotting分析 | 第21页 |
| ·结果 | 第21-23页 |
| ·pA-EDSC质粒转化枯草芽孢杆菌的鉴定 | 第21-22页 |
| ·pA-EDSC的胞内表达及纯化 | 第22-23页 |
| ·减蛋综合症纤维蛋白表达的Western-blotting分析结果 | 第23页 |
| ·讨论 | 第23-25页 |
| 参考文献 | 第25-28页 |
| 综述 | 第28-40页 |
| 参考文献 | 第36-40页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第40页 |
| 附录 | 第40-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
