| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-20页 |
| ·研究背景 | 第8-17页 |
| ·内部核糖体进入序列研究进展 | 第8-13页 |
| ·肿瘤多药耐药形成机制研究进展 | 第13-16页 |
| ·多药耐药与细胞 IRES 的关系 | 第16-17页 |
| ·本实验室前期研究工作小结 | 第17页 |
| ·课题研究意义 | 第17-18页 |
| ·课题研究内容 | 第18-20页 |
| 第二章 MDR1-5’UTR 中 IRES 活性检测质粒的构建 | 第20-40页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·质粒与宿主菌株 | 第20页 |
| ·试剂 | 第20页 |
| ·仪器设备 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-26页 |
| ·常用试剂配制方法 | 第21页 |
| ·质粒提取步骤 | 第21-22页 |
| ·酶切产物割胶回收步骤 | 第22页 |
| ·PCR 产物纯化 | 第22-23页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第23页 |
| ·转化感受态细胞 | 第23-24页 |
| ·质粒构建 | 第24-26页 |
| ·结果与结论 | 第26-39页 |
| ·pCI-EGFP-*MDR1DsRed 的分子构建 | 第26-28页 |
| ·pCI-EGFP-*MDR1DsRed*的分子构建 | 第28-30页 |
| ·pCI-EGFP- bMDR1DsRed 的分子构建 | 第30-32页 |
| ·pCI-EGFP- fMDR1DsRed 的分子构建 | 第32-34页 |
| ·pCI-EGFP- tbDsRed 的分子构建 | 第34-36页 |
| ·pCI-EGFP- mMDR1DsRed 的分子构建 | 第36-38页 |
| ·重组质粒结构简图汇总 | 第38-39页 |
| ·本章小结 | 第39-40页 |
| 第三章 MDR1-5’UTR 中 IRES 活性的鉴定及中心活性域探究 | 第40-50页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·细胞株 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40-41页 |
| ·仪器设备 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-44页 |
| ·细胞培养基的配制 | 第41页 |
| ·细胞复苏、传代及冻存 | 第41-42页 |
| ·细胞转染步骤 | 第42页 |
| ·倒置荧光显微镜检测 | 第42页 |
| ·荧光分光光度计检测 | 第42页 |
| ·Western blot 检测步骤 | 第42-43页 |
| ·流式细胞仪检测步骤 | 第43-44页 |
| ·结果与结论 | 第44-49页 |
| ·倒置荧光显微镜下观察各组质粒中的荧光蛋白表达情况 | 第44-45页 |
| ·荧光分光光度计检测各组质粒中荧光蛋白的相对荧光值 | 第45-46页 |
| ·Western Blot 检测荧光蛋白的相对表达量 | 第46页 |
| ·流式细胞仪分析结果 | 第46-49页 |
| ·本章小结 | 第49-50页 |
| 第四章 利用双启动子表达载体鉴定 MDR1-5’UTR 的 IRES 活性 | 第50-64页 |
| ·实验材料 | 第50页 |
| ·质粒、宿主菌株及细胞株 | 第50页 |
| ·试剂及仪器设备 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-52页 |
| ·分子克隆实验常用试剂及细胞培养基配制方法 | 第50页 |
| ·质粒提取步骤 | 第50页 |
| ·酶切产物割胶回收、PCR 产物纯化及琼脂糖凝胶电泳步骤 | 第50-51页 |
| ·质粒构建方法 | 第51-52页 |
| ·细胞转染步骤 | 第52页 |
| ·倒置荧光显微镜检测 | 第52页 |
| ·荧光分光光度计及 Western blot 检测步骤 | 第52页 |
| ·流式细胞仪检测步骤 | 第52页 |
| ·结果与结论 | 第52-62页 |
| ·质粒构建 | 第52-57页 |
| ·重组质粒结构简图汇总 | 第57页 |
| ·倒置荧光显微镜观察结果 | 第57-59页 |
| ·荧光分光光度计检测各组质粒中荧光蛋白的相对荧光值 | 第59-60页 |
| ·Western Blot 检测荧光蛋白的相对表达量 | 第60-61页 |
| ·流式细胞仪分析结果 | 第61-62页 |
| ·本章小结 | 第62-64页 |
| 第五章 总结与展望 | 第64-66页 |
| ·研究总结 | 第64页 |
| ·问题及展望 | 第64-66页 |
| ·论文问题 | 第64页 |
| ·课题展望 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第72页 |
