青枯菌效应蛋白PopP1的转基因烟草及其对青枯病的抗性
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第10-14页 |
| 1.1 烟草青枯病的发生和为害 | 第10页 |
| 1.2 病原菌Avr基因与寄主植物R基因 | 第10-11页 |
| 1.3 青枯菌无毒基因PopP1研究进展 | 第11页 |
| 1.4 烟草青枯病的防治与抗病育种 | 第11-13页 |
| 1.5 课题研究意义与内容 | 第13-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-19页 |
| 2.1 试验材料 | 第14-15页 |
| 2.1.1 供试菌株和质粒 | 第14页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第14页 |
| 2.1.3 植株材料 | 第14页 |
| 2.1.4 引物的设计与合成 | 第14-15页 |
| 2.2 试验方法 | 第15-19页 |
| 2.2.1 启动子与PopP1基因的重叠融合 | 第15-16页 |
| 2.2.2 转基因载体的构建 | 第16-17页 |
| 2.2.3 转基因载体的瞬时表达验证 | 第17页 |
| 2.2.4 转基因烟草及鉴定 | 第17页 |
| 2.2.5 Real-time PCR | 第17-18页 |
| 2.2.6 转基因烟草的抗性检测 | 第18-19页 |
| 3 结果与分析 | 第19-26页 |
| 3.1 启动子与PopP1基因的重叠PCR扩增 | 第19页 |
| 3.2 转基因载体的构建 | 第19-20页 |
| 3.3 转基因载体的有效性检测 | 第20-21页 |
| 3.4 转基因烟草的鉴定 | 第21-22页 |
| 3.5 转基因烟草中PopP1基因的表达 | 第22页 |
| 3.6 T1代转基因烟草的阳性鉴定 | 第22-24页 |
| 3.7 T1代PopP1转基因烟草的抗性检测 | 第24-26页 |
| 4 讨论 | 第26-28页 |
| 参考文献 | 第28-33页 |
| 致谢 | 第33-34页 |
| 附录A 植物基因组DNA提取步骤 | 第34-35页 |
| 附录B 植物总RNA提取实验步骤 | 第35-36页 |
| 附录C 植物cDNA合成步骤 | 第36页 |
