| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 符号及缩略语说明 | 第11-13页 |
| 1 观赏植物启动子研究进展 | 第13-32页 |
| ·启动子的类型及其特点 | 第13-15页 |
| ·组成型启动子 | 第13-14页 |
| ·组织特异型启动子 | 第14页 |
| ·诱导型启动子 | 第14-15页 |
| ·启动子的分离方法 | 第15-26页 |
| ·利用PCR技术克隆启动子 | 第15页 |
| ·基于PCR的染色体步移技术 | 第15-22页 |
| ·反向PCR | 第16页 |
| ·锚定PCR步移法 | 第16-17页 |
| ·利用载体的步移法 | 第17页 |
| ·接头染色体步移法 | 第17-19页 |
| ·随机引物搭配特异引物PCR法 | 第19页 |
| ·TAIL-PCR法 | 第19-21页 |
| ·YADE法 | 第21-22页 |
| ·通过构建及筛选基因组文库来克隆启动子 | 第22-23页 |
| ·利用启动子探针质粒载体筛选启动子 | 第23-24页 |
| ·启动子捕获技术 | 第24-25页 |
| ·几种启动子分离技术的比较及应用范围 | 第25-26页 |
| ·启动子的研究方法 | 第26-27页 |
| ·生物信息学方法 | 第26页 |
| ·瞬间表达分析 | 第26-27页 |
| ·转化分析 | 第27页 |
| ·突变分析 | 第27页 |
| ·启动子在观赏植物中的应用研究 | 第27-31页 |
| ·花色 | 第27-28页 |
| ·花期 | 第28页 |
| ·抗性 | 第28-29页 |
| ·抗生物胁迫 | 第28-29页 |
| ·抗非生物胁迫 | 第29页 |
| ·雄性不育系 | 第29-30页 |
| ·株型 | 第30页 |
| ·花型 | 第30-31页 |
| ·延长植株观赏期 | 第31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| 2 本研究的主要内容 | 第32-35页 |
| 3 高盐和干旱胁迫下甘菊甜菜碱合成途径结构基因表达研究 | 第35-49页 |
| ·材料与方法 | 第36-40页 |
| ·试验材料 | 第36页 |
| ·试验仪器与试剂 | 第36页 |
| ·试验仪器与设备 | 第36页 |
| ·试验试剂 | 第36页 |
| ·试验方法 | 第36-40页 |
| ·改良Trizol法提取甘菊总RNA | 第36-37页 |
| ·逆转录合成cDNA第一链 | 第37页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第37-38页 |
| ·甘菊叶片甜菜碱含量测定 | 第38-40页 |
| ·甘菊叶片叶绿素含量测定 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-46页 |
| ·NaCl处理对甘菊植株生长的影响 | 第40页 |
| ·NaCl胁迫处理下甘菊叶片中BADH基因表达及甜菜碱含量变化 | 第40-45页 |
| ·甘菊BADH基因表达变化 | 第40-42页 |
| ·甘菊甜菜碱含量变化 | 第42-43页 |
| ·甘菊BADH基因和甜菜碱含量间的变化关系 | 第43-45页 |
| ·干旱胁迫处理下甘菊叶片中BADH基因表达量的变化 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| ·BADH基因表达量的变化 | 第46-47页 |
| ·甜菜碱含量的变化 | 第47页 |
| ·BADH基因表达量与甜菜碱含量变化间的相互关系 | 第47-48页 |
| ·结论 | 第48-49页 |
| 4 甘菊BADH基因4个启动子功能研究 | 第49-65页 |
| ·材料与方法 | 第49-56页 |
| ·试验材料 | 第49-50页 |
| ·植物材料 | 第49-50页 |
| ·菌种与载体 | 第50页 |
| ·生化试剂 | 第50页 |
| ·试验方法 | 第50-56页 |
| ·农杆菌叶盘法转化烟草 | 第50-51页 |
| ·转基因烟草的分化与生根培养 | 第51-52页 |
| ·转基因烟草苗的鉴定 | 第52页 |
| ·转基因烟草苗拷贝数的鉴定 | 第52-53页 |
| ·转基因烟草的胁迫处理 | 第53-54页 |
| ·转基因烟草GUS活性检测 | 第54-56页 |
| ·试验结果 | 第56-61页 |
| ·转基因烟草植株的筛选与鉴定 | 第56页 |
| ·实时荧光定量PCR法鉴定转基因烟草植株的拷贝数 | 第56-58页 |
| ·不同启动子表达模式的鉴定 | 第58-59页 |
| ·非生物胁迫下转基因烟草叶片中GUS活性变化 | 第59-61页 |
| ·盐胁迫 | 第59-60页 |
| ·ABA、SA、干旱和低温胁迫处理 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-64页 |
| ·不同启动子间的表达活性差异 | 第62页 |
| ·MYB顺式作用元件响应胁迫诱导 | 第62-64页 |
| ·结论 | 第64-65页 |
| 5 甘菊BADH基因启动子DBP12缺失片段功能鉴定 | 第65-86页 |
| ·材料与方法 | 第65-71页 |
| ·试验材料 | 第65页 |
| ·转化材料 | 第65页 |
| ·菌种与材料 | 第65页 |
| ·生化试剂 | 第65页 |
| ·试验方法 | 第65-71页 |
| ·表达载体的构建 | 第65-70页 |
| ·瞬时表达 | 第70-71页 |
| ·农杆菌叶盘法转化烟草 | 第71页 |
| ·转基因烟草植株的胁迫处理 | 第71页 |
| ·转基因烟草GUS活性检测 | 第71页 |
| ·试验结果 | 第71-81页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第71-73页 |
| ·中间表达载体的构建 | 第71页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第71-72页 |
| ·植物表达载体的鉴定 | 第72页 |
| ·植物表达载体转入农杆菌 | 第72-73页 |
| ·瞬时表达结果 | 第73-74页 |
| ·阳性烟草转化苗的筛选与鉴定 | 第74-75页 |
| ·烟草转化苗的筛选 | 第74页 |
| ·阳性转化苗的鉴定 | 第74-75页 |
| ·DBP12启动子各缺失片段基础活性研究 | 第75-77页 |
| ·转基因烟草胁迫处理 | 第77-81页 |
| ·NaCl胁迫处理 | 第77-78页 |
| ·干旱胁迫处理 | 第78-79页 |
| ·ABA胁迫处理 | 第79页 |
| ·低温胁迫处理 | 第79页 |
| ·不同胁迫处理间的比较 | 第79-81页 |
| ·讨论 | 第81-85页 |
| ·各缺失片段对于胁迫的响应 | 第82-83页 |
| ·5'-UTR对于启动子活性的影响 | 第83-85页 |
| ·结论 | 第85-86页 |
| 6 甘菊诱导型启动子的克隆与序列分析 | 第86-99页 |
| ·材料与方法 | 第86-94页 |
| ·试验材料 | 第86-87页 |
| ·植物材料 | 第86页 |
| ·菌种与材料 | 第86-87页 |
| ·生化试剂 | 第87页 |
| ·试验方法 | 第87-94页 |
| ·甘菊总DNA的提取 | 第88-89页 |
| ·甘菊DNA的酶切 | 第89页 |
| ·酶切后DNA的纯化及回收 | 第89-90页 |
| ·酶切片段与Genome Walker Adaptor的连接 | 第90页 |
| ·启动子序列的分离 | 第90-92页 |
| ·表达载体的构建 | 第92-94页 |
| ·瞬时表达 | 第94页 |
| ·试验结果 | 第94-98页 |
| ·甘菊中响应盐诱导表达的基因启动子 | 第94-96页 |
| ·启动子序列分析 | 第96-97页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第97页 |
| ·瞬时表达结果与分析 | 第97-98页 |
| ·讨论 | 第98-99页 |
| 7 结论 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-117页 |
| 附表一 | 第117-123页 |
| 附表二 | 第123-129页 |
| 个人简历 | 第129-131页 |
| 导师简介 | 第131-133页 |
| 致谢 | 第133页 |
