中文摘要 | 第1-14页 |
ABSTRACT | 第14-19页 |
符号说明 | 第19-21页 |
前言 | 第21-27页 |
1. 研究背景 | 第21-25页 |
·人类肠道病毒(HEVs)概述 | 第21-22页 |
·人类肠道病毒的生物学特性和分子结构 | 第22-23页 |
·生活污水中HEVs的浓缩分离及其应用研究现状 | 第23-25页 |
2. 本研究的目的与意义 | 第25-26页 |
·本研究的主要目的 | 第25页 |
·本研究的意义 | 第25-26页 |
3. 本研究的技术路线与实施 | 第26-27页 |
材料与方法 | 第27-39页 |
1. 仪器、试剂与耗材 | 第27-30页 |
·生活污水采集与浓缩富集的主要试剂和仪器设备 | 第27页 |
·病例标本采集和处理的主要试剂和仪器设备 | 第27-28页 |
·细胞培养材料和主要仪器设备 | 第28-29页 |
·病毒分离的主要仪器设备 | 第29-30页 |
·核酸提取与基因扩增材料和主要仪器设备 | 第30页 |
·琼脂糖凝胶电泳材料和主要仪器设备 | 第30页 |
2. 环境污水标本的采集与浓缩富集 | 第30-33页 |
·选择污水采集地点 | 第30-31页 |
·确定生活污水采集频率和持续时间 | 第31页 |
·生活污水标本的采集、运送与保存 | 第31-32页 |
·阴离子膜-超声振荡法浓缩富集病毒 | 第32-33页 |
3. 病例标本的采集与处理 | 第33-34页 |
·选择哨点医院 | 第33页 |
·监测病例定义 | 第33页 |
·病例标本的采集 | 第33-34页 |
·病例标本的处理 | 第34页 |
4. 细胞培养方法 | 第34页 |
5. 病毒分离 | 第34-35页 |
6. 病毒血清学型别鉴定 | 第35页 |
7. 核酸提取、基因扩增及序列测定 | 第35-38页 |
·HEVs核糖核酸的提取 | 第35-36页 |
·逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR) | 第36-37页 |
·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第37页 |
·HEVs核糖核酸序列测定及提交 | 第37-38页 |
8. HEVs血清型分子生物学鉴定 | 第38页 |
9. 环境生活污水中HEVs的分子进化研究 | 第38页 |
10. 质量控制 | 第38-39页 |
结果 | 第39-69页 |
1. 环境监测中病毒的分离情况 | 第39-41页 |
2. 环境监测中PV的分离情况及其变异重组分析 | 第41-47页 |
·环境监测中PV的分离情况 | 第41-43页 |
·环境监测中PV的分布 | 第43-44页 |
·环境监测中分离到的PV变异重组 | 第44-47页 |
3. 环境监测与病例监测中NPEV型别分布的比较 | 第47-48页 |
·2010年临沂市环境监测与病例监测中NPEV型别分布的比较 | 第47页 |
·环境监测和AFP监测中NPEV型别分布的比较 | 第47-48页 |
4. 环境监测与疾病暴发HEVs优势株的遗传进化分析 | 第48-69页 |
·CVB3遗传进化分析 | 第48-52页 |
·CVB5遗传进化分析 | 第52-56页 |
·Echo6遗传进化分析 | 第56-61页 |
·Echo11遗传进化分析 | 第61-65页 |
·Echo30遗传进化分析 | 第65-69页 |
讨论 | 第69-79页 |
1. 环境监测在维持无脊灰阶段的作用和意义 | 第70-73页 |
2. 环境监测与AFP监测和临床病例中NPEV分布的比较 | 第73-75页 |
3. 环境监测与疾病暴发HEVs优势株的遗传进化特征 | 第75-79页 |
·CVB3的同源性比较和遗传进化分析 | 第76页 |
·CVB5的同源性比较和遗传进化分析 | 第76-77页 |
·Echo6的同源性比较和遗传进化分析 | 第77页 |
·Echo11的同源性比较和遗传进化分析 | 第77-78页 |
·Echo30的同源性比较和遗传进化分析 | 第78-79页 |
本研究主要的创新点和不足 | 第79-80页 |
结论与建议 | 第80-82页 |
参考文献 | 第82-90页 |
致谢 | 第90-91页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第91-92页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第92页 |