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生活污水中人类肠道病毒的浓缩分离及其在环境监测中的应用研究

中文摘要第1-14页
ABSTRACT第14-19页
符号说明第19-21页
前言第21-27页
 1. 研究背景第21-25页
   ·人类肠道病毒(HEVs)概述第21-22页
   ·人类肠道病毒的生物学特性和分子结构第22-23页
   ·生活污水中HEVs的浓缩分离及其应用研究现状第23-25页
 2. 本研究的目的与意义第25-26页
   ·本研究的主要目的第25页
   ·本研究的意义第25-26页
 3. 本研究的技术路线与实施第26-27页
材料与方法第27-39页
 1. 仪器、试剂与耗材第27-30页
   ·生活污水采集与浓缩富集的主要试剂和仪器设备第27页
   ·病例标本采集和处理的主要试剂和仪器设备第27-28页
   ·细胞培养材料和主要仪器设备第28-29页
   ·病毒分离的主要仪器设备第29-30页
   ·核酸提取与基因扩增材料和主要仪器设备第30页
   ·琼脂糖凝胶电泳材料和主要仪器设备第30页
 2. 环境污水标本的采集与浓缩富集第30-33页
   ·选择污水采集地点第30-31页
   ·确定生活污水采集频率和持续时间第31页
   ·生活污水标本的采集、运送与保存第31-32页
   ·阴离子膜-超声振荡法浓缩富集病毒第32-33页
 3. 病例标本的采集与处理第33-34页
   ·选择哨点医院第33页
   ·监测病例定义第33页
   ·病例标本的采集第33-34页
   ·病例标本的处理第34页
 4. 细胞培养方法第34页
 5. 病毒分离第34-35页
 6. 病毒血清学型别鉴定第35页
 7. 核酸提取、基因扩增及序列测定第35-38页
   ·HEVs核糖核酸的提取第35-36页
   ·逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)第36-37页
   ·琼脂糖凝胶电泳分析第37页
   ·HEVs核糖核酸序列测定及提交第37-38页
 8. HEVs血清型分子生物学鉴定第38页
 9. 环境生活污水中HEVs的分子进化研究第38页
 10. 质量控制第38-39页
结果第39-69页
 1. 环境监测中病毒的分离情况第39-41页
 2. 环境监测中PV的分离情况及其变异重组分析第41-47页
   ·环境监测中PV的分离情况第41-43页
   ·环境监测中PV的分布第43-44页
   ·环境监测中分离到的PV变异重组第44-47页
 3. 环境监测与病例监测中NPEV型别分布的比较第47-48页
   ·2010年临沂市环境监测与病例监测中NPEV型别分布的比较第47页
   ·环境监测和AFP监测中NPEV型别分布的比较第47-48页
 4. 环境监测与疾病暴发HEVs优势株的遗传进化分析第48-69页
   ·CVB3遗传进化分析第48-52页
   ·CVB5遗传进化分析第52-56页
   ·Echo6遗传进化分析第56-61页
   ·Echo11遗传进化分析第61-65页
   ·Echo30遗传进化分析第65-69页
讨论第69-79页
 1. 环境监测在维持无脊灰阶段的作用和意义第70-73页
 2. 环境监测与AFP监测和临床病例中NPEV分布的比较第73-75页
 3. 环境监测与疾病暴发HEVs优势株的遗传进化特征第75-79页
   ·CVB3的同源性比较和遗传进化分析第76页
   ·CVB5的同源性比较和遗传进化分析第76-77页
   ·Echo6的同源性比较和遗传进化分析第77页
   ·Echo11的同源性比较和遗传进化分析第77-78页
   ·Echo30的同源性比较和遗传进化分析第78-79页
本研究主要的创新点和不足第79-80页
结论与建议第80-82页
参考文献第82-90页
致谢第90-91页
攻读硕士期间发表的论文第91-92页
学位论文评阅及答辩情况表第92页

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