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动物组织中微量糖链结构分析方法的建立及应用

摘要第1-7页
Abstract第7-16页
前言第16-44页
 1 糖脂的种类及生物学作用第16-20页
   ·中性糖脂第17页
   ·酸性糖脂第17-18页
   ·鞘糖脂的生物学作用第18-20页
     ·细胞粘附及识别功能第19页
     ·信号转导功能第19-20页
     ·肿瘤治疗第20页
 2 糖胺聚糖的种类及生物学作用第20-25页
   ·透明质酸第21页
   ·硫酸角质素第21页
   ·硫酸软骨素和硫酸皮肤素第21-22页
   ·肝素和硫酸乙酰肝素第22页
   ·糖胺聚糖的生物学作用第22-25页
 3 糖蛋白 N,O-糖链的结构分类及生物学作用第25-27页
   ·N-糖链第25页
   ·O-糖链第25页
   ·N,O-糖链的生物学作用第25-27页
     ·糖链对蛋白空间结构形成和稳定的影响第26页
     ·糖链在糖蛋白免疫反应中的作用第26页
     ·糖链对生殖的影响第26-27页
 4 糖链的结构分析方法研究进展第27-31页
   ·特殊糖苷酶酶解技术第27页
   ·糖链衍生化技术第27-28页
     ·还原胺化第27-28页
     ·甲基化第28页
   ·层析技术第28-29页
   ·电泳技术第29-30页
   ·核磁共振波谱技术第30页
   ·质谱技术第30页
   ·糖芯片技术第30-31页
 5 不同结构糖链与相关疾病的关系第31-34页
   ·神经节苷脂与流感病毒的关系第31-32页
   ·糖胺聚糖与 2 型糖尿病的关系第32-33页
   ·N,O-糖链与肿瘤的关系第33-34页
 6 课题目的意义和整体思路第34-36页
 参考文献第36-44页
第一章 动物组织中神经节苷脂结构分析及与甲型流感病毒神经氨酸酶作用研究第44-67页
 1 引言第44-45页
 2 实验部分第45-49页
   ·材料与仪器第45-47页
     ·材料第45-46页
     ·仪器第46-47页
   ·糖脂的提取第47页
   ·糖脂的分离纯化第47页
     ·Folch 分离法第47页
     ·显色检测第47页
   ·糖脂定量第47-48页
   ·高效薄层色谱分析第48页
   ·质谱分析第48页
   ·糖脂与甲型流感病毒结合实验第48-49页
 3 结果与讨论第49-63页
   ·提取结果第49-50页
   ·神经节苷脂含量结果第50-51页
   ·分离纯化结果第51-54页
   ·质谱分析结果第54-56页
   ·与甲型流感病毒结合实验结果第56-63页
 4 小结第63-64页
 参考文献第64-67页
第二章 动物组织中糖胺聚糖和 N-糖链分离纯化方法研究第67-83页
 1 引言第67-68页
 2 实验部分第68-71页
   ·材料与仪器第68-69页
     ·材料第68页
     ·仪器第68-69页
   ·一步酶解法提取糖胺聚糖第69页
   ·分步法提取糖胺聚糖和 N-糖链第69-70页
     ·还原羧甲基化第69页
     ·两步酶解第69页
     ·HLB 柱分离第69-70页
   ·糖胺聚糖含量测定第70页
   ·糖胺聚糖组成分析第70页
     ·聚丙烯酰胺电泳分析第70页
     ·醋酸纤维素薄膜电泳分析第70页
   ·N-糖链的释放与分离第70-71页
   ·N-糖链全甲基化衍生第71页
   ·N-糖链质谱分析第71页
 3 结果与讨论第71-81页
   ·糖胺聚糖提取方法比较第71-72页
     ·一步酶解法释放 GAGs第71-72页
     ·分步法提取 GAGs 和 N-糖链第72页
   ·GAGs 含量测定结果第72-73页
   ·GAGs 组成分析第73-74页
   ·N-糖链分离纯化结果第74-75页
   ·N-糖链质谱分析结果第75-81页
 4 小结第81-82页
 参考文献第82-83页
第三章 人宫颈癌细胞膜糖蛋白 N-糖链结构轮廓分析第83-95页
 1 引言第83页
 2 实验部分第83-85页
   ·材料与仪器第83-84页
   ·实验过程第84-85页
     ·细胞中总糖肽的提取第84-85页
     ·糖肽中 N-糖链释放与分离第85页
     ·N-糖链全甲基化与纯化第85页
     ·糖链质谱分析第85页
 3 结果与讨论第85-92页
   ·HeLa 细胞 N-糖链释放、分离与纯化第85-86页
   ·HeLa 细胞 N-糖链质谱分析第86-92页
 4 小结第92-93页
 参考文献第93-95页
第四章 糖胺聚糖精细结构分析方法研究第95-115页
 1 引言第95页
 2 实验部分第95-99页
   ·材料与仪器第95-96页
     ·材料第95-96页
     ·仪器第96页
   ·肝素酶Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ酶活比较第96-97页
   ·软骨素酶酶活比较第97-98页
   ·离子柱 (SAX) 高效液相分析糖胺聚糖二糖组成第98-99页
   ·荧光标记高效液相分析糖胺聚糖二糖组成第99页
     ·二糖荧光标记第99页
     ·二糖液相分析第99页
   ·鲨鱼软骨来源软骨素 C 二糖组成分析第99页
 3 结果与讨论第99-113页
   ·肝素酶酶活比较结果第99-101页
   ·软骨素酶活测定结果第101-105页
   ·离子柱高效液相分析糖胺聚糖二糖组成结果第105-107页
   ·荧光标记高效液相分析糖胺聚糖二糖组成结果第107-109页
   ·鲨鱼软骨来源软骨素二糖组成分析第109-113页
 4 小结第113-114页
 参考文献第114-115页
第五章 糖尿病肾病小鼠肾脏糖胺聚糖结构差异性比较研究第115-145页
 1 引言第115-116页
 2 实验部分第116-119页
   ·材料与仪器第116-117页
     ·材料第116页
     ·仪器第116-117页
   ·糖醛酸含量测定第117页
   ·分子量分布第117页
   ·糖胺聚糖组成分析第117-118页
   ·二糖分析第118页
   ·与 CTGF 结合实验第118-119页
     ·一步法制备糖胺聚糖 AF488 荧光标记物第118页
     ·荧光标记多糖的纯化与标记率分析第118页
     ·多糖自动点样第118页
     ·结合实验第118-119页
 3 结果与讨论第119-142页
   ·基本组成分析第119-121页
   ·二糖组成分析结果第121-127页
   ·与 CTGF 结合实验结果第127-142页
     ·一步法制备糖胺聚糖 AF 标记物第127页
     ·荧光标记多糖的纯化与标记率分析第127-140页
     ·结合实验结果第140-142页
 4 小结第142-143页
 参考文献第143-145页
结论第145-148页
创新点第148-149页
发表文章第149-152页
参与课题第152页
获奖情况第152-153页
致谢第153页

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