高产琼胶酶菌株的筛选、发酵条件优化及琼胶酶酶学性质的研究
| 摘 要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-24页 |
| 1. 立题的背景及意义 | 第12页 |
| 2. 琼胶的来源和结构 | 第12-14页 |
| 3. 琼胶糖和琼胶寡糖的功能研究进展 | 第14页 |
| 4. 琼胶酶的研究进展 | 第14-22页 |
| ·琼胶酶的来源 | 第14-15页 |
| ·琼胶酶的分类与作用机制 | 第15-16页 |
| ·琼胶酶活力的测定方法 | 第16页 |
| ·琼胶酶的生物学性质及酶系 | 第16-21页 |
| ·琼胶酶基因的克隆与测序 | 第21页 |
| ·琼胶酶生物学效应的研究进展 | 第21-22页 |
| 5. 展望 | 第22-24页 |
| 第二章 琼胶酶产生菌株的分离、筛选与鉴定 | 第24-37页 |
| 1. 实验试剂与仪器设备 | 第24-25页 |
| 2. 材料与方法 | 第25-28页 |
| ·培养基的组成 | 第25页 |
| ·菌株的筛选 | 第25页 |
| ·初筛和复筛 | 第25-26页 |
| ·琼胶酶活力测定 | 第26-27页 |
| ·琼胶降解菌株 F-6 的分类鉴定 | 第27-28页 |
| 3. 实验结果 | 第28-35页 |
| ·初筛和复筛 | 第28-30页 |
| ·菌株 F-6 分类鉴定 | 第30-35页 |
| 4. 小结 | 第35-37页 |
| 第三章 产琼胶酶菌株 F-6 发酵条件的优化 | 第37-46页 |
| 1. 实验材料与仪器设备 | 第37-38页 |
| 2. 实验方法 | 第38-39页 |
| ·琼胶酶活力的测定 | 第38页 |
| ·菌株产酶条件的研究 | 第38-39页 |
| ·培养基起始pH值对产酶的影响 | 第38页 |
| ·培养温度对产酶的影响 | 第38页 |
| ·装瓶量对产酶的影响 | 第38页 |
| ·摇床转速对产酶的影响 | 第38页 |
| ·NaCl浓度对产酶的影响 | 第38-39页 |
| ·琼胶浓度对产酶的影响 | 第39页 |
| ·酵母粉浓度对产酶的影响 | 第39页 |
| ·氮源及其浓度对产酶的影响 | 第39页 |
| ·培养时间对产酶的影响 | 第39页 |
| ·培养基成分的正交实验 | 第39页 |
| 3. 实验结果 | 第39-45页 |
| ·培养基起始pH值对产酶的影响 | 第39页 |
| ·培养温度对产酶的影响 | 第39-40页 |
| ·装瓶量对产酶的影响 | 第40页 |
| ·摇床转速对产酶的影响 | 第40-41页 |
| ·NaCl对产酶的影响 | 第41页 |
| ·琼胶浓度对产酶的影响 | 第41-42页 |
| ·酵母粉含量对产酶的影响 | 第42页 |
| ·氮源对产酶的影响 | 第42-43页 |
| ·培养时间对产酶的影响 | 第43页 |
| ·正交试验的结果与分析 | 第43-45页 |
| 4. 小结 | 第45-46页 |
| 第四章 酶生物学效应的研究 | 第46-51页 |
| 1. 实验材料与仪器设备 | 第46-47页 |
| 2 实验方法 | 第47-48页 |
| 3. 实验结果 | 第48-50页 |
| 4. 小结 | 第50-51页 |
| 第五章 琼胶酶的分离纯化与性质研究 | 第51-68页 |
| 1. 实验材料与仪器设备 | 第51-53页 |
| 2. 实验方法 | 第53-57页 |
| ·琼胶酶粗酶的制备 | 第53-54页 |
| ·琼胶酶的纯化 | 第54页 |
| ·琼胶酶活力测定 | 第54页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第54-55页 |
| ·蛋白质纯度鉴定及分子量测定 | 第55页 |
| ·琼胶酶理化性质的研究 | 第55-57页 |
| ·温度对酶活性的影响 | 第56页 |
| ·pH 对酶活性的影响 | 第56页 |
| ·金属离子对酶活性的影响 | 第56页 |
| ·底物浓度对酶活性的影响 | 第56-57页 |
| ·NaCl 浓度对酶活性的影响 | 第57页 |
| ·琼胶酶的底物专一性 | 第57页 |
| ·琼胶酶动力学研究 | 第57页 |
| 3. 实验结果 | 第57-66页 |
| ·琼胶酶粗酶的制备 | 第57-58页 |
| ·琼胶酶的纯化 | 第58-60页 |
| ·蛋白质纯度鉴定及分子量测定 | 第60-61页 |
| ·琼胶酶理化性质的研究 | 第61-66页 |
| ·温度对琼胶酶活性的影响 | 第61-63页 |
| ·pH 对酶活性的影响 | 第63-64页 |
| ·金属离子对酶活性的影响 | 第64页 |
| ·底物浓度对酶活性的影响 | 第64页 |
| ·NaCl 浓度对酶活性的影响 | 第64-65页 |
| ·琼胶酶底物专一性 | 第65页 |
| ·琼胶酶动力学研究 | 第65-66页 |
| 4. 小结 | 第66-68页 |
| 第六章 琼胶酶降解琼胶的研究初探 | 第68-77页 |
| 1. 实验材料与仪器设备 | 第68-69页 |
| 2. 实验方法 | 第69-70页 |
| ·酶制备琼胶寡糖工艺 | 第69-70页 |
| ·还原糖浓度测定 | 第69页 |
| ·最适酶解温度的测定 | 第69页 |
| ·最适酶解pH 的测定 | 第69页 |
| ·最适酶解底物浓度的测定 | 第69页 |
| ·最适酶量的测定 | 第69页 |
| ·最适反应时间的测定 | 第69-70页 |
| ·酶解产物分析 | 第70页 |
| ·酶解制备琼胶寡糖 | 第70页 |
| ·HPLC 分析酶解产物 | 第70页 |
| 3. 实验结果 | 第70-73页 |
| ·酶解制备琼胶寡糖工艺 | 第70-73页 |
| ·酶解最适温度 | 第70页 |
| ·酶解的最适pH | 第70-71页 |
| ·最适底物浓度 | 第71-72页 |
| ·最适酶量 | 第72页 |
| ·最适酶解时间 | 第72-73页 |
| ·酶解制备琼胶寡糖 | 第73页 |
| 4. 小结 | 第73-77页 |
| 总结 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
