| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-27页 |
| ·经济海藻裙带菜基础生物学 | 第13-14页 |
| ·植物细胞减数分裂过程及其重要性 | 第14-16页 |
| ·拟南芥与裙带菜的配子发育模式 | 第16-19页 |
| ·植物减数分裂过程中染色体互作的分子调控机制 | 第19-24页 |
| ·植物减数分裂染色体配对与联会的分子基础 | 第19-22页 |
| ·植物减数分裂染色体重组的分子机制 | 第22-24页 |
| ·藻类减数分裂相关基因研究 | 第24页 |
| ·MND1基因及其研究进展 | 第24-26页 |
| ·本实验研究的依据、目的及意义 | 第26-27页 |
| 第二章 裙带菜配子体发育时期上调表达基因消减文库的构建与分析 | 第27-44页 |
| ·材料与方法 | 第27-35页 |
| ·裙带菜配子体的发育诱导与细胞特征观察 | 第27-28页 |
| ·裙带菜配子体的发育诱导 | 第27页 |
| ·配子体发育进程的DAPI染色 | 第27-28页 |
| ·上调表达基因消减文库的构建 | 第28-35页 |
| ·总RNA提取与mRNA分离 | 第28-29页 |
| ·抑制消减杂交反应 | 第29-34页 |
| ·PCR产物纯化 | 第34页 |
| ·连接与转化大肠杆菌感受态细胞 | 第34-35页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第35页 |
| ·测序与序列分析 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-40页 |
| ·裙带菜配子体发育时期的细胞特征及DAPI染色 | 第35-37页 |
| ·消减cDNA文库的构建 | 第37页 |
| ·消减文库基本信息分析 | 第37-40页 |
| ·密码子偏好性分析 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-44页 |
| 第三章 裙带菜UpMND1基因的克隆、鉴定与功能研究 | 第44-92页 |
| ·材料与方法 | 第44-69页 |
| ·裙带菜UpMNP1基因克隆 | 第44-51页 |
| ·裙带菜UpMND1基因3’非翻译区的克隆(3’RACE) | 第44-46页 |
| ·裙带菜UpMND1基因5’非翻译区的克隆(5’RACE) | 第46-48页 |
| ·扩增片段的切胶回收 | 第48-49页 |
| ·回收产物连接 | 第49页 |
| ·感受态细胞转化、菌液PCR检测和测序 | 第49页 |
| ·裙带菜UpMND1基因序列分析 | 第49-50页 |
| ·基于裙带菜UpMND1基因氨基酸序列系统进化树构建 | 第50-51页 |
| ·裙带菜UpMND1基因内含子区域的扩增 | 第51-52页 |
| ·裙带菜配子体DNA提取 | 第51页 |
| ·PCR扩增 | 第51-52页 |
| ·扩增产物回收、序列测定及测序结果分析 | 第52页 |
| ·裙带菜UpMND1基因的表达模式及组织表达特异性 | 第52-54页 |
| ·发育诱导配子体和孢子体材料处理 | 第52页 |
| ·实时荧光定量PCR反应 | 第52-54页 |
| ·实时荧光定量数据处理 | 第54页 |
| ·裙带菜UpMND1基因转化拟南芥研究 | 第54-60页 |
| ·拟南芥Atmnd1突变体分析 | 第54-56页 |
| ·Atmnd1突变体及野生型拟南芥的转化 | 第56-60页 |
| ·拟南芥花粉小孢子母细胞减数分裂时期染色体的DAPI染色 | 第60-61页 |
| ·裙带菜UpMND1基因转化酵母研究 | 第61-69页 |
| ·酵母Scmnd1突变体分析 | 第61-64页 |
| ·酵母Scmnd1突变体转化 | 第64-67页 |
| ·酵母生长曲线的绘制 | 第67页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第67-69页 |
| ·结果与分析 | 第69-89页 |
| ·裙带菜UpMND1基因序列特征 | 第69页 |
| ·裙带菜UpMND1基因编码的蛋白质序列特征 | 第69-74页 |
| ·基于UpMND1基因氨基酸序列的系统进化分析 | 第74页 |
| ·裙带菜UpMND1基因的表达模式及组织表达特异性 | 第74-79页 |
| ·拟南芥Atmnd1基因突变体的表型分析 | 第79-80页 |
| ·裙带菜UpMND1基因转化拟南芥 | 第80-86页 |
| ·植物表达载体构建 | 第80页 |
| ·拟南芥转化及转基因植株筛选 | 第80-84页 |
| ·减数分裂各时期染色体的DAPI染色 | 第84-86页 |
| ·裙带菜UpMND1基因转化酵母 | 第86-89页 |
| ·酵母突变体的检测 | 第86-87页 |
| ·表达载体构建与酵母突变体的转化 | 第87-88页 |
| ·酵母生长曲线绘制及SDS-PAGE电泳 | 第88-89页 |
| ·讨论 | 第89-92页 |
| 第四章 裙带菜UpMND1基因启动子克隆与瞬时表达分析 | 第92-105页 |
| ·材料与方法 | 第92-98页 |
| ·菌株与载体 | 第92页 |
| ·裙带菜配子体DNA提取 | 第92页 |
| ·裙带菜UpMND1基因启动子区域克隆 | 第92-94页 |
| ·PCR扩增 | 第92-94页 |
| ·扩增产物回收、连接、转化、检测和测序 | 第94页 |
| ·裙带菜UpMND1基因启动子顺势作用元件分析 | 第94页 |
| ·裙带菜UpMND1基因启动子5’缺失片段的获得 | 第94-95页 |
| ·5’缺失片段的PCR扩增 | 第94-95页 |
| ·5’缺失片段的回收 | 第95页 |
| ·瞬时表达载体的构建 | 第95-96页 |
| ·酶切 | 第95-96页 |
| ·酶切产物的回收 | 第96页 |
| ·载体连接 | 第96页 |
| ·转化、检测、质粒提取与酶切检测 | 第96页 |
| ·质粒大量制备 | 第96页 |
| ·拟南芥原生质体细胞的制备及转化 | 第96-98页 |
| ·报告基因的检测 | 第98页 |
| ·结果与分析 | 第98-102页 |
| ·裙带菜UpMND1基因启动子克隆 | 第98-99页 |
| ·裙带菜UpMND1基因启动子序列分析 | 第99-101页 |
| ·瞬时表达载体的构建 | 第101页 |
| ·报告基因活性检测 | 第101-102页 |
| ·讨论 | 第102-105页 |
| 第五章 结论与展望 | 第105-106页 |
| 本研究的创新点 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-116页 |
| 发表论文情况 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
