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拟南芥胚胎发育相关基因AtFEM和鼠李糖合成酶基因AtRHM1的功能分析

摘要第1-8页
Abstract第8-15页
第一部分第15-60页
 第一章 绪论第16-29页
   ·胚胎发育过程第16-18页
     ·顶细胞及胚体形成第16-17页
     ·基细胞的发育第17页
     ·植物细胞的命运决定第17-18页
   ·植物胚胎发育过程中的基因表达第18-20页
     ·合子激活的基因表达调控第18页
     ·胚胎发育过程中的基因表达调控第18-20页
   ·胚乳发育第20-23页
     ·胚乳多核体的产生第20-21页
     ·胚乳细胞化第21-23页
   ·胚乳发育过程中的基因表达第23-24页
     ·胚乳发育及胚乳游离核细胞化的分子机制第23-24页
     ·胚乳和胚发育的相互作用第24页
   ·植物泛素介导的蛋白降解和 F-BOX 基因的研究进展第24-27页
     ·泛素和泛素化级联反应第24-25页
     ·植物中F-box 蛋白的研究进展第25-27页
   ·影响胚胎和胚乳发育的基因 ATFEM 的研究意义第27-29页
 第二章 材料与方法第29-44页
   ·实验材料第29-30页
     ·实验样品第29页
     ·菌种第29页
     ·载体第29页
     ·工具酶和修饰酶第29页
     ·分子量标准第29页
     ·测序及引物合成第29页
     ·试剂盒第29页
     ·化学试剂第29-30页
   ·实验方法第30-44页
     ·拟南芥的栽培第30页
     ·简易法提取拟南芥基因组 DNA第30页
     ·拟南芥RNA 提取第30-32页
     ·AtNPC2 基因启动子与GUS 融合载体构建第32-35页
     ·拟南芥转化(Floral Dipping 法)第35-36页
     ·转基因植株的筛选和鉴定第36-37页
     ·扩增T-DNA 侧翼序列第37-38页
     ·AtFEM 基因启动子与GUS 融合载体构建第38-39页
     ·AtFEM 基因互补载体的构建第39-42页
     ·转化子的 GUS 组织化学染色第42-43页
     ·拟南芥有性杂交和正反交第43页
     ·DIC(相差微分干涉)观察拟南芥胚胎第43-44页
 第三章 结果与分析第44-56页
   ·突变体的获得第44-45页
   ·T-DNA 插入位点边界序列扩增及基因型与表现型的连锁分析..第45-46页
     ·T-DNA 插入位点边界序列扩增第45-46页
     ·突变体基因型与表型的连锁分析第46页
   ·ATFEM 突变体中雌配子和雄配子的发育正常第46-47页
   ·ATFEM 蛋白结构和保守区第47-48页
   ·突变体胚胎发育停滞在晚球形期第48-51页
   ·突变体胚乳发育异常第51-53页
   ·ATFEM 基因的表达模式第53-56页
 第四章 讨论第56-58页
 第五章 结论第58-60页
   ·结论第58页
   ·创新点第58-60页
第二部分第60-91页
 第一章 绪论第60-69页
   ·植物细胞壁研究第60-62页
     ·植物细胞壁结构与成分第60-62页
     ·细胞壁的功能第62页
   ·鼠李糖的研究第62-64页
     ·鼠李糖的物理性质第62-63页
     ·鼠李糖的来源第63页
     ·鼠李糖生产的研究现状第63-64页
     ·鼠李糖的作用第64页
   ·鼠李糖合成酶的研究第64-65页
   ·糖信号感应和信号传导第65-66页
     ·糖信号分子第65-66页
     ·糖相关调控元件第66页
   ·RHM1 基因的研究现状及意义第66-69页
 第二章 材料与方法第69-76页
   ·实验材料第69-70页
     ·实验样品第69页
     ·菌种第69页
     ·载体第69页
     ·工具酶和修饰酶第69页
     ·分子量标准第69页
     ·测序及引物合成第69页
     ·试剂盒第69页
     ·化学试剂第69-70页
   ·实验方法第70-76页
     ·拟南芥的栽培第70页
     ·载体构建和植物转化第70-71页
     ·转化子的GUS 染色第71页
     ·转化子β-葡萄糖苷酸酶(GUS)的荧光定量分析第71-73页
     ·GUS 荧光定量第73页
     ·拟南芥胁迫处理第73-74页
     ·荧光显微镜观察亚细胞定位第74页
     ·细胞壁糖含量测定第74页
     ·种子染色第74页
     ·RNA 杂交分析第74-75页
     ·RT-PCR第75页
     ·FT-IR 光谱分析第75-76页
 第三章 结果与分析第76-88页
   ·植物中与ATRHM1 相似的蛋白序列的鉴定第76-77页
   ·ATRHM1 基因表达模式第77-79页
     ·RT-PCR 检测RHM1 基因不同组织器官表达模式第77页
     ·发育不同时期RHM1 基因的表达模式第77页
     ·组织化学染色第77-79页
   ·启动子缺失分析第79-81页
   ·ATRHM1 的表达受糖和伤害诱导第81-82页
   ·ATRHM1 的细胞质定位第82-83页
   ·ATRHM1 过表达改变了细胞壁鼠李糖和鼠李糖苷的含量第83-88页
     ·过表达载体和RNAi 载体的构建第83-84页
     ·过表达和RNAi 转基因植株表型的确定第84-88页
 第四章 讨论第88-90页
 第五章 结论第90-91页
   ·结论第90页
   ·创新点第90-91页
参考文献第91-101页
致谢第101-102页
作者简历第102页

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