| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 引言 | 第13-24页 |
| 1 光受体 | 第13-15页 |
| ·光敏素 | 第13-14页 |
| ·蓝光受体 | 第14-15页 |
| 2 隐花色素的结构特征 | 第15页 |
| 3 隐花色素在植物中存在的普遍性 | 第15-16页 |
| 4 隐花色素基因的主要功能 | 第16-21页 |
| ·隐花色素与植物光形态的建成 | 第16页 |
| ·隐花色素与植物开花 | 第16-18页 |
| ·隐花色素与植物生长 | 第18页 |
| ·隐花色素与生物昼夜节律钟 | 第18-20页 |
| ·隐花色素与信号转导 | 第20-21页 |
| 5 水稻隐花色素基因研究进展 | 第21-22页 |
| 6 本研究的主要内容与意义 | 第22-24页 |
| 第一章 水稻隐花色素基因RNAi及反义RNA表达载体构建 | 第24-72页 |
| ·引言 | 第24页 |
| ·材料与方法 | 第24-34页 |
| ·实验材料 | 第24页 |
| ·主要试剂与酶 | 第24-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| ·PCR引物 | 第25-28页 |
| ·培养基 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-34页 |
| ·RNAi工程载体构建 | 第28-29页 |
| ·RNAi及反义RNA表达载体构建 | 第29-30页 |
| ·拟南芥基因组DNA提取 | 第30-31页 |
| ·水稻叶片总RNA提取 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备与转化 | 第32-33页 |
| ·农杆菌感受态的制备与转化 | 第33页 |
| ·细菌质粒DNA的提取 | 第33-34页 |
| ·DNA与PCR产物的酶切连接及回收 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-68页 |
| ·RNAi工程载体分子鉴定 | 第34-41页 |
| ·中间载体pSC1300的分子鉴定 | 第34-35页 |
| ·工程载体pSC1300-347分子检测 | 第35-41页 |
| ·拟南芥内含子的克隆鉴定 | 第35-36页 |
| ·工程载体pSC1300-347酶切鉴定 | 第36页 |
| ·pSC1300-347载体核心序列测序 | 第36-38页 |
| ·pSC1301-347载体酶切鉴定 | 第38-41页 |
| ·Cryla RNAi表达载体分子鉴定 | 第41-45页 |
| ·Cryla基因片段的克隆与检测 | 第41-43页 |
| ·pSC1301-347-cryla测序 | 第43-45页 |
| ·Cry2 RNAi表达载体分子鉴定 | 第45-48页 |
| ·Cry2基因片段的克隆 | 第45-46页 |
| ·测序分析 | 第46-48页 |
| ·双基因RNAi表达载体分子鉴定 | 第48-55页 |
| ·基因片段的克隆 | 第48-50页 |
| ·pSC1301-347-crylab载体测序 | 第50-55页 |
| ·三个基因RNAi表达载体分子鉴定 | 第55-61页 |
| ·Cry2基因片段的插入鉴定 | 第55页 |
| ·pSC1301-347-crylab2载体左臂插入鉴定 | 第55-57页 |
| ·pSC1301-347-crylab2载体测序 | 第57-61页 |
| ·Cryla反义RNA表达载体分子鉴定 | 第61-64页 |
| ·Cryla反义基因片段的克隆与转化子克隆的鉴定 | 第61-62页 |
| ·pSC1301-347-anticryla载体测序 | 第62-64页 |
| ·Cry2反义RNA表达载体分子鉴定 | 第64-68页 |
| ·Cry2反义基因片段的克隆与鉴定 | 第64-65页 |
| ·转化子克隆的鉴定 | 第65-66页 |
| ·Cry2反义RNA表达载体测序 | 第66-68页 |
| ·讨论 | 第68-71页 |
| ·多个基因片段的连接 | 第68-69页 |
| ·提高DNA片段连接效率 | 第69-70页 |
| ·RNAi载体的测序 | 第70页 |
| ·DNA序列的酶切检测 | 第70-71页 |
| ·DNA连接产物的处理 | 第71页 |
| ·结论 | 第71-72页 |
| 第二章 表达载体的遗传转化 | 第72-87页 |
| ·引言 | 第72页 |
| ·材料与方法 | 第72-77页 |
| ·试验材料 | 第72-73页 |
| ·培养基 | 第73-75页 |
| ·种子处理 | 第75-76页 |
| ·接种与愈伤诱导培养 | 第76页 |
| ·菌液制备 | 第76页 |
| ·农杆菌侵染与共培养 | 第76页 |
| ·抗性愈伤筛选与培养 | 第76-77页 |
| ·分化与生根培养 | 第77页 |
| ·移栽 | 第77页 |
| ·统计方法 | 第77页 |
| ·结果与分析 | 第77-84页 |
| ·愈伤诱导 | 第77-79页 |
| ·抗性愈伤筛选 | 第79-81页 |
| ·分化率统计 | 第81-84页 |
| ·小结与讨论 | 第84-87页 |
| ·胚性愈伤的有效性问题 | 第84-85页 |
| ·胚性愈伤诱导中外植体的选择 | 第85页 |
| ·愈伤诱导过程中须注意的问题 | 第85-86页 |
| ·分化与生根培养过程的简化 | 第86页 |
| ·试验规模设计 | 第86-87页 |
| 第三章 转基因植株分子检测与表型分析 | 第87-100页 |
| ·引言 | 第87页 |
| ·材料与方法 | 第87-90页 |
| ·分化苗的Gus检测 | 第87-88页 |
| ·转基因植株PCR分子检测引物 | 第88-90页 |
| ·转基因植株基因组DNA提取 | 第90页 |
| ·结果与分析 | 第90-97页 |
| ·转基因植株的Gus检测 | 第90-92页 |
| ·转基因植株DNA电泳检测 | 第92页 |
| ·转基因植株PCR分子检测 | 第92-94页 |
| ·转基因植株的表现 | 第94-97页 |
| ·小结与讨论 | 第97-99页 |
| ·RNAi转基因植株T_0代整体表现评述 | 第97-98页 |
| ·cryl基因功能与cryla RNAi转基因植株的表现 | 第98页 |
| ·CDy2基因功能与Cry2 RNAi转基因植株的表现 | 第98-99页 |
| ·cryl与Cry2基因功能的互补性 | 第99页 |
| ·后续工作 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-111页 |
| 附录1 六个表达载体测序峰图 | 第111-116页 |
| 附录2 学习期间主持参与的课题及发表的论文 | 第116-117页 |
| 附录3 部分缩写词注释 | 第117-118页 |
| 致谢 | 第118页 |
