摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第一章 引言 | 第11-23页 |
·鸡白细胞介素2(ChIL-2)研究概况 | 第11-17页 |
·ChIL-2 研究进展 | 第11页 |
·ChIL-2 的发现及纯化 | 第11-12页 |
·ChIL-2 的分子克隆和结构 | 第12-13页 |
·ChIL-2 活性检测 | 第13-14页 |
·ChIL-2 的表达 | 第14-15页 |
·ChIL-2 的应用 | 第15-17页 |
·研究目的与意义 | 第17页 |
·研究内容与技术路线 | 第17-18页 |
·研究内容 | 第17-18页 |
·技术路线 | 第18页 |
参考文献 | 第18-23页 |
第二章 ChIL-2 基因真核表达载体的构建和高抗性重组菌株的筛选及鉴定 | 第23-40页 |
·实验材料 | 第24-25页 |
·菌株与质粒 | 第24页 |
·试剂 | 第24页 |
·溶液 | 第24-25页 |
·实验仪器 | 第25页 |
·方法 | 第25-31页 |
·获取目的DNA 片段 | 第25-27页 |
·pPIC9K 质粒的小量抽提 | 第27页 |
·双酶切目的 DNA 片段及pPIC9K 质粒 | 第27-28页 |
·连接 | 第28-29页 |
·转化 | 第29页 |
·重组质粒的抽提及鉴定 | 第29-30页 |
·重组酵母的筛选及鉴定 | 第30-31页 |
·结果 | 第31-35页 |
·目的基因的扩增及重组载体的构建 | 第31-32页 |
·酶切鉴定重组质粒pPIC9K/ChIL-2 | 第32-34页 |
·电转化毕赤酵母 | 第34页 |
·高拷贝重组菌株的筛选 | 第34-35页 |
·讨论 | 第35-37页 |
·ChIL-2 基因的克隆 | 第35页 |
·外源蛋白在毕赤酵母中的表达机理 | 第35页 |
·毕赤酵母的高效表达 | 第35-37页 |
参考文献 | 第37-40页 |
第三章 ChIL-2 在毕赤酵母中的表达、发酵及纯化 | 第40-55页 |
·材料 | 第40-43页 |
·试剂 | 第40页 |
·实验溶液 | 第40-43页 |
·仪器 | 第43页 |
·方法 | 第43-47页 |
·重组酵母菌株生长曲线的测定 | 第43页 |
·重组酵母菌株的诱导表达 | 第43-44页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第44-45页 |
·表达上清的浓缩及Western blot 鉴定 | 第45-46页 |
·ChIL-2 在毕赤酵母中的发酵与纯化 | 第46-47页 |
·结果 | 第47-51页 |
·重组毕赤酵母摇瓶培养的生长曲线 | 第47-48页 |
·ChIL-2 的摇瓶表达及鉴定 | 第48-49页 |
·ChIL-2 的发酵生产 | 第49页 |
·ChIL-2 的纯化 | 第49-51页 |
·讨论 | 第51-53页 |
·重组表达ChIL-2 分子量大小的讨论 | 第51页 |
·发酵生产 | 第51-53页 |
·纯化 | 第53页 |
参考文献 | 第53-55页 |
第四章 表达蛋白的生物活性检测 | 第55-67页 |
·材料 | 第55-56页 |
·实验动物 | 第55页 |
·试剂 | 第55页 |
·实验溶液 | 第55-56页 |
·仪器 | 第56页 |
·方法 | 第56-59页 |
·急性毒性实验研究 | 第56页 |
·ChIL-2 对禽流感疫苗H5N1 亚型Re-1 株灭活苗的免疫增强效果研究 | 第56-58页 |
·ChIL-2 对新城疫灭活苗的免疫增强效果研究 | 第58-59页 |
·结果 | 第59-64页 |
·对小鼠的安全性 | 第59页 |
·ChIL-2 对禽流感疫苗H5N1 亚型Re-1 株灭活苗的免疫增强效果研究 | 第59-62页 |
·ChIL-2 对新城疫灭活苗的免疫增强效果研究 | 第62-64页 |
·讨论 | 第64-66页 |
·血凝抑制试验 | 第64-65页 |
·ChIL-2 的免疫增强效果 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-67页 |
第五章 结论与展望 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
在学期间发表的学术论文 | 第69页 |