Gtl2基因在体细胞核移植牛中的印记状态研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-23页 |
| ·基因组印记简介 | 第10-13页 |
| ·什么是基因组印记 | 第10-11页 |
| ·基因组印记的可能机制 | 第11-13页 |
| ·基因组印记的研究意义 | 第13-15页 |
| ·基因组印记与疾病 | 第13-14页 |
| ·基因组印记与体细胞核移植 | 第14-15页 |
| ·国内外研究现状及分析 | 第15-17页 |
| ·Gtl2基因的特点及生物学意义 | 第15-16页 |
| ·体细胞核移植技术研究进展 | 第16-17页 |
| ·主要研究方法 | 第17-23页 |
| ·PCR-SSCP方法的原理 | 第18-19页 |
| ·PCR-SSCP方法的基本过程和特点 | 第19-21页 |
| ·SSCP技术的影响因素及注意事项 | 第21-22页 |
| ·SSCP技术的应用 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-34页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·实验动物 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·缓冲液与常用试剂配置 | 第23-24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·牛组织基因组DNA的提取 | 第25-26页 |
| ·酚仿抽提法提取牛组织基因组DNA | 第25页 |
| ·基因组DNA的电泳检测 | 第25-26页 |
| ·Gtl2基因的扩增 | 第26-27页 |
| ·引物设计与合成 | 第26页 |
| ·PCR反应体系 | 第26页 |
| ·PCR参数设置 | 第26-27页 |
| ·PCR产物的电泳检测 | 第27页 |
| ·PCR-SSCP方法寻找SNP | 第27-28页 |
| ·PAGE胶的配方 | 第27页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第27页 |
| ·银染显色 | 第27-28页 |
| ·DNA测序验证杂合子 | 第28-30页 |
| ·DNA片段的纯化 | 第28-29页 |
| ·DNA片段与载体的连接 | 第29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·转化大肠杆菌 | 第29-30页 |
| ·插入片段的PCR检测 | 第30页 |
| ·碱裂解法提取质粒 | 第30页 |
| ·RNA的提取和纯化 | 第30-33页 |
| ·RNA的提取 | 第30-31页 |
| ·RNA的纯化 | 第31页 |
| ·RNA的完整性检测 | 第31-32页 |
| ·cDNA的合成 | 第32页 |
| ·RNA的纯度检测 | 第32-33页 |
| ·PCR-SSCP方法分析Gtl2基因的表达 | 第33-34页 |
| ·cDNA的PCR扩增 | 第33页 |
| ·SSCP方法分析Gtl2基因的表达 | 第33页 |
| ·测序验证Gtl2基因表达 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-41页 |
| ·杂合子的鉴定 | 第34-37页 |
| ·牛组织基因组DNA提取结果 | 第34页 |
| ·PCR扩增结果 | 第34-35页 |
| ·多态性检测 | 第35-36页 |
| ·插入片段的PCR检测结果 | 第36页 |
| ·序列分析 | 第36-37页 |
| ·Gtl2基因的表达分析 | 第37-41页 |
| ·总RNA的提取和纯化 | 第37-38页 |
| ·PCR方法检测RNA纯化结果 | 第38页 |
| ·RT-PCR-SSCP分析Gtl2基因表达 | 第38-39页 |
| ·RT-PCR产物测序 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| ·Gtl2基因的序列分析 | 第43页 |
| ·Gtl2基因在牛中的印记状态分析 | 第43页 |
| ·Gtl2基因在SCNT牛中的印记状态分析 | 第43页 |
| ·Gtl2基因印记状态分析的意义及进一步研究内容 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 在读期间发表论文 | 第49-50页 |
| 作者简历 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
