| 缩写 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一部分:前言 | 第10-27页 |
| 一、细胞分裂素和生长素的研究进展 | 第10-14页 |
| 1.细胞分裂素的研究进展 | 第10-12页 |
| 2.生长素的研究进展 | 第12-13页 |
| 3.生长素与细胞分裂素的相互作用 | 第13页 |
| 4.生长素和细胞分裂素共同调控细胞周期 | 第13-14页 |
| 二、Alliinase(蒜氨酸酶)的研究进展 | 第14-19页 |
| 1.结构 | 第14-16页 |
| 2.动力学特性 | 第16页 |
| 3.蒜氨酸酶的作用 | 第16-18页 |
| 4.拟南芥中的同源基因和研究现状 | 第18-19页 |
| 三、植物根系向地性的研究 | 第19-26页 |
| 1.重力感受 | 第19页 |
| 2.重力信号的转导 | 第19-20页 |
| 3.生长素极性运输、不对称分布 | 第20-23页 |
| 4.根的弯曲生长及生长素诱导向地反应的可能机理 | 第23-24页 |
| 5.其它种类激素在向地性反应中的作用 | 第24-26页 |
| 四、本论文研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 第二部分:材料方法 | 第27-36页 |
| 一、TDZ对拟南芥的生理效应 | 第27页 |
| 1.材料 | 第27页 |
| 2.培养基和培养条件 | 第27页 |
| 3.组织培养 | 第27页 |
| 4.TDZ对拟南芥根、根毛和下胚轴的影响 | 第27页 |
| 5.TDZ处理对叶绿素含量的影响 | 第27页 |
| 二、突变体筛选 | 第27-28页 |
| 三、基因克隆及插入位点边界确定 | 第28-29页 |
| 四、突变体的回交实验及遗传分析 | 第29-30页 |
| 1.亲本的选择 | 第29页 |
| 2.拟南芥花的选择 | 第29页 |
| 3.杂交步骤 | 第29页 |
| 4.杂交后代的筛选 | 第29-30页 |
| 5.PCR鉴定杂交后代的纯杂合情况 | 第30页 |
| 五、ckrc1的表型分析 | 第30-32页 |
| 1.在含TDZ的MS培养基上根的生长 | 第30页 |
| 2.在不同激素的培养基上根生长的抑制 | 第30页 |
| 3.从MS基本培养基上转移到不同激素培养基上根的表型分析 | 第30页 |
| 4.向地性分析 | 第30页 |
| 5.花序茎背地性实验 | 第30-31页 |
| 6.根尖生长素向基运输分析 | 第31页 |
| 7.根和下胚轴的生长参数 | 第31页 |
| 8.内源IAA含量的测定 | 第31页 |
| 9.在生长素极性运输抑制剂上的反应 | 第31页 |
| 10.生长过程中整株表型 | 第31页 |
| 11.组织培养 | 第31页 |
| 12.ckrcl与DR5∷GUS杂交,分析在ckrcl背景下生长素含量变化 | 第31页 |
| 13.其它表型 | 第31-32页 |
| 六、等位突变体ckrc2与ckrc3表型分析 | 第32-33页 |
| 1.ckrc2与ckrc3纯杂合体的鉴定 | 第32页 |
| 2.从MS基本培养基上转移到含ZT的培养基上根的表型分析 | 第32页 |
| 3.ckrc1分别与等位突变体ckrc2、ckrc3杂交,观察F_1的表型 | 第32-33页 |
| 4.ckrc2与ckrc3的向地性分析 | 第33页 |
| 七、分子互补、超表达及突变基因启动子的克隆及拟南芥的转化 | 第33页 |
| 1.全长基因克隆及载体构建 | 第33页 |
| 2.启动子克隆及载体构建 | 第33页 |
| 3.全长cDNA克隆及载体构建 | 第33页 |
| 4.拟南芥的转化 | 第33页 |
| 八、半定量法测定CKRC在不同器官的表达 | 第33-34页 |
| 1.总RNA的提取 | 第33页 |
| 2.RT-PCR反应体系 | 第33-34页 |
| 九、生长素和细胞分裂素调节基因的表达 | 第34-36页 |
| 1.经IAA处理后,IAA1和IAA2表达量的变化 | 第34页 |
| 2.ZT处理后,ARR5和ARR15表达量的变化 | 第34-36页 |
| 第三部分:结果 | 第36-55页 |
| 一、细胞分裂素对拟南芥的生理效应 | 第36-40页 |
| 1.组织培养 | 第36-37页 |
| 2.TDZ对根、根毛和下胚轴的影响 | 第37-39页 |
| 3.TDZ对叶绿素含量的影响 | 第39-40页 |
| 二、突变体的筛选 | 第40页 |
| 三、基因克隆 | 第40-43页 |
| 1.插入位点侧翼序列的克隆 | 第40-41页 |
| 2.插入位点边界特性的确定 | 第41-42页 |
| 3.克隆基因的生物信息学分析 | 第42-43页 |
| 四、突变体的回交实验及遗传分析 | 第43页 |
| 五、ckrc1的表型分析 | 第43-49页 |
| 1.在含TDZ的MS培养基上根的生长 | 第43-44页 |
| 2.在不同激素的培养基上根生长的抑制 | 第44页 |
| 3.从MS培养基上转移到含不同激素培养基上根的表型分析 | 第44-45页 |
| 4.向地性分析 | 第45页 |
| 5.花序茎背地性实验 | 第45-46页 |
| 6.根尖生长素向基运输分析 | 第46页 |
| 7.根和下胚轴的生长参数 | 第46-47页 |
| 8.内源IAA含量的测定 | 第47页 |
| 9.在生长素极性运输抑制剂上的反应 | 第47页 |
| 10.生长过程中整株表型 | 第47页 |
| 11.ckrc1组织培养 | 第47-48页 |
| 12.在ckrc1与DR5∷GUS杂交的F3代双纯合体中Gus染色 | 第48-49页 |
| 13.其他表型 | 第49页 |
| 六、等位突变体表型分析 | 第49-51页 |
| 1.从MS基本培养基上转移到含ZT的培养基上根的表型分析 | 第50页 |
| 2.ckrc1分别与等位突变体ckrc2、ckrc3杂交,F_1的表型分析 | 第50页 |
| 3.ckrc2与ckrc3的向地性分析 | 第50-51页 |
| 七、分子互补、超量表达及启动子的克隆 | 第51-52页 |
| 1.全长基因克隆及载体构建 | 第51-52页 |
| 2.启动子克隆及载体构建 | 第52页 |
| 3.cDNA克隆及载体构建 | 第52页 |
| 八、半定量法测定CKRC在不同器官的表达 | 第52-53页 |
| 九、激素处理后生长素和细胞分裂素调节基因的表达 | 第53-55页 |
| 1.生长素调节基因的表达 | 第53-54页 |
| 2.ZT处理后,ARR5和ARR15的表达量的变化 | 第54-55页 |
| 第四部分:讨论 | 第55-61页 |
| 1.TDZ诱导拟南芥叶片和下胚轴产生愈伤组织 | 第55页 |
| 2.TDZ能够抑制根的生长,促进根毛发育并延缓衰老 | 第55-56页 |
| 3.ckrc1根对细胞分裂素不敏感,对生长素和TIBA的反应与野生型相同 | 第56页 |
| 4.ckrc1在培养基上的生长与开花时间与野生型有差别 | 第56-57页 |
| 5.ckrc1形成愈伤组织的能力较低 | 第57页 |
| 6.GUS染色显示ckrc1根尖生长素浓度较低 | 第57-58页 |
| 7.ckrc1根的向地性很弱,但花序茎背地性没有改变 | 第58-60页 |
| 8.IAA和ZT诱导的基因表达变化趋势在ckrc1和野生型之间没有差异 | 第60-61页 |
| 第五部分:结论与展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |
| 图版 | 第71-76页 |
| 图版说明 | 第76-79页 |
| 附录 | 第79-117页 |
| 研究生期间发表的论文 | 第117-118页 |
| 致谢 | 第118页 |
