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耐盐橙色粘球菌Myxococcus fulvus HW-1社会行为对海洋生境适应的分子策略

摘要第1-16页
ABSTRACT第16-21页
符号说明及缩写词第21-23页
第一章 文献综述第23-48页
   ·粘细菌的滑行运动第23-35页
     ·黄色粘球菌的双运动系统第23-32页
     ·mgl和frz基因座第32-33页
     ·黄色粘球菌的滑动运动特性第33-35页
   ·粘细菌的子实体发育第35-38页
     ·粘细菌子实体发育的形态生成第35-36页
     ·粘细菌子实体发育过程中的信号第36-38页
   ·海洋粘细菌的研究第38-42页
     ·海洋嗜盐粘细菌第38-39页
     ·海洋耐盐粘细菌第39-42页
   ·mariner转座因子及其应用第42-46页
     ·mariner转座因子概述第42-43页
     ·mariner转座因子的转座机制第43-45页
     ·mariner转座因子的应用第45-46页
   ·本文工作开展的思路及研究内容第46-48页
第二章 耐盐橙色粘球菌M.fulvus HW-1社会运动突变株的筛选及性质分析第48-68页
   ·实验材料第49-52页
     ·菌株及质粒第49页
     ·培养基第49-50页
     ·实验试剂第50页
     ·仪器设备与耗材第50-52页
   ·实验方法第52-55页
     ·质粒pMiniHimar1-lacZ的酶切验证和提取第52页
     ·抗生素卡那霉素抗性分析第52页
     ·转座子突变及社会运动突变株的筛选第52-53页
       ·电转化第52-53页
       ·社会运动突变株的筛选第53页
     ·突变子的保存第53页
     ·X-gal平板显色实验第53-54页
     ·运动能力的分析第54页
     ·子实体形成和粘孢子发育能力的分析第54页
     ·细胞外基质与染料结合能力分析第54页
     ·细胞聚集实验第54-55页
     ·扫描电子显微镜分析细胞外基质第55页
   ·结果与分析第55-66页
     ·M.fulvus HW-1随机突变菌库的建立第55-57页
       ·质粒pMiniHimar1-lacZ的分析验证及大量提取第55-56页
       ·转座子MiniHimar1-lacZ电转化橙色粘球菌HW-1第56-57页
       ·电转化突变子的保存第57页
     ·社会运动突变株的筛选第57-61页
     ·社会运动突变株表型检测及性质分析第61-66页
       ·运动能力的检测第61-63页
       ·子实体和粘孢子发育能力检测第63-64页
       ·细胞外基质的分析第64-66页
   ·本章小结第66-68页
第三章 运动与发育相关基因簇mts的克隆分析及功能验证第68-112页
   ·实验材料第68-71页
     ·菌株及质粒第68-70页
     ·培养基第70页
     ·实验试剂第70-71页
     ·仪器设备与耗材第71页
   ·实验方法第71-87页
     ·粘球菌基因组DNA的提取第71页
     ·突变子HL-1中转座子插入位点的确定第71-72页
     ·Tail-PCR第72-73页
     ·基因簇mts的生物信息学分析第73-74页
     ·质粒载体的构建第74-86页
       ·目的片段的克隆及处理第74-77页
       ·质粒载体的酶切及连接转化第77-78页
       ·质粒构建的流程图第78-86页
     ·黄色粘球菌的电转化及突变株的筛选和纯化第86-87页
       ·黄色粘球菌的电转化第86页
       ·插入失活突变株的筛选和纯化第86页
       ·缺失突变株的筛选和纯化第86-87页
     ·运动能力的检测第87页
     ·子实体形成和粘孢子发育能力的检测第87页
     ·X-gal平板显色实验第87页
   ·结果与分析第87-110页
     ·基因簇mts的克隆与分析第87-94页
     ·M.fulvus HW-1 mtsC基因的缺失第94-95页
     ·M.xanthus DK1622中mts同源基因簇的功能和表达分析第95-110页
       ·mtsC同源基因的插入失活及功能和表达分析第95-101页
       ·mtsC同源基因和mts同源基因簇的缺失突变及功能分析第101-106页
       ·DK1622中其它mts同源基因的缺失突变及功能分析第106-110页
   ·本章小结第110-112页
第四章 MtsB及其同源蛋白的功能机制初探第112-137页
   ·实验材料第112-113页
     ·菌株及质粒第112页
     ·培养基第112页
     ·实验试剂第112-113页
     ·仪器设备与耗材第113页
   ·实验方法第113-125页
     ·质粒载体的构建第113-122页
       ·引物的设计及合成第114-115页
       ·质粒构建的流程图第115-122页
     ·荧光蛋白融合表达菌株的构建第122页
       ·电转化黄色粘球菌第122页
       ·荧光蛋白融合表达菌株的筛选和纯化第122页
     ·荧光的检测第122页
     ·X-gal平板显色实验第122-123页
     ·融合蛋白在大肠杆菌中的异源表达及检测第123页
     ·融合蛋白包涵体的提取和纯化第123-124页
       ·包涵体的提取第123页
       ·融合蛋白的镍柱纯化第123-124页
     ·蛋白浓缩及浓度的检测第124-125页
       ·蛋白的浓缩第124页
       ·蛋白浓度的检测第124-125页
     ·融合蛋白抗体的制备第125页
   ·结果与分析第125-135页
     ·荧光蛋白融合表达对MtsB同源蛋白的细胞定位第125-130页
       ·绿色和红色荧光蛋白的应用第126-128页
       ·双报告系统对荧光融合表达技术的分析第128-130页
     ·MtsB及其同源蛋白的异源表达第130-134页
       ·表达质粒pET-mtsB和pET-1333的构建第130-131页
       ·MtsB和MXAN1333蛋白的异源表达和纯化第131-134页
     ·融合蛋白MtsB和MXAN1333抗体的制备第134-135页
   ·本章小结第135-137页
第五章 M.fulvus HW-1分散生长诱变株的筛选和性质分析第137-150页
   ·实验材料第137-138页
     ·菌株及质粒第137页
     ·培养基第137-138页
     ·实验试剂第138页
     ·仪器设备与耗材第138页
   ·实验方法第138-141页
     ·紫外诱变第138-139页
     ·分散生长能力的检测第139页
     ·普通形态学分析第139-140页
     ·运动能力的检测第140页
     ·耐盐能力分析第140页
     ·电转化第140页
     ·转化突变子假阳性分析第140-141页
   ·结果与分析第141-149页
     ·分散生长突变株的筛选第141-143页
     ·M.fulvus UV684菌株性质分析第143-147页
       ·形态学性质的分析第143-144页
       ·耐盐能力的分析第144-146页
       ·运动能力的分析第146-147页
     ·M.fulvus UV684菌株的遗传操作第147-149页
   ·本章小结第149-150页
总结与展望第150-152页
附录第152-165页
参考文献第165-172页
致谢第172-173页
攻读学位期间发表的学术论文第173-174页
学位论文评阅及答辩情况表第174-175页
附发表文章第175-201页

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