摘要 | 第1-16页 |
ABSTRACT | 第16-21页 |
符号说明及缩写词 | 第21-23页 |
第一章 文献综述 | 第23-48页 |
·粘细菌的滑行运动 | 第23-35页 |
·黄色粘球菌的双运动系统 | 第23-32页 |
·mgl和frz基因座 | 第32-33页 |
·黄色粘球菌的滑动运动特性 | 第33-35页 |
·粘细菌的子实体发育 | 第35-38页 |
·粘细菌子实体发育的形态生成 | 第35-36页 |
·粘细菌子实体发育过程中的信号 | 第36-38页 |
·海洋粘细菌的研究 | 第38-42页 |
·海洋嗜盐粘细菌 | 第38-39页 |
·海洋耐盐粘细菌 | 第39-42页 |
·mariner转座因子及其应用 | 第42-46页 |
·mariner转座因子概述 | 第42-43页 |
·mariner转座因子的转座机制 | 第43-45页 |
·mariner转座因子的应用 | 第45-46页 |
·本文工作开展的思路及研究内容 | 第46-48页 |
第二章 耐盐橙色粘球菌M.fulvus HW-1社会运动突变株的筛选及性质分析 | 第48-68页 |
·实验材料 | 第49-52页 |
·菌株及质粒 | 第49页 |
·培养基 | 第49-50页 |
·实验试剂 | 第50页 |
·仪器设备与耗材 | 第50-52页 |
·实验方法 | 第52-55页 |
·质粒pMiniHimar1-lacZ的酶切验证和提取 | 第52页 |
·抗生素卡那霉素抗性分析 | 第52页 |
·转座子突变及社会运动突变株的筛选 | 第52-53页 |
·电转化 | 第52-53页 |
·社会运动突变株的筛选 | 第53页 |
·突变子的保存 | 第53页 |
·X-gal平板显色实验 | 第53-54页 |
·运动能力的分析 | 第54页 |
·子实体形成和粘孢子发育能力的分析 | 第54页 |
·细胞外基质与染料结合能力分析 | 第54页 |
·细胞聚集实验 | 第54-55页 |
·扫描电子显微镜分析细胞外基质 | 第55页 |
·结果与分析 | 第55-66页 |
·M.fulvus HW-1随机突变菌库的建立 | 第55-57页 |
·质粒pMiniHimar1-lacZ的分析验证及大量提取 | 第55-56页 |
·转座子MiniHimar1-lacZ电转化橙色粘球菌HW-1 | 第56-57页 |
·电转化突变子的保存 | 第57页 |
·社会运动突变株的筛选 | 第57-61页 |
·社会运动突变株表型检测及性质分析 | 第61-66页 |
·运动能力的检测 | 第61-63页 |
·子实体和粘孢子发育能力检测 | 第63-64页 |
·细胞外基质的分析 | 第64-66页 |
·本章小结 | 第66-68页 |
第三章 运动与发育相关基因簇mts的克隆分析及功能验证 | 第68-112页 |
·实验材料 | 第68-71页 |
·菌株及质粒 | 第68-70页 |
·培养基 | 第70页 |
·实验试剂 | 第70-71页 |
·仪器设备与耗材 | 第71页 |
·实验方法 | 第71-87页 |
·粘球菌基因组DNA的提取 | 第71页 |
·突变子HL-1中转座子插入位点的确定 | 第71-72页 |
·Tail-PCR | 第72-73页 |
·基因簇mts的生物信息学分析 | 第73-74页 |
·质粒载体的构建 | 第74-86页 |
·目的片段的克隆及处理 | 第74-77页 |
·质粒载体的酶切及连接转化 | 第77-78页 |
·质粒构建的流程图 | 第78-86页 |
·黄色粘球菌的电转化及突变株的筛选和纯化 | 第86-87页 |
·黄色粘球菌的电转化 | 第86页 |
·插入失活突变株的筛选和纯化 | 第86页 |
·缺失突变株的筛选和纯化 | 第86-87页 |
·运动能力的检测 | 第87页 |
·子实体形成和粘孢子发育能力的检测 | 第87页 |
·X-gal平板显色实验 | 第87页 |
·结果与分析 | 第87-110页 |
·基因簇mts的克隆与分析 | 第87-94页 |
·M.fulvus HW-1 mtsC基因的缺失 | 第94-95页 |
·M.xanthus DK1622中mts同源基因簇的功能和表达分析 | 第95-110页 |
·mtsC同源基因的插入失活及功能和表达分析 | 第95-101页 |
·mtsC同源基因和mts同源基因簇的缺失突变及功能分析 | 第101-106页 |
·DK1622中其它mts同源基因的缺失突变及功能分析 | 第106-110页 |
·本章小结 | 第110-112页 |
第四章 MtsB及其同源蛋白的功能机制初探 | 第112-137页 |
·实验材料 | 第112-113页 |
·菌株及质粒 | 第112页 |
·培养基 | 第112页 |
·实验试剂 | 第112-113页 |
·仪器设备与耗材 | 第113页 |
·实验方法 | 第113-125页 |
·质粒载体的构建 | 第113-122页 |
·引物的设计及合成 | 第114-115页 |
·质粒构建的流程图 | 第115-122页 |
·荧光蛋白融合表达菌株的构建 | 第122页 |
·电转化黄色粘球菌 | 第122页 |
·荧光蛋白融合表达菌株的筛选和纯化 | 第122页 |
·荧光的检测 | 第122页 |
·X-gal平板显色实验 | 第122-123页 |
·融合蛋白在大肠杆菌中的异源表达及检测 | 第123页 |
·融合蛋白包涵体的提取和纯化 | 第123-124页 |
·包涵体的提取 | 第123页 |
·融合蛋白的镍柱纯化 | 第123-124页 |
·蛋白浓缩及浓度的检测 | 第124-125页 |
·蛋白的浓缩 | 第124页 |
·蛋白浓度的检测 | 第124-125页 |
·融合蛋白抗体的制备 | 第125页 |
·结果与分析 | 第125-135页 |
·荧光蛋白融合表达对MtsB同源蛋白的细胞定位 | 第125-130页 |
·绿色和红色荧光蛋白的应用 | 第126-128页 |
·双报告系统对荧光融合表达技术的分析 | 第128-130页 |
·MtsB及其同源蛋白的异源表达 | 第130-134页 |
·表达质粒pET-mtsB和pET-1333的构建 | 第130-131页 |
·MtsB和MXAN1333蛋白的异源表达和纯化 | 第131-134页 |
·融合蛋白MtsB和MXAN1333抗体的制备 | 第134-135页 |
·本章小结 | 第135-137页 |
第五章 M.fulvus HW-1分散生长诱变株的筛选和性质分析 | 第137-150页 |
·实验材料 | 第137-138页 |
·菌株及质粒 | 第137页 |
·培养基 | 第137-138页 |
·实验试剂 | 第138页 |
·仪器设备与耗材 | 第138页 |
·实验方法 | 第138-141页 |
·紫外诱变 | 第138-139页 |
·分散生长能力的检测 | 第139页 |
·普通形态学分析 | 第139-140页 |
·运动能力的检测 | 第140页 |
·耐盐能力分析 | 第140页 |
·电转化 | 第140页 |
·转化突变子假阳性分析 | 第140-141页 |
·结果与分析 | 第141-149页 |
·分散生长突变株的筛选 | 第141-143页 |
·M.fulvus UV684菌株性质分析 | 第143-147页 |
·形态学性质的分析 | 第143-144页 |
·耐盐能力的分析 | 第144-146页 |
·运动能力的分析 | 第146-147页 |
·M.fulvus UV684菌株的遗传操作 | 第147-149页 |
·本章小结 | 第149-150页 |
总结与展望 | 第150-152页 |
附录 | 第152-165页 |
参考文献 | 第165-172页 |
致谢 | 第172-173页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第173-174页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第174-175页 |
附发表文章 | 第175-201页 |