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利用水稻启动子捕获系筛选启动子的研究

摘要第1-9页
Abstract第9-10页
缩写词第10-11页
第一章 文献综述第11-29页
   ·水稻功能基因组学研究第11-14页
     ·水稻功能基因组学研究概况第11-12页
     ·水稻功能基因组的研究方法第12-13页
     ·插入突变技术的发展第13-14页
   ·植物启动子研究进展第14-20页
     ·植物启动子的结构第14-16页
     ·植物启动子的分类第16-20页
   ·启动子的克隆的方法第20-25页
     ·利用启动子探针筛选启动子第21页
     ·PCR法第21页
     ·基因捕获技术第21-23页
     ·启动子捕获技术第23-25页
   ·获得T-DNA或转座子插入侧翼序列的方法第25-27页
     ·反向PCR法第25-26页
     ·TAIL-PCR法第26页
     ·PCR步行法第26-27页
     ·T-linker PCR法第27页
     ·质粒营救法第27页
   ·本课题的研究内容及技术路线第27-29页
第二章 水稻启动子捕获突变体的筛选第29-39页
   ·材料与方法第30-31页
     ·实验材料第30页
     ·实验方法第30-31页
       ·突变体植株的潮霉素筛选第30页
       ·突变体植株的分子检测第30页
       ·突变体植株的GUS活性检测第30-31页
   ·结果与分析第31-37页
     ·突变体植株叶片潮霉素抗性筛选第31-32页
     ·突变体植株PCR检测第32页
     ·突变体植株的GUS活性检测第32-37页
   ·讨论第37-39页
     ·水稻启动子捕获系的构建及其意义第37-38页
     ·启动子捕获中报告基因的应用第38页
     ·启动子捕获的效率第38-39页
第三章 T-DNA插入位点侧翼序列的扩增与分析第39-48页
   ·材料与方法第39-43页
     ·材料第39-40页
     ·方法第40-43页
       ·水稻PCR模板的制备第40页
       ·TAIL-PCR扩增第40-41页
       ·TAIL-PCR扩增产物的回收及测序第41-42页
       ·侧翼序列信息分析第42-43页
   ·结果与分析第43-46页
     ·水稻启动子捕获系的侧翼序列扩增第43-44页
     ·TAIL-PCR扩增产物的测序及序列信息分析第44-46页
   ·讨论第46-48页
第四章 一个水稻茎叶特异性启动子的克隆及功能分析第48-59页
   ·材料与方法第48-52页
     ·材料第48-49页
     ·方法第49-52页
       ·启动 子序列的扩增及测序第49-50页
       ·中间载体的构建第50页
       ·表达载体的构建第50页
       ·胚性愈伤组织的诱导第50页
       ·农杆菌介导转化第50-51页
       ·抗性愈伤组织的诱导第51页
       ·转基因植株的获得第51页
       ·转基因植株的分子检测第51-52页
       ·T_0植株的gus检测第52页
   ·结果与分析第52-58页
     ·P8513启动子序列的扩增、克隆及测序第52页
     ·P8513启动子序列信息分析第52-54页
     ·P8531启动子与gus基因融合表达载体的构建第54-56页
     ·转基因植株获得及分子检测第56页
     ·GUS活性检测第56-58页
   ·讨论第58-59页
参考文献第59-66页
附录Ⅰ 简并引物第66-67页
附录Ⅱ TAIL-PCR反应体系和条件第67-68页
附录Ⅲ 启动子捕获系中表达的植株的染色体中的整合情况第68-73页
附录Ⅳ PlantCare预测启动子P8513的调控元件第73-74页
附录Ⅴ P8513-2启动子测序结果比对第74-80页
附录Ⅵ 载体构建流程图第80-81页
附录Ⅶ 本研究所用基本培养基配方第81-86页
致谢第86-87页

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