摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩写词 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-29页 |
·水稻功能基因组学研究 | 第11-14页 |
·水稻功能基因组学研究概况 | 第11-12页 |
·水稻功能基因组的研究方法 | 第12-13页 |
·插入突变技术的发展 | 第13-14页 |
·植物启动子研究进展 | 第14-20页 |
·植物启动子的结构 | 第14-16页 |
·植物启动子的分类 | 第16-20页 |
·启动子的克隆的方法 | 第20-25页 |
·利用启动子探针筛选启动子 | 第21页 |
·PCR法 | 第21页 |
·基因捕获技术 | 第21-23页 |
·启动子捕获技术 | 第23-25页 |
·获得T-DNA或转座子插入侧翼序列的方法 | 第25-27页 |
·反向PCR法 | 第25-26页 |
·TAIL-PCR法 | 第26页 |
·PCR步行法 | 第26-27页 |
·T-linker PCR法 | 第27页 |
·质粒营救法 | 第27页 |
·本课题的研究内容及技术路线 | 第27-29页 |
第二章 水稻启动子捕获突变体的筛选 | 第29-39页 |
·材料与方法 | 第30-31页 |
·实验材料 | 第30页 |
·实验方法 | 第30-31页 |
·突变体植株的潮霉素筛选 | 第30页 |
·突变体植株的分子检测 | 第30页 |
·突变体植株的GUS活性检测 | 第30-31页 |
·结果与分析 | 第31-37页 |
·突变体植株叶片潮霉素抗性筛选 | 第31-32页 |
·突变体植株PCR检测 | 第32页 |
·突变体植株的GUS活性检测 | 第32-37页 |
·讨论 | 第37-39页 |
·水稻启动子捕获系的构建及其意义 | 第37-38页 |
·启动子捕获中报告基因的应用 | 第38页 |
·启动子捕获的效率 | 第38-39页 |
第三章 T-DNA插入位点侧翼序列的扩增与分析 | 第39-48页 |
·材料与方法 | 第39-43页 |
·材料 | 第39-40页 |
·方法 | 第40-43页 |
·水稻PCR模板的制备 | 第40页 |
·TAIL-PCR扩增 | 第40-41页 |
·TAIL-PCR扩增产物的回收及测序 | 第41-42页 |
·侧翼序列信息分析 | 第42-43页 |
·结果与分析 | 第43-46页 |
·水稻启动子捕获系的侧翼序列扩增 | 第43-44页 |
·TAIL-PCR扩增产物的测序及序列信息分析 | 第44-46页 |
·讨论 | 第46-48页 |
第四章 一个水稻茎叶特异性启动子的克隆及功能分析 | 第48-59页 |
·材料与方法 | 第48-52页 |
·材料 | 第48-49页 |
·方法 | 第49-52页 |
·启动 子序列的扩增及测序 | 第49-50页 |
·中间载体的构建 | 第50页 |
·表达载体的构建 | 第50页 |
·胚性愈伤组织的诱导 | 第50页 |
·农杆菌介导转化 | 第50-51页 |
·抗性愈伤组织的诱导 | 第51页 |
·转基因植株的获得 | 第51页 |
·转基因植株的分子检测 | 第51-52页 |
·T_0植株的gus检测 | 第52页 |
·结果与分析 | 第52-58页 |
·P8513启动子序列的扩增、克隆及测序 | 第52页 |
·P8513启动子序列信息分析 | 第52-54页 |
·P8531启动子与gus基因融合表达载体的构建 | 第54-56页 |
·转基因植株获得及分子检测 | 第56页 |
·GUS活性检测 | 第56-58页 |
·讨论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
附录Ⅰ 简并引物 | 第66-67页 |
附录Ⅱ TAIL-PCR反应体系和条件 | 第67-68页 |
附录Ⅲ 启动子捕获系中表达的植株的染色体中的整合情况 | 第68-73页 |
附录Ⅳ PlantCare预测启动子P8513的调控元件 | 第73-74页 |
附录Ⅴ P8513-2启动子测序结果比对 | 第74-80页 |
附录Ⅵ 载体构建流程图 | 第80-81页 |
附录Ⅶ 本研究所用基本培养基配方 | 第81-86页 |
致谢 | 第86-87页 |