| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-13页 |
| 1 绪论 | 第13-25页 |
| ·引言 | 第13页 |
| ·植物的盐胁迫生理 | 第13-17页 |
| ·盐胁迫对植物的影响 | 第13-15页 |
| ·植物的抗盐机理 | 第15-17页 |
| ·ESTs在植物抗逆相关基因研究中的应用 | 第17-19页 |
| ·ESTs是大规模发现新基因的途径 | 第17-18页 |
| ·ESTs是克隆全长cDNA的简便途径 | 第18页 |
| ·ESTs用于基因差异表达研究 | 第18-19页 |
| ·基因表达谱 | 第19-22页 |
| ·基因表达谱研究方法 | 第19-21页 |
| ·植物抗逆表达谱研究概况 | 第21-22页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| ·本项研究的内容和技术路线 | 第23-25页 |
| 2 刚毛柽柳根部cDNA文库的构建 | 第25-41页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·菌种与载体 | 第25页 |
| ·酶及化学试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-33页 |
| ·柽柳根部总RNA提取 | 第26-27页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第27页 |
| ·cDNA第二链合成 | 第27-28页 |
| ·蛋白酶K消化 | 第28页 |
| ·Sfi Ⅰ消化 | 第28页 |
| ·cDNA片段的分级分离 | 第28-29页 |
| ·载体连接 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的转化 | 第30页 |
| ·插入片段长度检测 | 第30页 |
| ·初始文库滴度测定 | 第30-31页 |
| ·挑取单菌落摇菌 | 第31页 |
| ·菌种保存 | 第31页 |
| ·小量质粒的提取 | 第31-32页 |
| ·测序PCR反应及模板制备 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-37页 |
| ·RNA质量检测 | 第33页 |
| ·ds cDNA的合成及纯化 | 第33-34页 |
| ·ds DNA的酶切及分级分离 | 第34-35页 |
| ·文库滴度测定 | 第35页 |
| ·插入片段的长度检测及文库重组率测定 | 第35-36页 |
| ·大规模质粒的提取 | 第36页 |
| ·大规模序列测定 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| ·本章小结 | 第39-41页 |
| 3 柽柳根部基因表达谱分析 | 第41-65页 |
| ·材料与方法 | 第41-42页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-53页 |
| ·文库的基本特征 | 第42-45页 |
| ·同源序列的物种来源 | 第45页 |
| ·功能分类 | 第45-48页 |
| ·柽柳根部可能的耐盐相关基因及分类 | 第48-53页 |
| ·讨论 | 第53-62页 |
| ·柽柳根部可能的耐盐途径 | 第53-56页 |
| ·通过EST获得的基因表达谱 | 第56-62页 |
| ·本章小结 | 第62-65页 |
| 4 盐胁迫下柽柳POD及水通道蛋白基因家族的表达分析 | 第65-85页 |
| ·材料 | 第65页 |
| ·方法 | 第65-68页 |
| ·刚毛柽柳18S rRNA序列的获得 | 第65-66页 |
| ·目标基因和内参基因的引物设计 | 第66-67页 |
| ·RT-PCR检测 | 第67页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第67-68页 |
| ·数据处理 | 第68页 |
| ·结果与分析 | 第68-82页 |
| ·内参基因18S rRNA片断的获得 | 第68-69页 |
| ·POD基因的生物信息学分析及荧光定量RT-PCR检测 | 第69-78页 |
| ·水通道蛋白基因的生物信息学分析及实时荧光定量RT-PCR检测 | 第78-82页 |
| ·讨论 | 第82-84页 |
| ·本章小结 | 第84-85页 |
| 5 全长基因的获得及生物信息学分析 | 第85-107页 |
| ·材料与方法 | 第85页 |
| ·材料 | 第85页 |
| ·方法 | 第85页 |
| ·结果与分析 | 第85-104页 |
| ·类萌芽素蛋白 | 第86-90页 |
| ·病程相关蛋白 | 第90-94页 |
| ·H~+-ATP合成酶 | 第94-96页 |
| ·液泡膜H~+-ATP合成酶 | 第96-99页 |
| ·木糖葡聚糖型内转运糖基化酶3 | 第99-104页 |
| ·讨论 | 第104-105页 |
| ·本章小结 | 第105-107页 |
| 结论 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-120页 |
| 附录 | 第120-121页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
