| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-26页 |
| ·头孢菌素C 及其产生菌 | 第12-16页 |
| ·头孢菌素概述 | 第12-13页 |
| ·头孢菌素分类 | 第13-15页 |
| ·头孢菌素C 产生菌 | 第15-16页 |
| ·头孢菌素C 生物合成途径 | 第16-18页 |
| ·头孢类抗生素生产现状 | 第18-19页 |
| ·头孢菌素C 发酵工艺及生产现状 | 第19-21页 |
| ·前体L-α-氨基己二酸 | 第19页 |
| ·碳源 | 第19页 |
| ·氮源 | 第19-20页 |
| ·蛋氨酸 | 第20页 |
| ·溶氧水平 | 第20页 |
| ·选择性呼吸途径 | 第20-21页 |
| ·金属离子 | 第21页 |
| ·顶头孢霉的优化选育 | 第21-23页 |
| ·传统诱变育种技术 | 第21-22页 |
| ·原生质体融合技术 | 第22页 |
| ·基因工程技术 | 第22页 |
| ·推理选育技术 | 第22-23页 |
| ·课题的研究内容及意义 | 第23-24页 |
| ·课题研究技术路线 | 第24-26页 |
| 第2章 顶头孢霉菌理化诱变条件优化 | 第26-38页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·菌种 | 第26页 |
| ·培养基及缓冲液 | 第26-27页 |
| ·仪器及试剂 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-30页 |
| ·诱变出发菌株的选择 | 第27-28页 |
| ·紫外诱变处理 | 第28-29页 |
| ·化学诱变条件优化 | 第29页 |
| ·紫外线和亚硝酸复合诱变 | 第29-30页 |
| ·多轮次累积诱变 | 第30页 |
| ·诱变子的生物活性高通量筛选——托盘琼脂柱筛选法 | 第30页 |
| ·实验结果 | 第30-36页 |
| ·出发菌株选择 | 第30-31页 |
| ·紫外诱变致死曲线的绘制 | 第31页 |
| ·亚硝酸诱变结果 | 第31-33页 |
| ·紫外和亚硝酸复合诱变结果 | 第33-34页 |
| ·多轮次的诱变积累 | 第34页 |
| ·诱变子的高通量的筛选 | 第34-36页 |
| ·本章小结 | 第36-38页 |
| 第3章 头孢菌素 C 高产菌株的推理选育 | 第38-54页 |
| ·引言 | 第38-39页 |
| ·实验材料 | 第39-40页 |
| ·菌种 | 第39页 |
| ·培养基及缓冲液 | 第39页 |
| ·仪器及试剂 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-43页 |
| ·铜离子耐受高产菌株的选育 | 第40-41页 |
| ·丙二酸耐受菌株筛选 | 第41-42页 |
| ·产物耐受型高产菌株的选育 | 第42页 |
| ·突变子的生物活性高通量筛选——托盘琼脂柱筛选法 | 第42页 |
| ·HPLC 法验证头孢菌素C 产量 | 第42页 |
| ·高产菌株遗传稳定性实验 | 第42-43页 |
| ·实验结果 | 第43-52页 |
| ·铜离子耐受菌株选育 | 第43-45页 |
| ·丙二酸耐受突变株的筛选 | 第45-47页 |
| ·终产物耐受突变株的筛选 | 第47-49页 |
| ·摇瓶复筛 | 第49-52页 |
| ·本章小结 | 第52-54页 |
| 第4章 顶头孢霉的 Genome shuffling | 第54-68页 |
| ·引言 | 第54页 |
| ·实验材料 | 第54-55页 |
| ·菌种 | 第54页 |
| ·培养基及缓冲液 | 第54页 |
| ·仪器及试剂 | 第54-55页 |
| ·实验方法 | 第55-57页 |
| ·出发菌株的选择 | 第55页 |
| ·原生质体的制备条件优化 | 第55-56页 |
| ·原生质体的再生条件优化 | 第56页 |
| ·原生质体双亲灭活条件优化 | 第56-57页 |
| ·原生质体的融合 | 第57页 |
| ·多轮次Genome shuffling | 第57页 |
| ·融合子的筛选和产量验证 | 第57页 |
| ·实验结果 | 第57-66页 |
| ·原生质体制备菌龄选择结果 | 第57-58页 |
| ·原生质体高渗液选择结果 | 第58页 |
| ·原生质体酶解时间的确定 | 第58-59页 |
| ·原生质体再生培养基的选择 | 第59-60页 |
| ·原生质体灭活条件优化 | 第60-63页 |
| ·原生质体融合结果 | 第63-64页 |
| ·融合子积累筛选和产量验证 | 第64-66页 |
| ·本章小结 | 第66-68页 |
| 第5章 高产菌株 G4-13 发酵特性研究 | 第68-82页 |
| ·引言 | 第68页 |
| ·材料与方法 | 第68页 |
| ·菌株和保存 | 第68页 |
| ·培养基及缓冲液 | 第68页 |
| ·仪器及试剂 | 第68页 |
| ·豆油的利用能力试验 | 第68-70页 |
| ·豆油添加量对头孢菌素C 产量的影响 | 第68-69页 |
| ·豆油添加时间对头孢菌素C 产量的影响 | 第69页 |
| ·豆油作用机理 | 第69-70页 |
| ·发酵周期及发酵环境要求实验 | 第70页 |
| ·接种菌龄与产量的关系 | 第70页 |
| ·发酵周期实验 | 第70页 |
| ·发酵温度实验 | 第70页 |
| ·500L 发酵罐中试生产实验 | 第70页 |
| ·实验结果 | 第70-80页 |
| ·豆油添加量实验结果 | 第70-73页 |
| ·豆油添加时间与头孢菌素C 产量关系 | 第73-74页 |
| ·豆油平板点种实验 | 第74-75页 |
| ·豆油萃取实验 | 第75页 |
| ·豆油柱层析实验 | 第75-76页 |
| ·豆油组分添加实验 | 第76页 |
| ·菌龄接种实验结果 | 第76-77页 |
| ·发酵周期实验结果 | 第77页 |
| ·发酵温度实验结果 | 第77-78页 |
| ·发酵中试生产结果 | 第78-80页 |
| ·本章小结 | 第80-82页 |
| 第6章 全文总结与展望 | 第82-84页 |
| ·全文总结 | 第82-83页 |
| ·问题与展望 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-88页 |
| 致谢 | 第88-90页 |
| 在学期间主要科研成果 | 第90页 |