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纤维堆囊菌合成埃博霉素几个关键问题的研究

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
第1章 文献综述第14-24页
   ·粘细菌简介第14-17页
     ·粘细菌的典型特征及分类学地位第14页
     ·纤维堆囊菌简介第14-16页
     ·纤维堆囊菌的次级代谢产物第16-17页
   ·埃博霉素及其用途第17-19页
     ·埃博霉素简介第17-18页
     ·埃博霉素的研究现状第18-19页
   ·埃博霉素合成途径分析第19-22页
     ·埃博霉素生物合成中底物选择的研究进展第20-22页
   ·本课题开展思路第22-24页
第2章 微包埋培养技术分离纯化单细胞纤维堆囊菌 So0157-2第24-34页
   ·引言第24页
   ·实验材料第24-26页
     ·实验菌株第24页
     ·主要培养基第24-25页
     ·主要实验试剂第25页
     ·仪器与设备第25-26页
   ·实验方法第26-29页
     ·纤维堆囊菌诱变菌株的培养第26-27页
     ·纤维堆囊菌诱变菌株的形态学观察第27页
     ·微包埋培养技术的建立及优化第27-28页
     ·纤维堆囊菌产埃博霉素的培养方法第28页
     ·埃博霉素的检测方法第28-29页
     ·四株诱变菌株埃博霉素产量的比较第29页
     ·包埋培养8#诱变菌株单细胞第29页
     ·高通量筛选方法筛选埃博霉素高产菌株第29页
   ·实验结果及讨论第29-33页
     ·纤维堆囊菌诱变菌株的形态学观察第29-30页
     ·四株诱变菌株埃博霉素产量的比较第30-31页
     ·微包埋培养条件的优化第31-32页
     ·8#诱变菌株的包埋及培养第32-33页
   ·本章小结第33-34页
第3章 树脂对埃博霉素合成调控作用研究第34-44页
   ·引言第34页
   ·实验材料及实验仪器第34-36页
     ·实验菌株第34页
     ·培养基及主要试剂第34-35页
     ·树脂种类及主要仪器设备第35-36页
     ·树脂的预处理第36页
     ·主要仪器设备第36页
   ·试验方法第36-38页
     ·添加单一树脂对埃博霉素发酵产量的调控作用第36-37页
     ·添加复合树脂对埃博霉素产量的调控作用第37页
     ·复合树脂配对条件优化第37页
     ·复合树脂能够提高纤维堆囊菌埃博霉素产量原因初步分析第37-38页
   ·实验结果与讨论第38-41页
     ·单一树脂对埃博霉素发酵产量的影响第38-39页
     ·复合树脂对埃博霉素产量的影响第39-40页
     ·复合树脂配对条件优化结果第40页
     ·复合树脂能够提高纤维堆囊菌埃博霉素产量原因初步分析第40-41页
   ·本章小结第41-44页
第4章 埃博霉素A/B 合成差异分析及突变子的构建第44-68页
   ·引言第44-46页
   ·实验材料与仪器试剂第46-49页
     ·菌株和质粒第46页
     ·培养基第46页
     ·扩增及突变引物第46-47页
     ·主要实验试剂第47-48页
     ·主要仪器设备及耗材第48-49页
   ·实验方法第49-59页
     ·纤维堆囊菌基因组的提取第49页
     ·野生型AT_(modC2) 的巢式PCR 扩增第49-51页
     ·AT_(modC2) 的定点突变第51-59页
   ·实验结果及讨论第59-66页
     ·野生型AT_(modC2) 的巢式PCR 扩增第59-60页
     ·AT_(modC2) 的定点突变第60-63页
     ·pET-226 表达质粒的构建第63-64页
     ·AT_(modC2)的异源表达第64-66页
   ·本章小结第66-68页
第5章 酰基转移酶蛋白的纯化复性及酶活分析第68-80页
   ·引言第68页
   ·试验材料和方法第68-70页
     ·实验材料和试剂第68页
     ·包涵体的洗涤第68-69页
     ·蛋白的Ni 柱纯化第69页
     ·包涵体的透析复性第69-70页
     ·酶活测定第70页
   ·实验结果第70-78页
     ·AT_(modC2) 的纯化第70-75页
     ·AT_(modC2) 蛋白的复性第75-76页
     ·AT_(modC2) 底物选择差异性测定第76-77页
     ·AT_(modC2) 其它位点的突变及对底物选择性的影响第77-78页
   ·本章小结第78-80页
第6章 总结与展望第80-82页
参考文献第82-88页
致谢第88-90页
在学期间主要科研成果第90页

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