中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
第一篇 文献综述 | 第11-33页 |
第一章 应激与热休克蛋白概述 | 第12-33页 |
1 热休克蛋白的概念 | 第14页 |
2 热休克蛋白的分类 | 第14-15页 |
3 热休克蛋白的分布 | 第15页 |
4 热休克蛋白的分子结构特征 | 第15-16页 |
5 热休克蛋白的辅助蛋白 | 第16-17页 |
6 热休克蛋白基因 | 第17页 |
7 热休克基因的调控 | 第17-22页 |
·热休克元件 | 第17-18页 |
·热休克因子 | 第18页 |
·热休克蛋白基因转录调控 | 第18-21页 |
·翻译水平的调控 | 第21-22页 |
8 Hsp70的生物学功能 | 第22-26页 |
·分子伴侣功能 | 第22-23页 |
·使生物获得耐热性 | 第23-24页 |
·调控细胞骨架动力学 | 第24页 |
·抗氧化作用 | 第24页 |
·参与免疫应答 | 第24-25页 |
·调节细胞凋亡 | 第25-26页 |
9 热休克蛋白及其编码基因的进化 | 第26-27页 |
10 Hsp70及其mRNA的检测方法 | 第27-28页 |
·SABC | 第27页 |
·Western-blotting | 第27页 |
·ELISA | 第27-28页 |
·核酸原位杂交技术 | 第28页 |
·定量RT-PCR检测方法 | 第28页 |
·实时荧光定量PCR | 第28页 |
11 热休克蛋白的研究意义 | 第28-33页 |
·热休克蛋白与衰老的研究 | 第28-29页 |
·热休克蛋白与生物进化的研究 | 第29-30页 |
·热休克蛋白与生物标记(biomarker) | 第30-31页 |
·热休克蛋白与肿瘤的治疗 | 第31-33页 |
第二篇 试验研究 | 第33-74页 |
第二章 运输应激对不同品种仔猪血液生化指标的影响 | 第34-40页 |
1 材料和方法 | 第34-36页 |
·试验动物及分组 | 第34页 |
·主要试剂及仪器 | 第34-35页 |
·CK活性测定 | 第35页 |
·AST活性测定 | 第35页 |
·ALT活性测定 | 第35-36页 |
·T3、T4、Insulin以及Cortisol活性测定 | 第36页 |
·统计分析 | 第36页 |
2 结果与讨论 | 第36-40页 |
第三章 不同品种仔猪运输前后的组织损伤、Hsp70以及Hsp70mRNA定位研究 | 第40-51页 |
1 材料和方法 | 第40页 |
·试验动物 | 第40页 |
·主要试剂和仪器 | 第40页 |
·染色方法 | 第40页 |
2 结果和讨论 | 第40-51页 |
·受试猪心肌的应激性损伤、Hsp70及相应Hsp70 mRNA在心肌纤维中的定位 | 第42-45页 |
·受试猪肾脏的应激性损伤、Hsp70及相应Hsp70 mRNA在肾脏中的定位 | 第45-51页 |
第四章 不同品种仔猪运输前后组织中Hsp70 mRNA的定量研究 | 第51-66页 |
1 材料和方法 | 第51-56页 |
·试验动物及试验设计 | 第51页 |
·主要试剂和仪器 | 第51-52页 |
·RNA的提取和纯化 | 第52-53页 |
·引物设计 | 第53页 |
·常规PCR扩增 | 第53-54页 |
·FQ RT-PCR | 第54-56页 |
·统计及分析 | 第56页 |
2 结果 | 第56-63页 |
·总RNA提取结果 | 第56页 |
·RT PCR结果 | 第56-57页 |
·重组质粒的鉴定 | 第57-58页 |
·阳性质粒的PCR鉴定 | 第58页 |
·质粒序列测定 | 第58-59页 |
·荧光定量RT-PCR标准曲线及特异性检测结果 | 第59-62页 |
·运输应激对不同品种仔猪心脏和肾脏Hsp70 mRNA转录水平的影响 | 第62-63页 |
3 讨论 | 第63-66页 |
·FQ RT-PCR定量检测组织中Hsp70 mRNA方法的建立 | 第63-64页 |
·二个品种仔猪心脏和肾脏组织中Hsp70 mRNA定量分析 | 第64-66页 |
第五章 Hsp70在运输应激仔猪组织中的定量研究 | 第66-74页 |
1 材料与方法 | 第66-68页 |
·试验动物及试验设计 | 第66页 |
·主要试剂和仪器 | 第66页 |
·试验方法 | 第66-68页 |
2 结果 | 第68-70页 |
3 讨论 | 第70-74页 |
全文总结 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-84页 |
附录 | 第84-93页 |
致谢 | 第93页 |