| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-21页 |
| 一 洋桔梗及其病害 | 第10-11页 |
| 1 洋桔梗 | 第10页 |
| 2 洋桔梗的病害 | 第10-11页 |
| ·真菌性病害 | 第10-11页 |
| ·细菌性病害 | 第11页 |
| ·病毒性病害 | 第11页 |
| 二 几丁质酶基因在植物抗真菌性病害中的应用 | 第11-14页 |
| 1 几丁质酶及其基因 | 第11-13页 |
| ·几丁质酶及其分类 | 第11-12页 |
| ·几丁质酶基因的结构特点 | 第12-13页 |
| 2 几丁质酶基因在植物抗真菌性病害中的应用 | 第13-14页 |
| 三 洋桔梗的基因工程 | 第14-19页 |
| 1 洋桔梗的离体培养 | 第14-18页 |
| ·品种 | 第14-15页 |
| ·外植体的种类 | 第15页 |
| ·不定芽和体细胞胚的诱导 | 第15-16页 |
| ·影响不定芽分化的主要因素 | 第15-16页 |
| ·体细胞胚的诱导 | 第16页 |
| ·芽苗的增殖 | 第16页 |
| ·再生根的诱导 | 第16-17页 |
| ·植物激素对洋桔梗生根的影响 | 第17页 |
| ·其他因素对洋桔梗生根的影响 | 第17页 |
| ·原生质体的离体再生植株 | 第17-18页 |
| 2 基因转化 | 第18-19页 |
| ·转化的受体材料和方法 | 第18页 |
| ·转化的目的基因及转基因植株的性状 | 第18-19页 |
| ·洋桔梗基因工程中的问题和发展方向 | 第19页 |
| 四 论文的研究目的、内容和创新性 | 第19-21页 |
| 第一章 赤霉素对洋桔梗幼苗生长的影响 | 第21-25页 |
| 1 材料和方法 | 第21-22页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·生化试剂 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-22页 |
| ·种子播种及栽培 | 第21页 |
| ·不同浓度GA_3对洋桔梗苗高、叶长和叶宽的影响 | 第21页 |
| ·试验数据的统计分析 | 第21-22页 |
| 2 结果和分析 | 第22-24页 |
| ·不同浓度GA_3对苗高的影响 | 第22-23页 |
| ·不同浓度GA_3对叶长的影响 | 第23页 |
| ·不同浓度GA_3对叶宽的影响 | 第23-24页 |
| 3 结论 | 第24-25页 |
| 第二章 "Double Mariachi Pink"洋桔梗高频再生系统的建立及其卡那霉素敏感性测定 | 第25-33页 |
| 1 材料与方法 | 第25-27页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·生化试剂 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-27页 |
| ·外植体的消毒 | 第26页 |
| ·叶片的不同切割方式对不定芽再生的影响 | 第26页 |
| ·6-BA和NAA的不同配比对不定芽再生的影响 | 第26页 |
| ·芽苗的增殖及生根 | 第26-27页 |
| ·抑制叶片不定芽再生的卡那霉素(Km)最低浓度的确定 | 第27页 |
| ·试验数据的统计分析 | 第27页 |
| 2 结果和分析 | 第27-31页 |
| ·叶片的不同切割方式对不定芽再生的影响 | 第27-28页 |
| ·6-BA和NAA的不同配比对不定芽再生的影响 | 第28-29页 |
| ·芽苗的增殖及生根 | 第29-30页 |
| ·抑制叶片不定芽再生的Km最低浓度的确定 | 第30-31页 |
| 3 结论和讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 菜豆几丁质酶基因的分离、克隆及植物表达载体的构建 | 第33-52页 |
| 1 材料与方法 | 第33-46页 |
| ·材料 | 第33-35页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·菌株与质粒 | 第33-34页 |
| ·工具酶和生化试剂 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-46页 |
| ·菜豆的萌发 | 第35页 |
| ·引物设计及合成 | 第35页 |
| ·菜豆基因组DNA的提取 | 第35-36页 |
| ·菜豆几丁质酶基因的PCR扩增 | 第36-37页 |
| ·PCR产物的回收及克隆 | 第37-38页 |
| ·PCR产物的回收 | 第37-38页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第38页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备和转化(CaCl_2法) | 第38-39页 |
| ·主要试剂的配制 | 第38页 |
| ·操作步骤 | 第38-39页 |
| ·重组菌落的鉴定 | 第39-41页 |
| ·菌落PCR | 第39页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取和酶切检测 | 第39-41页 |
| ·目的基因的序列测定 | 第41页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第41-44页 |
| ·pUC57-Chi和pBI121质粒的酶切 | 第41-42页 |
| ·目的DNA片段和pBI121质粒大片段的连接 | 第42页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备和转化(电转化法) | 第42-44页 |
| ·重组菌落的鉴定 | 第44页 |
| ·菌落PCR | 第44页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取和酶切检测 | 第44页 |
| ·pBI121-Chi转化农杆菌 | 第44-46页 |
| ·主要试剂的配制 | 第44页 |
| ·农杆菌感受态的制备(电转化法) | 第44-45页 |
| ·电转化 | 第45页 |
| ·重组菌落的鉴定 | 第45-46页 |
| 2 结果和分析 | 第46-51页 |
| ·菜豆基因组DNA的提取 | 第46页 |
| ·菜豆几丁质酶基因的PCR扩增 | 第46-47页 |
| ·菜豆几丁质酶基因的克隆及其鉴定 | 第47-48页 |
| ·菜豆几丁质酶基因序列测定和分析 | 第48-49页 |
| ·植物表达载体的构建及其鉴定 | 第49-50页 |
| ·pBI121-Chi转化农杆菌及其鉴定 | 第50-51页 |
| 3 结论 | 第51-52页 |
| 第四章 菜豆几丁质酶基因转化洋桔梗 | 第52-57页 |
| 1 材料和方法 | 第52-54页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-54页 |
| ·叶片的预培养 | 第52页 |
| ·农杆菌的培养 | 第52-53页 |
| ·叶盘法转化 | 第53页 |
| ·转化体的PCR检测 | 第53-54页 |
| ·洋桔梗基因组DNA的提取 | 第53页 |
| ·引物设计及合成 | 第53页 |
| ·PCR检测 | 第53-54页 |
| 3 结果和分析 | 第54-56页 |
| ·转化体的筛选 | 第54-55页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第55-56页 |
| ·洋桔梗植株基因组DNA的提取 | 第55页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 参考文献: | 第57-63页 |
| 全文结论 | 第63-64页 |
| 附录 | 第64-69页 |
| 附录1 主要缩略词表 | 第64-65页 |
| 附录2 MS培养基配方 | 第65-66页 |
| 附录3 主要试剂的配制方法 | 第66-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
