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盐酸克仑特罗ELISA方法的建立及用噬菌体展示技术筛选其模拟表位

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-6页
目录第6-9页
缩略语(Abbreviations)第9-10页
第1章 引言第10-26页
   ·盐酸克仑特罗ELISA检测方法的研究进展第10-21页
     ·盐酸克仑特罗的研究进展第10-15页
       ·盐酸克仑特罗的化学结构及性质第12-13页
       ·盐酸克仑特罗对人体的危害及中毒表现第13-14页
       ·盐酸克仑特罗的限量标准第14页
       ·盐酸克仑特罗检测技术的发展第14-15页
     ·免疫酶联吸附试验(ELISA)技术的研究进展第15-18页
       ·ELISA的特点第16页
       ·ELISA的分类第16页
       ·ELISA的基本原理第16-17页
       ·ELISA的主要操作步骤第17-18页
     ·人工抗原偶联方法的研究第18-21页
   ·噬菌体肽库展示技术的研究进展第21-25页
     ·噬菌体展示技术的定义第21页
     ·噬菌体肽库的发展第21-23页
     ·噬菌体肽库展示技术的应用第23-25页
       ·噬菌体抗体库的构建第23-24页
       ·抗原表位的分析第24-25页
   ·主要研究内容第25-26页
第2章 盐酸克仑特罗ELISA方法的建立第26-42页
   ·实验材料第26页
   ·仪器和设备第26页
   ·主要溶液的配制第26-27页
   ·实验方法第27-33页
     ·样品预处理第27页
     ·CLB偶联抗原的制备第27-29页
     ·CLB单克隆抗体的纯化第29页
     ·CLB单克隆抗体效价的测定第29-30页
     ·酶标板均一性的测定第30页
     ·ELISA单因素分析第30-33页
   ·结果与讨论第33-40页
     ·CLB偶联抗原偶联比的计算第33页
     ·CLB单克隆抗体效价的计算第33-34页
     ·酶标板均一性的评价第34页
     ·最佳抗原包被浓度和最佳单抗稀释倍数的确定第34-35页
     ·最佳酶标二抗稀释倍数的确定第35-36页
     ·洗涤液(PBST)中最佳Tween-20浓度的确定第36-37页
     ·封闭液最佳条件的确定第37页
     ·盐酸克仑特罗间接竞争ELISA方法的最佳操作条件第37-38页
     ·盐酸克仑特罗间接竞争ELISA方法的性能评价第38-40页
   ·小结第40-42页
第3章 噬菌体展示技术筛选盐酸克仑特罗的模拟表位第42-58页
   ·实验材料第42页
   ·仪器和设备第42-43页
   ·主要溶液的配制第43-45页
   ·实验方法第45-51页
     ·ER2738菌株的保藏与活化第45页
     ·噬菌体的第一轮亲和淘选第45页
     ·第一轮淘选噬菌体的扩增和纯化第45-46页
     ·洗脱物和扩增产物的滴度测定第46页
     ·噬菌体的第三轮淘选第46-47页
     ·噬菌体的第三轮淘选第47页
     ·噬菌体的第四轮淘选第47页
     ·噬菌斑的扩增和纯化第47-48页
     ·噬菌体滴度测定第48-49页
     ·CLB模拟表位的鉴定第49-50页
     ·阳性噬菌体克隆DNA的提取第50页
     ·琼脂糖凝胶电泳鉴定噬菌体DNA第50页
     ·以CLB模拟表位建立竞争ELISA标准曲线第50-51页
     ·样品加标回收实验第51页
   ·实验结果第51-55页
     ·噬菌体富集效果第51页
     ·间接非竞争ELISA鉴定阳性噬菌体克隆第51-52页
     ·间接竞争ELISA筛选CLB模拟表位第52-53页
     ·阳性克隆噬菌体基因组DNA电泳及DNA核心序列分析第53-54页
     ·以CLB模拟表位建立间接竞争ELISA标准曲线第54页
     ·样品加标回收结果第54-55页
   ·影响因素分析第55-57页
     ·去污剂的浓度第55页
     ·靶分子抗体的浓度第55-56页
     ·温育结合温度第56页
     ·结合和洗脱时间以及淘选轮数第56-57页
     ·噬菌体文库的选择第57页
   ·小结第57-58页
第4章 结论与展望第58-59页
   ·结论第58页
   ·研究与展望第58-59页
致谢第59-60页
参考文献第60-65页
攻读学位期间的研究成果第65页

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