| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-49页 |
| ·胸腺素α1（Tα1）研究进展 | 第15-20页 |
| ·胸腺素α1 研究概述 | 第15页 |
| ·胸腺素α1 的结构及理化特点 | 第15-16页 |
| ·胸腺素α1 的分布 | 第16页 |
| ·胸腺素α1 的受体[2] | 第16-17页 |
| ·胸腺素α1 的作用机制 | 第17-18页 |
| ·Tα1 的临床应用 | 第18-20页 |
| ·利用植物生物反应器生产药用蛋白研究进展 | 第20-41页 |
| ·植物生物反应器概述 | 第20-21页 |
| ·传统生物反应器及其缺陷 | 第21页 |
| ·植物生物反应器的优点 | 第21-23页 |
| ·植物生物反应器的发展前景 | 第23页 |
| ·植物表达系统生产外源蛋白的策略 | 第23-30页 |
| ·植物生物反应器在生物药中的研究进展 | 第30-36页 |
| ·影响药用蛋白在植物中表达的因素 | 第36-39页 |
| ·表达产物的提纯 | 第39-40页 |
| ·转基因植物的生物安全性 | 第40-41页 |
| ·利用植物生产药用蛋白前景展望 | 第41页 |
| ·转基因番茄研究进展与应用前景 | 第41-46页 |
| ·番茄的生物学性状 | 第41-42页 |
| ·番茄的应用价值 | 第42页 |
| ·转基因番茄的研究进展 | 第42页 |
| ·转基因番茄作为生物反应器的研究进展 | 第42-44页 |
| ·番茄果实特异表达启动子 | 第44-46页 |
| ·转基因番茄研究的前景展望 | 第46页 |
| ·本研究的目的、意义 | 第46-48页 |
| ·技术路线 | 第48-49页 |
| 第二章 胸腺素α1 基因的设计与合成 | 第49-55页 |
| ·试验材料 | 第49页 |
| ·菌株 | 第49页 |
| ·试验方法 | 第49-50页 |
| ·Tα1 基因的设计和合成 | 第49-50页 |
| ·Tα1 融合基因（4×Tα1）序列的构建 | 第50页 |
| ·研究结果 | 第50-55页 |
| ·生工合成Tα1 基因序列 | 第50-51页 |
| ·Tα1 融合（4×Tα1）的构建 | 第51-55页 |
| 第三章 番茄表达载体的构建和工程菌株制备 | 第55-66页 |
| ·材料和方法 | 第55-61页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·方法 | 第56-61页 |
| ·结果与分析 | 第61-64页 |
| ·番茄果实特异表达载体PG-PRD12-4×Tα1-TP 的构建流程 | 第61页 |
| ·目的基因4×Tα1 的获得 | 第61-63页 |
| ·番茄果实特异表达载体PG-pRD12-4×Tα1 的构建及鉴定 | 第63-64页 |
| ·基因工程农杆菌的构建 | 第64页 |
| ·小结 | 第64-66页 |
| 第四章 利用农杆菌介导法将胸腺素α1 基因导入番茄 | 第66-79页 |
| ·材料和方法 | 第66-75页 |
| ·材料 | 第66-67页 |
| ·方法 | 第67-75页 |
| ·结果与分析 | 第75-78页 |
| ·番茄外植体的转化及再生植株的获得 | 第75-76页 |
| ·抗性植株的PCR 检测结果 | 第76-77页 |
| ·再生植株的Southern blot 分析结果 | 第77-78页 |
| ·小结 | 第78-79页 |
| 第五章 胸腺素α1 基因在转基因番茄中表达的研究 | 第79-96页 |
| ·材料和方法 | 第79-88页 |
| ·材料 | 第79-80页 |
| ·方法 | 第80-88页 |
| ·结果与分析 | 第88-95页 |
| ·转基因番茄总RNA 的RT-PCR 分析 | 第88-90页 |
| ·转4×Tα1 基因番茄总可溶性蛋白的测定 | 第90-91页 |
| ·转基因番茄总可溶蛋白的Western blot 分析 | 第91-92页 |
| ·转基因番茄的ELISA 检测 | 第92-95页 |
| ·小结 | 第95-96页 |
| 第六章 转基因番茄表达胸腺素α1 蛋白生物活性检测及转基因植株后代遗传分析 | 第96-101页 |
| ·材料和方法 | 第96-98页 |
| ·材料 | 第96-97页 |
| ·方法 | 第97-98页 |
| ·结果与分析 | 第98-100页 |
| ·4×Tα1 生物活性检测结果 | 第98-99页 |
| ·转4×Tα1 番茄后代遗传分析 | 第99-100页 |
| ·小结 | 第100-101页 |
| 第七章 胸腺素α1 基因的原核表达、蛋白纯化及活性分析 | 第101-118页 |
| ·材料与试剂 | 第101-102页 |
| ·菌株和质粒 | 第101-102页 |
| ·酶与试剂盒 | 第102页 |
| ·引物 | 第102页 |
| ·试剂 | 第102页 |
| ·主要仪器设备 | 第102页 |
| ·试验方法 | 第102-110页 |
| ·原核表达载体pQE30-4×Tα1 的构建 | 第102-107页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第107-109页 |
| ·表达产物的Western 印迹分析 | 第109-110页 |
| ·4×Tα1 蛋白的纯化 | 第110页 |
| ·淋巴细胞增殖的MTT 比色法检测4×Tα1 蛋白活性 | 第110页 |
| ·结果与分析 | 第110-117页 |
| ·原核表达载体的构建及分析 | 第110-112页 |
| ·目的蛋白的诱导表达结果 | 第112-113页 |
| ·不同时间诱导目的蛋白的表达分析 | 第113页 |
| ·目的蛋白的可溶性分析 | 第113-114页 |
| ·表达产物的Western bolt 分析 | 第114-115页 |
| ·4×Tα1 重组蛋白的纯化 | 第115-116页 |
| ·4×Tα1 重组蛋白的活性试验分析 | 第116-117页 |
| ·小结 | 第117-118页 |
| 第八章 讨论和结论 | 第118-123页 |
| ·讨论 | 第118-120页 |
| ·密码子的优化 | 第118页 |
| ·胸腺素α1 基因的串连 | 第118页 |
| ·胸腺素α1 基因在番茄中的表达量 | 第118-119页 |
| ·启动子的选择 | 第119页 |
| ·四体串联的Tα1 基因在大肠杆菌中的表达 | 第119-120页 |
| ·植物生物反应器表达Tα1 的安全性研究 | 第120页 |
| ·结论 | 第120-121页 |
| ·本研究的创新点 | 第121-123页 |
| 参考文献 | 第123-138页 |
| 附录1 主要仪器设备 | 第138-139页 |
| 附录2 试剂及溶液配制 | 第139-140页 |
| 致谢 | 第140-142页 |
| 发表的学术论文 | 第142-143页 |
