小麦脂肪酸α-双加氧酶体外表达及在小麦中表达模式分析
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-23页 |
| ·哺乳动物脂肪酸加氧酶的研究进展 | 第10-15页 |
| ·哺乳动物环加氧酶（COX） | 第10-13页 |
| ·COX1、2 的表达调控差异 | 第11页 |
| ·COX1、2 的序列信息差异 | 第11-13页 |
| ·脂加氧酶（LOX） | 第13-15页 |
| ·LOX 家族进化 | 第13页 |
| ·哺乳动物LOX 的结构与分类 | 第13-14页 |
| ·哺乳动物LOX 的表达调控 | 第14-15页 |
| ·细胞色素P450 加氧酶（EPOX） | 第15页 |
| ·植物脂肪酸加氧酶的研究进展 | 第15-22页 |
| ·脂加氧酶（LOX） | 第15-17页 |
| ·植物LOX 分类 | 第15-16页 |
| ·植物LOX 的亚器官定位及生物学功能 | 第16-17页 |
| ·脂肪酸alpha 双加氧酶（DOX） | 第17-22页 |
| ·DOX 的发现 | 第17-18页 |
| ·DOX 的催化活性 | 第18页 |
| ·其他植物的DOX 及研究进展 | 第18-19页 |
| ·DOX 的生物学功能 | 第19-20页 |
| ·DOX 血红素环境研究 | 第20-22页 |
| ·DOX 的过氧化物酶活性 | 第22页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 小麦DOX 基因大肠杆菌高效表达体系建立 | 第23-28页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·载体、菌株及分子生物学试剂 | 第23页 |
| ·主要培养基及溶液 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-25页 |
| ·DOX 原核表达载体构建 | 第24页 |
| ·DOX 原核表达 | 第24页 |
| ·DOX 包涵体初步纯化 | 第24-25页 |
| ·实验结果 | 第25-27页 |
| ·DOX 原核表达载体构建 | 第25页 |
| ·DOX 原核表达 | 第25页 |
| ·DOX 包涵体初步纯化 | 第25-27页 |
| ·讨论 | 第27-28页 |
| 第三章 小麦DOX 基因酵母表达阳性株的构建 | 第28-32页 |
| ·材料及仪器 | 第28-29页 |
| ·载体、菌株及分子生物学试剂 | 第28页 |
| ·引物设计与合成 | 第28页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第28页 |
| ·仪器 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29页 |
| ·pMD18-T-DOX 中间载体构建 | 第29页 |
| ·pPIC9k-DOX 穿梭载体构建 | 第29页 |
| ·pPIC9k-DOX 转化酵母及阳性克隆筛选 | 第29页 |
| ·实验结果 | 第29-31页 |
| ·pMD18-T-DOX 中间载体构建 | 第29页 |
| ·pPIC9k-DOX 穿梭载体构建 | 第29-30页 |
| ·pPIC9k-DOX 转化酵母及阳性克隆筛选 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| 第四章 小麦DOX 基因表达模式分析 | 第32-39页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·主要分子生物学试剂 | 第32页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第32-33页 |
| ·实验仪器 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-35页 |
| ·Northern 杂交 | 第33-35页 |
| ·植物材料处理 | 第33-34页 |
| ·总RNA 制备及甲醛变性凝胶电泳 | 第34页 |
| ·RNA 碱性转移 | 第34页 |
| ·Northern 杂交 | 第34-35页 |
| ·DOX 基因EST 统计分析 | 第35页 |
| ·实验结果 | 第35-37页 |
| ·Northern 杂交 | 第35-36页 |
| ·总RNA 制备 | 第35页 |
| ·RNA 碱性转移 | 第35-36页 |
| ·Northern 杂交 | 第36页 |
| ·DOX 基因EST 统计分析 | 第36-37页 |
| ·分析讨论 | 第37-39页 |
| 第五章 小麦ALDH 基因的同源克隆 | 第39-43页 |
| ·材料及仪器 | 第39页 |
| ·载体、菌株及分子生物学试剂 | 第39页 |
| ·引物合成 | 第39页 |
| ·实验仪器 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-40页 |
| ·扩增ALDH 基因引物设计 | 第39页 |
| ·RT-PCR 扩增目的基因 | 第39-40页 |
| ·cDNA 第一链合成 | 第39-40页 |
| ·目的基因ALDH 扩增 | 第40页 |
| ·ALDH 生物信息学分析 | 第40页 |
| ·序列同源性分析 | 第40页 |
| ·表达模式分析 | 第40页 |
| ·结果讨论 | 第40-42页 |
| ·RT-PCR 扩增目的基因 | 第40-41页 |
| ·ALDH 生物信息学分析 | 第41-42页 |
| ·序列同源性分析 | 第41页 |
| ·小麦ALDH表达模式分析 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| 第六章 结论和创新点 | 第43-44页 |
| ·结论 | 第43页 |
| ·创新点 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 附表 | 第50-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |
