摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-19页 |
·白色念珠菌菌丝形成的调控 | 第8-14页 |
·MAP Kinase途径 | 第8-10页 |
·cAMP-PKA途径 | 第10-11页 |
·pH-应答途径 | 第11-12页 |
·双组分信号转导途径 | 第12-13页 |
·CaTup1p介导的负调控途径 | 第13-14页 |
·TOR信号传导途径 | 第14-16页 |
·蛋白磷酸酯酶Ptc1p | 第16-17页 |
·本文研究的意义与主要内容 | 第17-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-37页 |
·试验材料 | 第19-27页 |
·菌株 | 第19-20页 |
·质粒DNA、引物和DNA序列的测定 | 第20页 |
·试验所用的酶类、试剂盒和特殊的试剂 | 第20页 |
·常用的试剂 | 第20-23页 |
·培养基 | 第23-24页 |
·主要的生化学试剂以及其它商品来源 | 第24-25页 |
·主要实验仪器 | 第25-27页 |
·实验方法 | 第27-37页 |
·大肠杆菌和酵母菌的培养与菌种保存 | 第27页 |
·用碱裂解法制备质粒 DNA | 第27页 |
·碱裂解法小量快速抽提质粒 DNA | 第27-28页 |
·CaCl_2 法制备感受态细胞 | 第28页 |
·玻璃珠法提取酵母(白色念珠菌)基因组DNA | 第28页 |
·DNA片断的柱纯化 | 第28-29页 |
·质粒DNA的酶切与连接 | 第29页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第29页 |
·酿酒酵母细胞的转化(80) | 第29-30页 |
·白色念珠菌细胞的转化 | 第30页 |
·CaTCO89 的克隆和酵母(白色念珠菌)表达质粒的构建 | 第30-31页 |
·CaPTC1 的克隆和酵母(白色念珠菌)表达载体的构建 | 第31页 |
·CaTCO89 和CaPTC1 基因的敲除 | 第31-33页 |
·α互补筛选阳性克隆实验 | 第33页 |
·倍比稀释试验 | 第33页 |
·用pET系统表达基因CaPTC1 的催化区域 | 第33-35页 |
·白色念珠菌基因CaPTC1 编码蛋白活力的测定 | 第35-36页 |
·白色念珠菌形态学观察 | 第36页 |
·生物信息学方法 | 第36-37页 |
第三章 结果与讨论 | 第37-91页 |
·CaTCO89 的克隆、鉴定及其功能研究 | 第37-67页 |
·CaTCO89 基因的序列比较 | 第37-38页 |
·CaTCO89 基因的克隆 | 第38-41页 |
·CaTCO89 的序列分析 | 第41-43页 |
·CaTCO89 能互补酿酒酵母ScTCO89 的功能 | 第43-46页 |
·白色念珠菌基因CaTCO89 的敲除 | 第46-52页 |
·白色念珠菌中CaTCO89 的功能鉴定 | 第52-65页 |
·讨论 | 第65-67页 |
·CaPTC1 的克隆、鉴定及其功能研究 | 第67-91页 |
·CaPTC1 基因的序列比较 | 第67-68页 |
·CaPTC1 基因的分析 | 第68-69页 |
·CaPTC1 基因的克隆 | 第69-72页 |
·CaPTC1 的敲除 | 第72-77页 |
·CaPTC1 的功能鉴定 | 第77-80页 |
·重组蛋白His_6-ΔCaPtc1p的克隆、表达和活性测定 | 第80-90页 |
·讨论 | 第90-91页 |
第四章 总结与展望 | 第91-92页 |
·主要创新点 | 第91页 |
·相关工作的前景展望 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-101页 |
附录1 生化名词缩写 | 第101-102页 |
附录2 基因名词缩写 | 第102-103页 |
附录3 引物序列表 | 第103-104页 |
发表论文和科研情况说明 | 第104-105页 |
致谢 | 第105页 |