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白色念珠菌基因CaTCO89和CaPTC1的鉴定及功能研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
第一章 文献综述第8-19页
   ·白色念珠菌菌丝形成的调控第8-14页
     ·MAP Kinase途径第8-10页
     ·cAMP-PKA途径第10-11页
     ·pH-应答途径第11-12页
     ·双组分信号转导途径第12-13页
     ·CaTup1p介导的负调控途径第13-14页
   ·TOR信号传导途径第14-16页
   ·蛋白磷酸酯酶Ptc1p第16-17页
   ·本文研究的意义与主要内容第17-19页
第二章 材料与方法第19-37页
   ·试验材料第19-27页
     ·菌株第19-20页
     ·质粒DNA、引物和DNA序列的测定第20页
     ·试验所用的酶类、试剂盒和特殊的试剂第20页
     ·常用的试剂第20-23页
     ·培养基第23-24页
     ·主要的生化学试剂以及其它商品来源第24-25页
     ·主要实验仪器第25-27页
   ·实验方法第27-37页
     ·大肠杆菌和酵母菌的培养与菌种保存第27页
     ·用碱裂解法制备质粒 DNA第27页
     ·碱裂解法小量快速抽提质粒 DNA第27-28页
     ·CaCl_2 法制备感受态细胞第28页
     ·玻璃珠法提取酵母(白色念珠菌)基因组DNA第28页
     ·DNA片断的柱纯化第28-29页
     ·质粒DNA的酶切与连接第29页
     ·大肠杆菌感受态细胞的转化第29页
     ·酿酒酵母细胞的转化(80)第29-30页
     ·白色念珠菌细胞的转化第30页
     ·CaTCO89 的克隆和酵母(白色念珠菌)表达质粒的构建第30-31页
     ·CaPTC1 的克隆和酵母(白色念珠菌)表达载体的构建第31页
     ·CaTCO89 和CaPTC1 基因的敲除第31-33页
     ·α互补筛选阳性克隆实验第33页
     ·倍比稀释试验第33页
     ·用pET系统表达基因CaPTC1 的催化区域第33-35页
     ·白色念珠菌基因CaPTC1 编码蛋白活力的测定第35-36页
     ·白色念珠菌形态学观察第36页
     ·生物信息学方法第36-37页
第三章 结果与讨论第37-91页
   ·CaTCO89 的克隆、鉴定及其功能研究第37-67页
     ·CaTCO89 基因的序列比较第37-38页
     ·CaTCO89 基因的克隆第38-41页
     ·CaTCO89 的序列分析第41-43页
     ·CaTCO89 能互补酿酒酵母ScTCO89 的功能第43-46页
     ·白色念珠菌基因CaTCO89 的敲除第46-52页
     ·白色念珠菌中CaTCO89 的功能鉴定第52-65页
     ·讨论第65-67页
   ·CaPTC1 的克隆、鉴定及其功能研究第67-91页
     ·CaPTC1 基因的序列比较第67-68页
     ·CaPTC1 基因的分析第68-69页
     ·CaPTC1 基因的克隆第69-72页
     ·CaPTC1 的敲除第72-77页
     ·CaPTC1 的功能鉴定第77-80页
     ·重组蛋白His_6-ΔCaPtc1p的克隆、表达和活性测定第80-90页
     ·讨论第90-91页
第四章 总结与展望第91-92页
   ·主要创新点第91页
   ·相关工作的前景展望第91-92页
参考文献第92-101页
附录1 生化名词缩写第101-102页
附录2 基因名词缩写第102-103页
附录3 引物序列表第103-104页
发表论文和科研情况说明第104-105页
致谢第105页

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