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传染性胃肠炎病毒基因组大片段克隆及其主要抗原片段在伪狂犬病病毒中的表达

摘要第1-6页
Abstract第6-13页
第一章 文献综述第13-26页
 1.TGEV的分子生物学研究概况第13-22页
   ·传染性胃肠炎病毒基因组学第13-15页
   ·TGEV蛋白结构和功能第15-18页
   ·TGEV变异性及致病性研究概况第18-19页
   ·TGEV反向遗传研究概况第19-22页
   ·对传染性胃肠炎进一步研究的展望第22页
 2.伪狂犬病病毒基因缺失病毒及其表达载体研究进展第22-25页
 3.本研究的目的和意义第25-26页
第二章 传染性胃肠炎病毒3′端8.5kb片段的克隆及序列分析第26-43页
 1.材料与方法第26-32页
   ·材料第26-27页
   ·仪器第27页
   ·病毒RNA的提取第27页
   ·TGEV 3′端8.5 kb片断分段扩增第27-29页
   ·TGEV 3′端8.5kb片断分段克隆第29-31页
   ·TGEV 3′端8.5 kb片断序列特征分析第31-32页
 2.结果与分析第32-38页
   ·TGEV 3′端片断的分段RT-PCR扩增第32-34页
   ·TGEV 3′端片断的分段克隆第34-38页
   ·TGEV 3′端片断序列的生物信息学分析第38页
 3.讨论第38-42页
 4.结论第42-43页
第三章 传染性胃肠炎病毒大片段的扩增与克隆第43-67页
 1.材料和方法第43-55页
   ·材料第43-44页
   ·引物的设计与合成第44-45页
   ·病毒RNA的提取第45-46页
   ·TGEV-A、TGEV-B、TGEV-C、TGEV-DE和TGEV-F 5个片段RT-PCR扩增第46-52页
   ·TGEV-A、TGEV-B和TGEV-F 3个片段的克隆第52-55页
 2.结果与分析第55-61页
   ·TGEV-A片段的RT-PCR扩增第55页
   ·TGEV-B片段的RT-PCR扩增第55-56页
   ·TGEV-C片段的RT-PCR扩增第56页
   ·TGEV-DE片段的RT-PCR扩增第56-58页
   ·TGEV-F片段的RT-PCR扩增第58-59页
   ·TGEV-A片段的克隆第59页
   ·TGEV-B片段的克隆第59-61页
   ·TGEV-F片段的克隆第61页
 3 讨论第61-66页
 4 结论第66-67页
第四章 传染性胃肠炎病毒S基因主要抗原片断的原核表达和真核表达第67-93页
 1 材料与方法第67-80页
   ·实验材料第67-69页
   ·S基因主要抗原片段在原核表达载体pET32a(+)、pET28a(+)中的表达第69-75页
   ·S基因主要抗原片段在Vero细胞中的表达第75-80页
 2.结果与分析第80-90页
   ·S基因主要抗原片段在pET32a(+)载体中的原核表达第80-84页
   ·S基因主要抗原片段在pET28a(+)载体中的原核表达第84-86页
   ·S基因主要抗原片段在Vero细胞中的真核表达第86-90页
 3.讨论第90-92页
 4.结论第92-93页
第五章 传染性胃肠炎病毒S基因主要抗原片段在伪狂犬病病毒中的表达第93-109页
 1 材料与方法第94-101页
   ·实验材料第94页
   ·含传染性胃肠炎病毒S基因主要抗原片段的伪狂犬病病毒转移载体的构建第94-98页
   ·TGEV S基因主要抗原片段与伪狂犬病病毒基因缺失疫苗株SA215的同源重组及表达第98-101页
 2.结果与分析第101-107页
   ·含传染性胃肠炎病毒S基因主要抗原片段的伪狂犬病病毒转移载体的构建第101-103页
   ·pPPI2.EGFP.S11#与SA215的同源重组第103-107页
 3.讨论第107-108页
 4.结论第108-109页
第六章 传染性胃肠炎病毒与伪狂犬病病毒全基因组密码子用法特点分析第109-130页
 1.材料与方法第111-114页
   ·材料和软件第111页
   ·实验方法步骤第111-114页
 2.结果与分析第114-127页
   ·TGEV和PRV分析的编码序列第114-116页
   ·PRV SA215株病毒gD基因序列的测定第116-117页
   ·PRV和TGEV RSCU值、Nc值、GC、GC_(3S)等各项参数的计算第117-123页
   ·影响PRV和TGEV密码子偏向性因素初步分析第123-127页
 3.讨论第127-129页
 4.结论第129-130页
参考文献第130-141页
致谢第141-142页
攻读博士学位期间发表的学术论文第142页

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