| 中文摘要 | 第1-3页 |
| ABSTRACT | 第3-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第6-22页 |
| ·重组工程及其应用研究 | 第6-19页 |
| ·重组 | 第6页 |
| ·同源重组 | 第6-12页 |
| ·重组工程 | 第12-19页 |
| ·运动发酵单胞菌介绍 | 第19-20页 |
| ·运动发酵单胞菌介绍 | 第19页 |
| ·运动发酵单胞菌重组研究 | 第19-20页 |
| ·运动发酵单胞菌现有遗传操作手段及其应用 | 第20页 |
| ·本课题的研究目的、内容和技术路线 | 第20-22页 |
| ·研究目的 | 第20页 |
| ·研究内容 | 第20-21页 |
| ·技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第22-34页 |
| ·实验材料 | 第22-27页 |
| ·菌株与质粒 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24-25页 |
| ·培养基及常用溶液的配制 | 第25-27页 |
| ·PCR反应引物 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-34页 |
| ·菌株的培养 | 第27-28页 |
| ·PCR反应 | 第28-30页 |
| ·酶切反应 | 第30页 |
| ·电泳分析 | 第30页 |
| ·目的条带的回收 | 第30页 |
| ·连接反应 | 第30-31页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第31页 |
| ·感受态细胞的转化 | 第31-32页 |
| ·E. coli质粒的小量提取（SDS-碱裂解法） | 第32页 |
| ·Z.mobilis质粒的小量提取（Nester法） | 第32-33页 |
| ·Z. mobilis染色体的提取 | 第33页 |
| ·Z. mobilis生长曲线的测定 | 第33-34页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第34-47页 |
| ·ZM4（pKD46）的构建及评价 | 第34-38页 |
| ·pKD46 电穿孔转化ZM4 | 第34-35页 |
| ·ZM4（pKD46）的进一步验证 | 第35-36页 |
| ·ZM4（pKD46）抗性水平、生长曲线、稳定性测定试验 | 第36-38页 |
| ·pZB21-red的构建 | 第38-40页 |
| ·载体片段的制备 | 第38-39页 |
| ·pZB21-red质粒的构建 | 第39-40页 |
| ·ZM4（pZB21-red）的构建和生长曲线的测定 | 第40-42页 |
| ·ZM4（pZB21-red）的构建 | 第40-41页 |
| ·ZM4（pZB21-red）生长曲线测定试验 | 第41-42页 |
| ·重组应用－ZM4 染色体DNA的靶向修饰 | 第42-45页 |
| ·打靶片段制备 | 第42页 |
| ·制备阿拉伯糖诱导的ZM4（pZB21-red）、ZM4（pKD46）感受态细胞 | 第42页 |
| ·电穿孔转化和重组子鉴定 | 第42-45页 |
| ·pZB21-red的去除 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第四章结论 | 第47-48页 |
| ·结论 | 第47页 |
| ·建议 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 附录一 有关质粒的物理图谱 | 第53-55页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
