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连续PCR扩增过程中异常现象的发生机理研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-16页
第1章 核酸扩增技术的发展历史和应用第16-25页
   ·PCR 技术的发展第17-21页
   ·PCR 技术的应用第21页
   ·基于 PCR 的分子生物学标记方法第21-25页
第2章 PCR(Polymerase Chain Reaction)反应的关键和存在的问题第25-46页
   ·核酸聚合酶第27-30页
   ·引物及巢式PCR(Nested primer PCR)第30-32页
   ·PCR 反应体系中的非必须成分——助变性剂的使用第32-33页
   ·PCR 反应程序与降落PCR(Touch down PCR)和热启动PCR(Hot-start PCR)第33-35页
   ·PCR 反应进行的环境——PCR 热循环仪第35-36页
   ·PCR 实验中常见的异常现象第36-42页
   ·PCR 反应中的污染第42-43页
   ·本研究的背景及意义第43-46页
第3章 多次重复 PCR 扩增的最终必然结果第46-58页
   ·实验材料和方法第46-49页
   ·实验结果第49-54页
     ·185 rDNA 序列的连续扩增结果第49-50页
     ·Plasmid (T Easy Vector)序列的连续扩增结果第50-52页
     ·Bacteriophage λ DNA 序列的连续扩增结果第52-54页
   ·讨论第54-58页
第4章 重复扩增异常产物——样孔带的组成和性质第58-76页
   ·实验材料和方法第58-64页
     ·51 Nuclease 处理第58-59页
     ·限制性内切酶分析第59-60页
     ·甲酰胺辅助变性复性分析第60页
     ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析第60-62页
     ·变性琼脂糖电泳分析第62-64页
   ·实验结果第64-72页
     ·51 Nuclease 处理第64-65页
     ·限制性内切酶分析第65-66页
     ·甲酰胺辅助变性复性分析第66-69页
     ·变性PAGE 分析第69-70页
     ·变性琼脂糖电泳分析第70-72页
   ·讨论第72-76页
第5章 样孔带的产生机理第76-111页
   ·实验材料和方法第76-84页
     ·引物浓度和扩增循环数与样孔带第77页
     ·DNA 聚合酶、引物浓度与样孔带第77-78页
     ·不对称 PCR 和单引物-互补引物PCR第78页
     ·巢式 PCR(Nested PCR)第78-79页
     ·PCR 动力学模拟和程序调整第79-81页
     ·复杂产物的模拟——DNase I、限制性内切酶处理第81-82页
     ·复杂产物的模拟——非全长片段对扩增的影响第82-83页
     ·热循环对模板的剪切第83-84页
   ·实验结果第84-108页
     ·引物浓度和扩增循环数与样孔带第84-87页
     ·DNA 聚合酶、引物浓度与样孔带第87-89页
     ·不对称 PCR 和单引物-互补引物 PCR第89-90页
     ·巢式 PCR (Nested PCR)第90-91页
     ·PCR 动力学模拟和程序调整第91-100页
     ·复杂产物的模拟——DNase I、限制性内切酶处理第100-103页
     ·复杂产物的模拟——非全长片段对扩增的影响第103-107页
     ·热循环对模板的剪切第107-108页
   ·讨论第108-111页
第6章 结论及意义第111-114页
参考文献第114-130页
致谢第130-132页
个人简历第132页
在读期间发表文章情况第132页

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